經(jīng)穴信號(hào)傳導(dǎo)與Cx43的相關(guān)性研究.pdf

1、針灸，是中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的重要組成部分，應(yīng)用于臨床實(shí)踐已有幾千年的歷史。由于其獨(dú)特的治療方法、神奇的治療效果，針灸逐漸得到了世界的認(rèn)可和接納，尤其是針刺鎮(zhèn)痛效應(yīng)更是被全世界所關(guān)注。但是，穴位、經(jīng)絡(luò)的物質(zhì)基礎(chǔ)是什么？針刺效應(yīng)是如何產(chǎn)生的？經(jīng)穴信號(hào)到底是如何傳導(dǎo)的？這些問題至今沒有獲得令人滿意的回答?？p隙連接(gap junction，GJ)是動(dòng)物細(xì)胞間最普遍存在的親水性低電阻通道。由縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(gap junctional in

2、tercellular communication，GJIC)是細(xì)胞間直接傳遞信號(hào)的重要方式之一，在細(xì)胞生長發(fā)育、多細(xì)胞器官間的協(xié)調(diào)及機(jī)體自我穩(wěn)定控制方面有著重要作用?？p隙連接蛋白 (connexin，Cx)是構(gòu)成縫隙連接通道的基本結(jié)構(gòu)和功能蛋白。前人的研究結(jié)果表明，針刺能引起與傳統(tǒng)意義的經(jīng)絡(luò)一致的線性現(xiàn)象，同時(shí)測得該線上表現(xiàn)為低電阻。那么，針刺，以及由此引起的循經(jīng)感傳現(xiàn)象，針刺鎮(zhèn)痛等針刺效應(yīng)、縫隙連接細(xì)胞間通訊之間是否存在內(nèi)在的聯(lián)系？

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　　 因此，我們提出了如下假說：具有低電阻特性的皮膚、皮下組織細(xì)胞間縫隙連接是經(jīng)穴之間信號(hào)傳導(dǎo)的主要通道，由縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊為經(jīng)穴信號(hào)傳遞的主要方式，細(xì)胞間液、組織間液為通道緩沖系統(tǒng)。一旦經(jīng)穴接受刺激，縫隙連接和縫隙連接通訊將被激活，在神經(jīng)-體液因素的共同作用下信號(hào)將沿著體表低電阻區(qū)域細(xì)胞間的縫隙連接直接傳遞，而大腦對(duì)經(jīng)穴接受的刺激信號(hào)具有整合作用，經(jīng)穴、大腦、效應(yīng)靶器官之間可能產(chǎn)生對(duì)話。基于以上假說，我們?cè)O(shè)計(jì)了如下研

4、究方案：(1)首先著重研究了皮膚中主要的縫隙連接蛋白Cx43在大鼠穴位、經(jīng)脈上的表達(dá)及針刺對(duì)該表達(dá)的影響(第一部分)，探討了穴位、經(jīng)脈與縫隙連接通訊聯(lián)系的物質(zhì)基礎(chǔ)；(2)確定了穴位、經(jīng)脈存在豐富的縫隙連接蛋白Cx43的表達(dá)并存在一定的循經(jīng)特異性后，應(yīng)用RNA干擾技術(shù)沉默大鼠穴位局部縫隙連接蛋白的表達(dá)，觀察對(duì)針刺效應(yīng)的影響。此部分分為兩部分：①針對(duì)大、小鼠Cx43 mRNA序列，構(gòu)建Cx43特異性shRNA真核表達(dá)載體并進(jìn)行體外干擾效率的