熊去氧膽酸對(duì)大鼠肝移植急性細(xì)胞性排斥的影響及在成人肝移植術(shù)后早期應(yīng)用的臨床療效.pdf

1、本研究旨在了解熊去氧膽酸(UDCA)對(duì)肝移植術(shù)后早期常見并發(fā)癥的影響和機(jī)制,并分為以下兩個(gè)部分. 一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分 目的：探討UDCA對(duì)大鼠肝移植急性細(xì)胞性排斥(ACR)的影響及可能的機(jī)制 方法：建立可靠的膽汁外引流大鼠肝移植模型并促成術(shù)后ACR.20只移植大鼠隨機(jī)分為UDCA組和安慰劑對(duì)照組.收集術(shù)后1～7天膽汁、第7天血清和肝組織.檢測血清ALT、AST、TB、DB、AKP、GGT水平.根據(jù)Banff標(biāo)準(zhǔn)病理

2、評(píng)估ACR分級(jí).熒光定量PCR檢測肝組織內(nèi)IL(2、4、6、10)、TNF-α和IFN-γmRNA含量.Westernblot檢測組織內(nèi)上述細(xì)胞因子分子含量.液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)檢測膽汁和血清內(nèi)非結(jié)合型和結(jié)合型熊去氧膽酸(UDCA)、鵝去氧膽酸(CDCA)、去氧膽酸(DCA)、膽酸(CA)、石膽酸(LCA)五種膽汁酸。 結(jié)果：1.兩組大鼠膽汁日流量均逐日減少,術(shù)后第4、5天UDCA組流量明顯高于對(duì)照組(P=0

3、.044,0.008),其他時(shí)段兩組流量相似. 2.UDCA組輕度.ACR明顯多于對(duì)照組(P=0.023),小葉間膽管毀損的例數(shù)少于后者(P=0.004). 3.UDCA組第7天血清AST水平明顯低于對(duì)照組(P=0.001),但DB水平高于后者(P=0.039),其他生化指標(biāo)兩組無顯著性差異. 4.第7天采集的肝組織中,UDCA組IL-2 mRNA含量明顯低于對(duì)照組(P=0.038),而IL-4分子水平明顯高于后

4、者(P<0.001).其他細(xì)胞因子兩組間無顯著性差異. 5.兩組各天膽汁TBA濃度均值相似(P>0.05).術(shù)后第2～4天UDCA組膽汁內(nèi)UDCA 濃度明顯高于對(duì)照組(P<0.001,=0.016,<0.001),第2、4、6天膽汁內(nèi)UDCA比例亦顯著高于對(duì)照組(P=0.009,0.001,0.043).第2、4、7天UDCA組膽汁內(nèi)CA比例明顯低于對(duì)照組(P<0.001,=0.005,0.038),兩組各天膽汁內(nèi)CDCA、DC

5、A、LCA比例相似. 6.第7天兩組血清內(nèi)TBA、UDCA、CA、CDCA、DCA、LCA濃度相似.UDCA組血清內(nèi) UDCA 比例明顯高于對(duì)照組(P=0.012),而CA比例低于后者(P=0.009),其他膽汁酸比例兩組相似.UDCA組GUDCA和TUDCA濃度均明顯高于對(duì)照組 (P=0.014,0.004),TDCA比例明顯低于對(duì)照組(P=0.002),非結(jié)合型UDCA比例則顯著高于后者(P<0.001),兩組間GUDCA比

6、例相似. 結(jié)論：UDCA可降低大鼠肝移植ACR嚴(yán)重程度,表現(xiàn)在降低ACR病理分級(jí)和減少小葉間膽管毀損的發(fā)生.抑制肝組織內(nèi)IL-2 mRNA轉(zhuǎn)錄及促進(jìn)IL-4分子合成可能是其作用機(jī)制.UDCA.未能改善術(shù)后第7天ACR導(dǎo)致的膽汁淤積狀況,但在血清和膽汁內(nèi)TBA濃度未明顯升高的情況下,無細(xì)胞毒性親水性膽汁酸比例明顯上升. 二、臨床研究部分 目的：評(píng)估 UDCA 對(duì)成人肝移植后早期移植物功能恢復(fù)及缺血再灌注損傷(IRI

7、)、ACR、藥物性肝損傷等早期常見并發(fā)癥的影響. 方法：2005年5月～2006年6月80例成人肝移植患者隨機(jī)分為UDCA組(42例)和對(duì)照組(38例).分析兩組術(shù)后第1、7、14、21、28天血清生化指標(biāo),及術(shù)后1、3個(gè)月嚴(yán)重IRI致移植物功能異常、ACR、藥物肝毒性、病毒性肝炎、原發(fā)性肝病復(fù)發(fā)、膽管和血管并發(fā)癥、感染、死亡發(fā)生率. 結(jié)果：術(shù)后第7、14、21天UDCA組ALT水平顯著低于對(duì)照組(P=0.002,0.0

8、30,0.049),第7天AST、GGT水平亦顯著低于后者(P=0.012,0.025).UDCA組嚴(yán)重IRI致移植物功能異常病例明顯少于對(duì)照組(P=0.048).兩組術(shù)后1、3個(gè)月ACR發(fā)生率和病理分級(jí)、藥物肝毒性、膽管和血管并發(fā)癥、感染、死亡發(fā)生率相似,無病毒性肝炎或原發(fā)性肝病復(fù)發(fā)病例。 結(jié)論：UDCA可顯著改善肝移植后早期移植物功能.UDCA對(duì)成人肝移植IRI有明顯的治療作用,但對(duì)術(shù)后早期(3個(gè)月)的ACR、藥物肝毒性、膽