Toll樣受體3介導(dǎo)呼吸道合胞病毒感染的炎癥反應(yīng).pdf

1、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)為副粘病毒科肺炎病毒屬，是有包膜非節(jié)段性的單負(fù)鏈 RNA 病毒，是世界范圍內(nèi)嬰幼兒病毒性下呼吸道感染最重要的病毒病原，人們也越來(lái)越認(rèn)識(shí)到呼吸道合胞病毒是中老年和免疫缺陷成年人呼吸道感染的重要病毒性病原。病毒通過(guò)細(xì)胞融合侵入呼吸道上皮，能誘導(dǎo)宿主表達(dá)和分泌大量的促炎性因子和免疫調(diào)節(jié)分子。嚴(yán)重的RSV感染包括炎癥介質(zhì)的釋放、上皮細(xì)胞壞死、炎癥的發(fā)生、大量粘液的產(chǎn)

2、生等，新近發(fā)現(xiàn)的 Toll樣受體，為研究RSV感染的炎癥反應(yīng)機(jī)理提供了新的思路。Toll樣受體(Toll-likereceptors，TLRs)為Ⅰ型跨膜蛋白，是識(shí)別病原體的重要受體，它們識(shí)別細(xì)菌、病毒或環(huán)境中的配體，啟動(dòng)天然免疫反應(yīng)和調(diào)節(jié)獲得性免疫反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn) TLR3(Toll-like receptor 3)能特異性地識(shí)別雙鏈RNA(大多數(shù)病毒在復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程中均可合成)，TLR3介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與激活呼吸道上皮細(xì)胞，分泌大

3、量炎癥免疫相關(guān)細(xì)胞因子，在呼吸道合胞病毒感染引起肺炎的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。呼吸道合胞病毒感染的機(jī)制十分復(fù)雜，目前尚不清楚，也無(wú)理想的治療藥物和疫苗。因此，深入研究RSV感染的分子機(jī)制具有重要醫(yī)學(xué)意義。 目的：研究呼吸道合胞病毒感染后TLR3的表達(dá)變化；探討TLR3介導(dǎo)RSV感染的炎性反應(yīng)及其部分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。 方法：用RSV分別于體外感染A549細(xì)胞和體內(nèi)滴鼻感染昆明小鼠，取不同感染時(shí)間點(diǎn)的A549細(xì)胞和小鼠肺，

4、用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)TLR3和TNF-αmRNA的表達(dá)變化，用免疫印跡法檢測(cè)TLR3蛋白和核內(nèi)活性NF-κBp65蛋白的表達(dá)變化，用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清和小鼠血清中的 TNF-α表達(dá)變化。 結(jié)果：RSV 感染上調(diào)TLR3 mRNA和TNF-α mRNA的轉(zhuǎn)錄水平；誘導(dǎo)活化核內(nèi)NF-κBp65蛋白的表達(dá)；升高細(xì)胞培養(yǎng)上清和小鼠血清中TNF-α的分泌量。各指標(biāo)的變化較對(duì)照組均有顯著性差異。 結(jié)論：呼吸道合胞病