維拉帕米和佩爾地平抑制腎小球系膜細胞增殖的實驗研究.pdf

1、腎小球系膜細胞(GMC)是腎小球內(nèi)最活躍的固有細胞，系膜細胞增生是多種原發(fā)性及繼發(fā)性腎小球疾病中最常見的病理變化之一，它在腎小球硬化、纖維化的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。 轉化生長因子β1(TGF-β1)在腎內(nèi)的過分表達可刺激系膜細胞的增生，同時它是腎臟細胞外基質(ECM)合成和纖維化的決定性介質，最后促使發(fā)生腎小球硬化。 體外培養(yǎng)的系膜細胞和剛分離的腎小球均可表達過氧化物酶體增殖體激活受體(PPAR γ)，研究還證實PPA

2、R γ配基可呈劑量依賴性方式抑制系膜細胞增生，即PPAR Y激活可逆轉系膜細胞表型轉化，降低ECM生成。 目的： 本研究擬通過研究不同鈣拮抗劑(CA)在不同濃度下對系膜細胞的TGF-β1和PPAR γ表達的影響，初步探討鈣拮抗劑抑制系膜細胞增殖的機制。 材料與方法： 1、在無菌室中進行大鼠GMC的復蘇，傳代，培養(yǎng)。 2、無菌室內(nèi)取生長良好的第四代GMC，接種于六孔板，加蓋玻片。24小時后GMC長滿

3、玻片，換成無血清培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24小時后分別加入佩爾地平或維拉帕米，各自濃度分別為10<'-4>mmol/L、10<'-5>mmol/L和10<'-6>mmol/L，共12個孔，另外2個對照孔不加藥，繼續(xù)培養(yǎng)24小時。 3、無菌室外依照說明書對玻片進行SABC免疫組化染色。 4、應用計算機圖象分析系統(tǒng)通過顯微鏡檢查TGF-β1和PPARγ的半定量表達。 結果： 1、對于TGF-β1組，維拉帕米和佩爾地平濃

4、度越大，則含量越少；對于PPARγ組，維拉帕米和佩爾地平濃度越大，則含量越多； 2、同一濃度維拉帕米和佩爾地平作用下，實驗組的TGF-β1含量顯著低于對照組(P<0.05)： 3、同一濃度維拉帕米和佩爾地平作用下，實驗組的PPARγ含量顯著高于對照組(P<0.05)： 4、相同濃度下，維拉帕米和佩爾地平之間的TGF-β1和PPARγ含量無明顯差異(P>0.05)； 5、在不同濃度下，維拉帕米和佩爾地平對T

5、GF-β1和PPγ腳在GMC表達的影響呈劑量依賴性趨勢。 結論： 1、維拉帕米和佩爾地平對大鼠GMC的TGFβ1表達有抑制作用，而對PPARγ有促進作用，提示其對GMC的增殖有抑制作用。(P<0.05) 2、維拉帕米和佩爾地平對大鼠GMC的TGF-β1和PPARγ表達的影響無明顯差異，提示二者對GMC增殖有相似的的抑制作用。(P>0.05) 3、維拉帕米和佩爾地平對大鼠GMC的TGF-β1和PeARγ表達