RNAi穩(wěn)定抑制XIAP和Survivin表達對胰腺癌細胞株Sw1990放療敏感性影響的研究.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文RNAi穩(wěn)定抑制XIAP和Survivin表達對胰腺癌細胞株Sw1990放療敏感性影響的研究姓名：易小平申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)（普通外科學(xué)）指導(dǎo)教師：李宜雄20100501博士學(xué)位論文 中文摘要體，包裝病毒后，感染胰腺癌細胞株S w l 9 9 0 ，檢測對X I A P 和S u r v i v i n的表達抑制效率；篩選穩(wěn)定克隆并擴大培養(yǎng)，檢測穩(wěn)定抑制X I A P 和S u r v i v i n 的效

2、率及X I A P 或S u r v i v i n 穩(wěn)定抑制后對細胞增殖、凋亡及放療敏感性的影響。同時選擇抑制效率最好的穩(wěn)定克隆，應(yīng)用直接細胞懸液接種法建立胰腺癌細胞裸鼠皮下成瘤模型，比較X I A P 或S u r v i v i n 穩(wěn)定抑制后細胞的成瘤能力。③以X I A P ．s h R N A 和S u r v i v i n ．s h R N A 慢病毒同時感染胰腺癌細胞株S w l 9 9 0 ，篩選穩(wěn)定克隆，檢測X I

3、 A P 和S u r v i v i n 同時穩(wěn)定抑制的效率及X I A P 和S u r v i v i n同時穩(wěn)定抑制后對細胞增殖、凋亡及放療敏感性的影響，并與單獨抑制X I A P 和S u r v i v i n 的策略進行對比。結(jié)果①4 種胰腺癌細胞株中均有X I A P 和S u r v i v i n 表達，且表達水平最高的P a n c ．1 放療抵抗性最高，表達居中的S w l 9 9 0 放療中度抵抗，而表達最低的

4、M i a p a c a ．2 對放療最敏感。亞致死劑量X 線可誘導(dǎo)4 種胰腺癌細胞株中X I A P 和S u r v i v i n 表達升高，且能顯著降低致死劑量X 線照射誘導(dǎo)的C a s p a s e ．3 ／7 活性升高和細胞死亡率( P a n c ．1 、S w l 9 9 0 、M i a p a c a - 2 ) 。②我們分別針對X I A P 和S u r v i v i n ，分別成功構(gòu)建3 對s h R N

5、 A 慢病毒載體：L v ．s h R N A ．X I A P ．I ( L V —X 1 ’) 、L v —s h R N A - X I A P 一2 ( L V - X 2 ) 、L v - s h R N A —X I A P 一3 ( L V —x 3 ) 和L v —s h R N A -S u r v i v i n —I ( L V —S1 ) 、L v —s h R N A —S u r v i v i n 一2 (