產(chǎn)前糖皮質(zhì)激素治療對(duì)仔鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育及神經(jīng)元凋亡的影響.pdf

1、目的:通過孕鼠產(chǎn)前應(yīng)用不同療程地塞米松治療，觀察產(chǎn)前糖皮質(zhì)激素治療(ACT)對(duì)仔鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育和神經(jīng)元凋亡的影響，探討其可能的機(jī)制，指導(dǎo)臨床用藥。 方法:SPF級(jí)SD孕大鼠34只，隨機(jī)將孕鼠分為4組，(1)產(chǎn)前1劑組(n=8)于妊娠第17天(孕足月2卜22天)肌注地塞米松0．8mg／(kg．d)；(2)產(chǎn)前三劑組(n：8)于妊娠第17、18、19天各肌注地塞米松O．8mg／(kg．d)；(3)產(chǎn)前四劑組(n=10)于妊娠第1

2、7、18、19、20天各肌注地塞米松0．8mg／(kg．d)；(4)對(duì)照組(n=8)于妊娠第17、18、19、20天各肌注生理鹽水O．5ml。四組孕鼠分娩后，分別取1、7、M日齡仔鼠，每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)取16只稱重后處死，斷頭取腦稱重，免疫組化染色結(jié)合圖像分析技術(shù)檢測(cè)腦海馬、白質(zhì)區(qū)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)情況，原位末端法檢測(cè)(Tunel)腦神經(jīng)元凋亡情況，改良WesternBlot法檢測(cè)腦bcl一2蛋白的含量，并與對(duì)照組作比較

3、。 結(jié)果:(1)1日齡、7日齡仔鼠，ACT各組體重明顯減輕，產(chǎn)前4劑組體重下降更明顯；14日齡仔鼠僅產(chǎn)前4劑組體重仍降低。(2)1日齡仔鼠，ACT各組腦重均明顯降低：7日齡仔鼠，產(chǎn)前3劑、4劑組腦重均下降；14日齡仔鼠，僅產(chǎn)前4劑組腦重明顯下降。(3)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞在仔鼠腦海馬和白質(zhì)中的表達(dá)情況顯示：1日齡仔鼠僅在軟腦脊膜見少量陽(yáng)性細(xì)胞，胞體小，突起稀疏，各組比較差異無顯著意義；7日齡仔鼠腦海馬、白質(zhì)區(qū)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞開始增多

4、，突起變長(zhǎng)；M日齡仔鼠腦海馬、白質(zhì)區(qū)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量增加更明顯，染色深，胞體增大，密度增加。產(chǎn)前3劑、4劑組7、14日齡仔鼠腦海馬和白質(zhì)區(qū)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞較對(duì)照組免疫染色淺，突起短、疏，相對(duì)含量明顯減少，提示星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育不良。產(chǎn)前1劑組與對(duì)照組相比無明顯差別。(4)ACT對(duì)仔鼠腦神經(jīng)元凋亡的影響：產(chǎn)前3劑、4劑組1日齡仔鼠與對(duì)照組相比，神經(jīng)元凋亡明顯增加；產(chǎn)前4劑組7日齡仔鼠與對(duì)照組相比，神經(jīng)元凋亡明顯增加；產(chǎn)前1劑組與對(duì)照組相

5、比無明顯差異。(5)ACT對(duì)仔鼠腦bcl一2蛋白表達(dá)的影響：產(chǎn)前3劑、4劑組1日齡仔鼠與對(duì)照組相比，bcl一2蛋白含量明顯下降；產(chǎn)前4劑組7日齡仔鼠與對(duì)照組相比，bcl一2蛋白含量明顯下降；產(chǎn)前1劑組與對(duì)照組相比無明顯差異。 結(jié)論:(1)ACT可引起仔鼠體重、腦重下降。(2)正常大鼠仔鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)GFAP陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育的時(shí)間、部位均不同。重復(fù)ACT可影響仔鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的成熟。(3)正常仔鼠腦神經(jīng)元可見凋亡細(xì)胞，神經(jīng)元凋