蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)研究.pdf

1、氨基甲酸酯類農(nóng)藥因其品種多、藥效好、對人畜低毒、高效、選擇性強等特點而被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。隨之帶來的農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量超標(biāo)問題也日益突出，直接影響著消費者的身體健康和對外經(jīng)貿(mào)的發(fā)展。所以建立快速、高效、經(jīng)濟的檢測方法成為亟待解決的問題。本文研究了目前最常用的兩種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測方法-酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA法）和酶抑制電化學(xué)法。首先以克百威的堿解產(chǎn)物呋喃酚為原料，采用一種新的半抗原合成途徑合成了克百威半抗原：2，3

2、-二氫-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基對硝基苯氯甲酸酯（BFNH）。將半抗原與牛血清蛋白（BSA）偶聯(lián)制備了人工抗原BFNH-BSA，用所制備的人工抗原免疫動物，從血清中分離純化獲得了高效價、高特異性的克百威多克隆抗體。純化后的抗體效價達到1.024×107，與5種結(jié)構(gòu)相似的氨基甲酸酯類農(nóng)藥和3種有機磷農(nóng)藥的交叉反應(yīng)率均低于9％。利用這種多克隆抗體建立了克百威ELISA檢測技術(shù)并對實驗條件進行了優(yōu)化選擇。最低檢測限達10-7mg·mL-

3、1，優(yōu)化條件為：碳酸鹽緩沖液為較優(yōu)的包被介質(zhì)；20min為最佳反應(yīng)時間：甲醇含量10％以下，對免疫反應(yīng)的影響較小。兩種快速檢測方法對同一批出口蔬菜樣品的檢測結(jié)果對比分析顯示兩種方法檢測結(jié)果基本吻合：ELISA法檢出克百威殘留量超過0.5mg·kg-1的樣品有10例，檢出率5％；酶抑制電化學(xué)法檢測結(jié)果中對乙酰膽堿酯酶抑制率超過60％的樣品有7例，檢出率3.5％。HPLC法驗證結(jié)果與兩種快速檢測方法的檢測結(jié)果也基本符合，表明兩種快速檢測方法

4、的檢測結(jié)果較為準(zhǔn)確。ELISA法和酶抑制電化學(xué)法均適合對大量農(nóng)產(chǎn)品中有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留超標(biāo)與否進行快速篩查，但在實際應(yīng)用中又各有其優(yōu)缺點，若兩種方法聯(lián)合應(yīng)用則可形成優(yōu)勢互補，極大地擴大農(nóng)藥殘留的檢測范圍。ELISA法非常適合大批量樣品的篩選，而且靈敏度、回收率都能滿足檢測要求，對于較易制得抗體的農(nóng)藥殘留檢測非常適用；對于較難得到抗體的農(nóng)藥殘留檢測，可用酶抑制電化學(xué)法替代，由本研究結(jié)果可知，酶抑制電化學(xué)法檢測的靈敏度和準(zhǔn)確度與E