血液系統(tǒng)惡性疾病小鼠模型的構(gòu)建及應(yīng)用.pdf

1、目的：
　　在傳統(tǒng)的化療及骨髓造血干細(xì)胞移植的基礎(chǔ)上，靶向藥物的應(yīng)用使血液系統(tǒng)惡性疾病的預(yù)后較前有一定的改善。然而，耐藥、復(fù)發(fā)仍是此類疾病治療失敗的主要原因。因此，建立能夠模擬病人疾病表現(xiàn)及疾病表型的動(dòng)物模型將為疾病機(jī)制的研究及靶向藥物的研發(fā)提供一個(gè)良好的平臺(tái)。本實(shí)驗(yàn)主要闡述如何使用血液系統(tǒng)惡性疾病細(xì)胞系及原代標(biāo)本構(gòu)建小鼠模型及模型的應(yīng)用。
　　方法：
　　第一部分：使用11種常見的血液系統(tǒng)惡性疾病細(xì)胞系（包括急性髓系

2、白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性雙表型白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、淋巴瘤）通過尾靜脈注射的方式接種至小鼠體內(nèi)構(gòu)建11種細(xì)胞系動(dòng)物模型，采用流式細(xì)胞術(shù)動(dòng)態(tài)檢測(cè)外周血中腫瘤細(xì)胞的比例，當(dāng)小鼠出現(xiàn)體重下降大于20％、嚴(yán)重嗜睡、毛發(fā)豎立等體征時(shí)處以安樂死，詳細(xì)了解各組織臟器腫瘤的浸潤情況。通過構(gòu)建的模型了解Raptor基因在MLL白血病中的作用。
　　第二部分：收集血液系統(tǒng)惡性疾病患者治療前的骨髓標(biāo)本，我們不僅通過傳統(tǒng)尾靜脈接種的方式成功將

3、原代標(biāo)本植入到NOD/SCID小鼠體內(nèi)構(gòu)建模型，更首創(chuàng)使用脾臟接種的方式構(gòu)建模型，并使用此類模型進(jìn)行體內(nèi)藥物實(shí)驗(yàn)和急性淋巴細(xì)胞白血病起始細(xì)胞的表型預(yù)測(cè)。
　　結(jié)果：
　　使用細(xì)胞系成功構(gòu)建了急性髓系白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性雙表型白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、淋巴瘤等11種動(dòng)物模型，并詳細(xì)了解各模型的發(fā)病特點(diǎn)。Raptor基因敲除后可延緩RS4;11（MLL-AF4）小鼠模型的生存期，而不能延緩K562小鼠模型的生存期。<

4、br>　　使用尾靜脈注射(5/9)和脾臟注射(10/21)的方式成功構(gòu)建了ALL人源化NOD/SCID小鼠模型；ALL標(biāo)本植入組中CD150表達(dá)明顯比未植入組低(P<0.01)。成功構(gòu)建了3例含有FLT3-ITD的AML人源化NOD/SCID小鼠模型；1例ANKL模型正在構(gòu)建中。
　　結(jié)論：
　　脾臟注射可成功構(gòu)建血液系統(tǒng)惡性疾病小鼠模型，細(xì)胞系比原代標(biāo)本容易構(gòu)建模型，ALL原代標(biāo)本比AML原代標(biāo)本容易構(gòu)建模型。CD150可