甲基蓮心堿增強伊馬替尼對CML原代細胞的抑制作用及機制.pdf

1、目的:研究甲基蓮心堿(Nef)增強伊馬替尼(ST1571)對CML原代細胞的細胞毒作用并探討Nef化療增敏的機制
　　 方法:采用改良四唑鹽法(MTT)篩選甲基蓮心堿的無毒濃度；高逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法,蛋白質(zhì)免疫印跡(Wlestern-Blotting)法檢測Nef對CML原代細p210Bcr-abl融合基因和融合蛋白表達的影響。
　　 結(jié)果:(1)Nef16、32、64μmol·L-1均對CML原代細胞

2、有抑制細胞增殖的作用,隨著濃度的增加,作用也增強(P<0.05)。Nef8μmol·L-1,4μmol·L-1；As2O32μmol·L-1,1μmol·L-1為對CML原代細胞均無明顯毒性作用的濃度。Nef4μmol·L-1、Nef8μmol·L-1各組藥物聯(lián)用STI571后均不同程度的降低CML原代細胞對STI571的IC50值,由原來的0.70±0.10μmol·L-1分別降至0.32±0.06和0.16±0.02,增敏倍數(shù)分別為

3、原來的2.19和4.38倍。(2)經(jīng)伊馬替尼和Nef聯(lián)合處理的CML原代細胞(0.5700±0.1383)較單獨使用伊馬替尼處理的CML原代細胞p210Bcr-alb融合基因表達(0.7111±0.1152)降低(P<0.05)；分別經(jīng)Nef(8μmol·L-1)、Nef(4μmol·L-1),As2O3(2μmol·L-1)處理48h后,CML原代細胞p210Bcr-abl融合基因表達均較未經(jīng)藥物處理組CML原代細胞p210Bcr-a

4、bl融合基因表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；單獨使用伊馬替尼(1μmol·L-1)處理的CML原代細胞(0.7111±0.1152)較未經(jīng)藥物處理組CML原代細胞p210Bcr-abl融合基因表達(0.9305±0.0241)降低(P<0.05)；(3)經(jīng)伊馬替尼和Nef聯(lián)合處理的CML原代細胞(0.6319±0.0572)較單獨使用伊馬替尼處理的CML原代細胞p210Bcr-abl融合蛋白表達(0.7824±0.0105)降低(

5、P<0.05)；分別經(jīng)Nef(μmol·L-1)、Nef(8μmol·L-1)處理48h后,CML原代細胞p210Bcr-abl融合蛋白表達均較未經(jīng)藥物處理組CML原代細胞p210Bcr-abl融合蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；經(jīng)As203(2μmol·L-1),STI571(1μmol·L-1)處理48h后,CML原代細胞Bcr-abl融合蛋白表達均較未經(jīng)藥物處理組CML原代細胞p210Bcr-abl融合蛋白表達降低(P<

6、0.05),且經(jīng)As2O3(2μmol·L-1)處理的CML原代細胞p210Bcr-abl融合蛋白表達與經(jīng)STI571(1μmol·L-1)處理的CML原代細胞p210Bcr-abl融合蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論:(1)甲基蓮心堿對CML原代細胞有抑制增殖的作用,且與劑量有關(guān)。
　　 (2)甲基蓮心堿在無毒劑量下可以增強STI571對CML原代細胞的細胞毒作用。
　　 (3)甲基蓮心堿