2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、腎癌,又稱腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma,RCC),是一種泌尿系統(tǒng)特有的惡性腫瘤,發(fā)病率次于膀胱癌,在泌尿系腫瘤中占據(jù)第二位。由于其不具備特異的臨床病癥狀,使得早期診斷和治療具有一定的難度。目前,RCC病例中有30%-50%屬于偶然發(fā)現(xiàn)的無癥狀患者,而且,約30%的患者在診斷時已經(jīng)或?qū)l(fā)生轉(zhuǎn)移病變。研究發(fā)現(xiàn),早期侵襲轉(zhuǎn)移是造成腫瘤預(yù)后不良的主要原因,而且,發(fā)現(xiàn)基因甲基化與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。TET1(Ten El

2、even Translocation1)是體內(nèi)一種高效催化 DNA胞嘧啶的加氧酶,具有明顯的去甲基化作用,在多種腫瘤組織,如肝細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞肺癌、前列腺癌、膀胱癌中低表達(dá)。目前,關(guān)于TET1在RCC發(fā)病機(jī)制中作用尚不明確。因此,探討TET1在RCC侵襲轉(zhuǎn)移中的作用,對RCC的診斷、治療具有極其重要的意義。
  第一部分 TET1在腎癌組織中的表達(dá)
  目的:檢測TET1在腎癌組織、癌旁組織的表達(dá)差異。
  方法:采用

3、實(shí)時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)檢測82例腎癌患者的癌組織和癌旁組織 TET1 mRNA的表達(dá)水平,同時采用免疫組化(Immunohistochemistry)和蛋白質(zhì)印跡法(Western blot, WB)對癌組織和癌旁組織中的TET1蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測,對檢測結(jié)果進(jìn)行對比、分析。
  結(jié)果: qRT-PCR結(jié)果顯示腎癌組織中TET1 mRNA的表達(dá)水平明顯低于癌旁組

4、織(p<0.05)。免疫組化與蛋白質(zhì)印跡法的結(jié)果顯示,腎癌組織中TET1蛋白表達(dá)平明顯低于癌旁組織(p<0.05)。
  結(jié)論:TET1 mRNA及蛋白表達(dá)水平在腎癌組織中均顯著下調(diào),表明TET1可能直接或間接的參與腎癌的發(fā)生與發(fā)展。
  第二部分腎癌TET1低表達(dá)在臨床中的意義
  目的:對比TET1在腎癌組織和癌旁組織的表達(dá)水平,并分析腎癌病理分級、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TET1表達(dá)與腎癌患者預(yù)后的關(guān)系。
 

5、 方法:對性別、年齡、分期、分級等臨床病理參數(shù)、TET1表達(dá)與術(shù)后生存進(jìn)行相關(guān)性分析,采用Kaplan-Meier法對腎癌患者進(jìn)行生存分析,以log rank比較生存率。p<0.05或p<0.01時認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)果:生存分析結(jié)果顯示,TET1表達(dá)越低,生存期越短。單因素及多因素分析表明,腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TET1低表達(dá)導(dǎo)致的DNA高度甲基化與腎癌的預(yù)后有關(guān)。
  結(jié)論: TET1的表達(dá)水平與腎癌患者的預(yù)后密

6、切相關(guān)。
  第三部分 TET1對腎癌細(xì)胞功能及腫瘤進(jìn)展的影響
  目的:通過細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn),研究分析TET1表達(dá)與腎癌細(xì)胞功能及腫瘤進(jìn)展的關(guān)系。
  方法:首先使用蛋白質(zhì)印跡法(WB)測定腎癌細(xì)胞系 ACHN和人胚腎細(xì)胞系293T中的表達(dá)水平,然后采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法測定腎癌細(xì)胞ACHN和293T細(xì)胞的增殖能力,Transwell小室檢測腎癌細(xì)胞ACHN和293T的侵襲能力,對實(shí)驗(yàn)

7、結(jié)果進(jìn)行比較分析。
  結(jié)果:與293T細(xì)胞相比,TET1在腎癌細(xì)胞系A(chǔ)CHN的表達(dá)顯著降低(p<0.05)。CCK-8和Transwell小室檢測結(jié)果顯示,TET1低表達(dá)的腎癌細(xì)胞系A(chǔ)CHN的增殖能力和侵襲能力均顯著高于TET1高表達(dá)的293T。
  結(jié)論: TET1在腎癌細(xì)胞系中低表達(dá),提示TET1可能參與腎癌的發(fā)生和發(fā)展。
  第四部分 TET1過表達(dá)對腎癌細(xì)胞凋亡和侵襲能力的影響和可能的分子機(jī)制
  目的

8、:研究分析TET1過表達(dá)對腎癌細(xì)胞凋亡和侵襲能力的影響及可能的分子機(jī)制。
  方法:首先轉(zhuǎn)染TET1過表達(dá)質(zhì)粒于腎癌細(xì)胞ACHN,采用蛋白質(zhì)印跡法(WB)檢測 TET1在過表達(dá)質(zhì)粒和對照質(zhì)粒的腎癌細(xì)胞 ACHN的表達(dá)水平,然后使用Annexin V和PI染色的方法通過流式細(xì)胞儀檢測兩種細(xì)胞的凋亡情況;Transwell法分析兩種細(xì)胞的侵襲能力,對結(jié)果進(jìn)行比較分析。WB法檢測過表達(dá) TET1對 Wnt信號信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影

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