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文檔簡介
1、針灸,是中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的重要組成部分,應(yīng)用于臨床實踐已有幾千年的歷史。由于其獨特的治療方法、神奇的治療效果,針灸逐漸得到了世界的認可和接納,尤其是針刺鎮(zhèn)痛效應(yīng)更是被全世界所關(guān)注。但是,穴位、經(jīng)絡(luò)的物質(zhì)基礎(chǔ)是什么?針刺效應(yīng)是如何產(chǎn)生的?經(jīng)穴信號到底是如何傳導(dǎo)的?這些問題至今沒有獲得令人滿意的回答。縫隙連接(gap junction,GJ)是動物細胞間最普遍存在的親水性低電阻通道。由縫隙連接介導(dǎo)的細胞間通訊(gap junctional in
2、tercellular communication,GJIC)是細胞間直接傳遞信號的重要方式之一,在細胞生長發(fā)育、多細胞器官間的協(xié)調(diào)及機體自我穩(wěn)定控制方面有著重要作用??p隙連接蛋白 (connexin,Cx)是構(gòu)成縫隙連接通道的基本結(jié)構(gòu)和功能蛋白。前人的研究結(jié)果表明,針刺能引起與傳統(tǒng)意義的經(jīng)絡(luò)一致的線性現(xiàn)象,同時測得該線上表現(xiàn)為低電阻。那么,針刺,以及由此引起的循經(jīng)感傳現(xiàn)象,針刺鎮(zhèn)痛等針刺效應(yīng)、縫隙連接細胞間通訊之間是否存在內(nèi)在的聯(lián)系?
3、
因此,我們提出了如下假說:具有低電阻特性的皮膚、皮下組織細胞間縫隙連接是經(jīng)穴之間信號傳導(dǎo)的主要通道,由縫隙連接介導(dǎo)的細胞間通訊為經(jīng)穴信號傳遞的主要方式,細胞間液、組織間液為通道緩沖系統(tǒng)。一旦經(jīng)穴接受刺激,縫隙連接和縫隙連接通訊將被激活,在神經(jīng)-體液因素的共同作用下信號將沿著體表低電阻區(qū)域細胞間的縫隙連接直接傳遞,而大腦對經(jīng)穴接受的刺激信號具有整合作用,經(jīng)穴、大腦、效應(yīng)靶器官之間可能產(chǎn)生對話。基于以上假說,我們設(shè)計了如下研
4、究方案:(1)首先著重研究了皮膚中主要的縫隙連接蛋白Cx43在大鼠穴位、經(jīng)脈上的表達及針刺對該表達的影響(第一部分),探討了穴位、經(jīng)脈與縫隙連接通訊聯(lián)系的物質(zhì)基礎(chǔ);(2)確定了穴位、經(jīng)脈存在豐富的縫隙連接蛋白Cx43的表達并存在一定的循經(jīng)特異性后,應(yīng)用RNA干擾技術(shù)沉默大鼠穴位局部縫隙連接蛋白的表達,觀察對針刺效應(yīng)的影響。此部分分為兩部分:①針對大、小鼠Cx43 mRNA序列,構(gòu)建Cx43特異性shRNA真核表達載體并進行體外干擾效率的
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