廣西圓斑蝰蛇蛇毒NGF對(duì)Aβ-,25-35-誘導(dǎo)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及機(jī)制的初探.pdf

1、目的：通過(guò)從廣西圓斑蝰蛇蛇毒中分離純化的NGF對(duì)可溶性Aβ25-35誘導(dǎo)的AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其初步作用機(jī)制的研究，探討蛇毒NGF在治療阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病方而的應(yīng)用前景。
　　 方法：小鼠進(jìn)行側(cè)腦室埋管后隨機(jī)分為假手術(shù)組，AD模型組，陽(yáng)性藥對(duì)照組(吡拉西坦注射液，0.02mg·μ l-1)，NGF1組(0.2μ g·μl-1)，NGF2組(0.28μ g·μ l-1)，NGF3組(0.4μ g·μ l-1)

2、，NGF4組(0.56μ g·μ l-1)，NGF5組(0.8μ g·μ l-1)。并設(shè)立正常對(duì)照組(各組均n=10)。采用Morris水迷宮及跳臺(tái)行為實(shí)驗(yàn)，考察廣西圓斑蝰蛇蛇毒NGF對(duì)Aβ25-35所致癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力的作用。通過(guò)HE染色及尼氏染色法觀察小鼠腦組織病理學(xué)改變，采用比色法檢測(cè)小鼠腦組織膽堿能系統(tǒng)(AchE,Ach,ChAT)的變化與腦組織抗氧化指標(biāo)(SOD,MDA,GSH,T-AOC)的變化，初步探討廣西圓斑蝰蛇蛇

3、毒NGF對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)的AD模型小鼠的治療作用機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)選用吡拉西坦作為陽(yáng)性藥物。
　　 結(jié)果：1 NGF對(duì)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響：在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中，隨著水迷宮訓(xùn)練天數(shù)的增加，各組小鼠(除NGF最高劑量組外)尋找水下平臺(tái)潛伏期基本上逐漸縮短。在第7天的測(cè)試中，與空白對(duì)照組比較，假手術(shù)組小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)及目標(biāo)象限活動(dòng)時(shí)間無(wú)明顯差別，而AD模型組小鼠明顯減少，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P＜0.05)。與AD組小鼠比較，

4、NGF1，2組小鼠兩項(xiàng)指標(biāo)有所變化，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，NGF3，4組小鼠變化均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.05)。跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)中，與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠第6d跳下平臺(tái)的潛伏期明顯縮短(P＜0.01)，3 min內(nèi)跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)明顯增多(P＜0.01)；而假手術(shù)組小鼠無(wú)明顯變化。與AD模型組小鼠相比，NGF1，2，3，4組小鼠兩項(xiàng)指標(biāo)變化均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.05)。2 NGF對(duì)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力改善作

5、用機(jī)制：HE及Nissl染色檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組相比，模型組小鼠腦組織海馬神經(jīng)細(xì)胞線變得不清晰，細(xì)胞排列稀疏，正常細(xì)胞數(shù)目減少，假手術(shù)組無(wú)明顯變化。NGF各劑量組中，NGF4組與模型組相比，海馬神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目變多，排列較整齊，細(xì)胞線比較清晰，NGF1，2，3組均無(wú)明顯變化。與正常對(duì)照組比較，假手術(shù)組小鼠腦組織AchE，Ach，ChAT，SOD，MDA，GSH，T-AOC活性無(wú)明顯區(qū)別，而模型組小鼠均有顯著變化(P＜0.01)。與模型組相

6、比，各劑量組NGF小鼠腦組織各指標(biāo)活性變化均與劑量變化呈正相關(guān)，其中NGF2組Ach，SOD，GSH活性變化具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，NGF3，4組各指標(biāo)變化均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，NGF5組Ach，SOD活性也有較顯著變化(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 結(jié)論：濃度為0.4μ g·μ l-1及0.56μg·μ l-1的廣西圓斑蝰蛇蛇毒NGF對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力有一定程