一種新的受體修飾T細胞免疫治療腫瘤的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立一個同時具有破壞腫瘤血管內皮和殺傷腫瘤細胞作用、適用于多種類型惡性實體瘤的T細胞過繼性免疫治療腫瘤新技術.方法:應用分子克隆技術重組嵌合性T細胞受體VEGF121-hinger-FcRγ(Vhγ),分別構建逆轉錄病毒載體介導的VEGF121-hinger-FcRγ轉移系統MSCVneo-Vhγ和綠色熒光蛋白(GFP)轉移系統MSCVhyg-GFP.采用磷酸鈣法轉染包裝細胞系PT67,篩選離滴度的病毒感染細胞.從新鮮肝癌組織中分

2、離腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL),經rhIL-2、CD3 McAb和CD28 McAb聯合刺激生長后,用不同的病毒上清分別重復感染,篩選后的細胞分別取名為MSCVneo-TIL、MSCVneo-Vhγ-TIL和MSCVhyg-GFP-TIL.在熒光顯微鏡下直接觀察MSCVhyg-GFP-TIL表達熒光蛋白的情況,應用RT-PCR檢測目的基因的轉錄,應用MTT比色法分析轉染TIL細胞對體外培養(yǎng)的4種靶細胞的殺傷活性.其中成纖維細胞系NIH3T

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