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文檔簡介
1、目的:通過體外觀察甲基潑尼松龍對人腎小球系膜細胞細胞增殖的抑制作用,及對某些周期蛋白和CDK激酶等蛋白表達的影響,探討其對人腎小球系膜細胞細胞增殖的抑制作用及其機制。
方法:(1)利用四甲基偶氮唑鹽法(MTT法)檢測不同濃度(1mg/L、10mg/L、100mg/L)的甲基潑尼松龍?zhí)幚砗蟮娜讼的ぜ毎脑鲋城闆r。(2)用流式細胞儀檢測不同濃度的甲基潑尼松龍(1mg/L、10mg/L、100mg/L)分別作用后的人系膜細胞中C
2、yclinE、CyclinDI、P27Kipl、CDK2、CDK4表達的改變。(3)利用Westernblot法檢測不同濃度的甲基潑尼松龍(1mg/L、10mg/L、100mg/L)分別作用后的人系膜細胞中CyclinE、CyclinD1、P27Kipl表達的變化。
結果:(1)與對照組相比,甲基潑尼松龍作用于人系膜細胞24小時后,濃度為1mg/L、10mg/L、100mg/L的甲基潑尼松龍能抑制系膜細胞的增殖,且隨著甲基
3、潑尼松龍濃度的增大,抑制作用更顯著,呈一定的劑量效應關系。(2)流式細胞儀檢測后,與對照組相比,甲基潑尼松龍作用過的人系膜細胞CyclinE、CyclinD1,CDK2、CDK4表達顯著下降(p<0.05),P27Kipl的表達顯著上升(p<0.05),且隨著濃度梯度的增高,下降或升高趨勢越明顯(p<0.05)。(3)Westernblot法檢測后,與對照組相比,甲基潑尼松龍作用過的人系膜細胞中CyclinE、CyclinDI表達顯著下
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