不同性別大鼠創(chuàng)傷失血性休克后多形核白細(xì)胞反應(yīng)的差異及胃復(fù)安干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、已證實(shí)創(chuàng)傷失血后性別因素會(huì)對(duì)T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及器官功能產(chǎn)生影響，但在相同情況下性別是否會(huì)影響多形核白細(xì)胞(PMN)的反應(yīng)還不清楚，本研究的目的包括： 1.建立非肝素化大鼠創(chuàng)傷失血性休克動(dòng)物模型，觀察創(chuàng)傷失血性休克后不同的性別對(duì)PMN反應(yīng)的影響。 2.在體實(shí)時(shí)觀察創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇后PMN在毛細(xì)血管后微靜脈內(nèi)皮的附壁是否存在性別差異，并測(cè)定PMN黏附因子CD11b的表達(dá)。 3.觀察創(chuàng)傷失血后促進(jìn)垂體前葉釋放泌乳素的

2、藥物-胃復(fù)安對(duì)機(jī)體的免疫功能和PMN凋亡的干預(yù)作用。 方法 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為發(fā)情前期的雌性和成年雄性SD大鼠，分為雄性，雌性和對(duì)照3組。麻醉后先在腹部正中作5cm切口造成軟組織損傷，分層縫合后通過放血的方法將平均動(dòng)脈壓降至35±5mmHg，并維持1h，然后在60min內(nèi)用4倍于最大失血量的乳酸林格氏液進(jìn)行復(fù)蘇。對(duì)照組不進(jìn)行休克及液體復(fù)蘇。復(fù)蘇后2h和24h分別測(cè)定外周血PMN釋放過氧化物陰離子和彈性蛋白酶的情況及組織中髓過

3、氧化物酶和丙二醛的含量。 2.復(fù)蘇后2h和24h在腹部正中作5cm切口，取出回盲部附近的腸系膜，顯微鏡下觀察PMN在腸系膜毛細(xì)血管后小靜脈內(nèi)的附壁情況并錄像。通過股動(dòng)脈抽取外周血分離PMN，用流式細(xì)胞儀測(cè)定黏附分子CD11b的表達(dá)。 3.成年雄性SD大鼠，隨機(jī)分為3組：胃復(fù)安治療組復(fù)蘇前皮下注射胃復(fù)安(100mg/100g體重)，安慰劑治療組皮下注射等體積的生理鹽水作為安慰劑，對(duì)照組不進(jìn)行休克復(fù)蘇和給藥。然后在60min

4、內(nèi)用4倍于最大失血量的乳酸林格氏液進(jìn)行復(fù)蘇。復(fù)蘇后2h將動(dòng)物處死，通過放射免疫法測(cè)定脾臟組織勻漿IL-1β和IL-6水平以及外周血血清中的TNF-α和IL-8水平。用流式細(xì)胞儀測(cè)定PMNFas的表達(dá)。 結(jié)果: 1.在復(fù)蘇后2h、24h，用PMA刺激PMN所產(chǎn)生的過氧化物陰離子與創(chuàng)傷失血和性別均無關(guān)。而用fMLP刺激所產(chǎn)生的過氧化物陰離子和用LPS刺激所產(chǎn)生的彈性蛋白酶水平雄性明顯高于雌性(P＜0.05)。創(chuàng)傷失血性休克后

5、組織中髓過氧化物酶活性和丙二醛含量，雄性雌性均升高，但雄性升高更加顯著。組織濕干比的結(jié)果也顯示雄性組高于雌性組。 2.復(fù)蘇后2h，雌性組(1.8±03)和對(duì)照組(0.4±0.2)的PMN附壁數(shù)明顯低于雄性組(4.2±0.9，P＜0.05)。但6h后各組之間無明顯變化。復(fù)蘇后2h和6h，PMN黏附分子CD11b的表達(dá)雄性組明顯高于雌性組和對(duì)照組(P＜0.01)，而雌性組和對(duì)照組間無明顯差異。 3.雄性大鼠創(chuàng)傷失血性休克后經(jīng)

6、胃復(fù)安治療，脾臟組織生成IL-1β和IL-6的功能得到保護(hù)，而安慰劑治療組IL-1β和IL-6的生成量明顯減少。血清中TNF-α和IL-8水平，生理鹽水治療組較對(duì)照組明顯升高。胃復(fù)安治療組與對(duì)照組相比無明顯變化。PMN的Fas表達(dá)率生理鹽水治療組與對(duì)照組相比明顯降低(P＜0.01)，雖然胃復(fù)安治療組Fas表達(dá)率也較對(duì)照組降低(P＜0.05)，卻明顯高于生理鹽水治療組(P＜0.05)。 結(jié)論: 1.創(chuàng)傷失血性休克后PMN的