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文檔簡介
1、哺乳動物CTHRC1(collagen triple helix corltainingl)基因是2005年發(fā)現(xiàn)的一個新基因,最先是在對正常大鼠動脈和球狀損傷動脈的差異表達序列篩選中發(fā)現(xiàn)的。它瞬時表達于損傷血管部位,通過抑制膠原基質的沉積和促進細胞遷移參與了血管的損傷修復過程。 在PAC1和MEF細胞中過表達CTHRC1以后能夠顯著提高細胞的遷移能力。同時最近的研究報導顯示CTHRC1的異常高表達廣泛存在于人類多種實體癌中,可能
2、與癌組織的侵襲和惡性化相關。為了探討CTHRC1在肝癌的發(fā)生發(fā)展中是否起到一定的作用,我們進行了初步的研究工作。 我們運用Northern blot的方法分析了16種人類正常組織中和11種人類腫瘤細胞株中CTHRC1基因mRNA的表達水平,發(fā)現(xiàn)CTHRC1在多種人類正常組織中都有表達,而在正常肝臟組織中幾乎沒有表達。而在所檢測的11種人類腫瘤細胞株中,只在Hela和K562這兩種細胞株中檢測到CTHRC1的表達,在其余細胞株中都
3、沒有檢測到表達。 隨后我們運用Northern blot和real-time PCR的方法分析了14例肝癌患者中癌和癌旁肝組織CTHRC1基因mRNA的表達水平,結果顯示在其中11對樣品中CTHRC1基因在癌組織中的表達高于癌旁組織(P<0.01),而在其余3對中沒有統(tǒng)計學差別。 同時我們運用RT-PCR和rea1-time PCR的方法分析了8種肝癌細胞株中CTHRC1基因mRNA的表達水平,結果顯示CTHRC1在He
4、pG2、Hep3B、MHCC97-L、HCCLM3、HuH7這5種肝癌細胞株中有較高的表達水平,而在BEK-1402、SMMOL/LC-7721、SMMC-7701中的表達水平很低。 為了探討CTHRC1基因表達水平的差異在肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中所起的作用,我們通過體外侵襲和遷移實驗,對CTHRC1基因過表達以后MHCC97-L肝癌細胞株的浸潤和轉移能力進行了分析。研究結果表明,CTHRC1基因的過表達能夠促進肝癌細胞的浸潤和運動
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