tet蛋白非酶催化的新功能:負性調控神經元早期分化的研究_第1頁
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1、申請上海交通大學碩士學位論文TET蛋白非酶催化的新功能蛋白非酶催化的新功能:負性調控神經元早期分化的研究負性調控神經元早期分化的研究專業(yè):專業(yè):生物學碩士生:碩士生:高潔導師:導師:金衛(wèi)林副研究員資助基金項目國家自然科學基金(No.31171033和No.81272801)上海交通大學生命科學技術學院上海交通大學生命科學技術學院2016年6月萬方數(shù)據(jù)上海交通大學碩士畢業(yè)論文iTET蛋白非酶催化的新功能:負性調控神經元早期分化的研究摘要T

2、ET蛋白非酶催化的新功能:負性調控神經元早期分化的研究摘要DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學修飾,在調節(jié)細胞增殖、分化、個體發(fā)育等方面起重要作用。在細胞內DNA存在著甲基化和去甲基化的動態(tài)過程,這一過程影響著大腦的功能,而異常的甲基化水平則會引起許多神經系統(tǒng)疾病。TET(Teneleventranslocation)蛋白家族是DNA主動去甲基化過程中的關鍵蛋白。其包括TET1、TET2和TET3三個成員,是一類依賴于Fe(II)和α酮戊

3、二酸(αketoglutarateαKG)的雙加氧酶,能夠催化DNA上的5mC氧化成為5hmC,并進一步的氧化成為5fC和5caC。而5hmC也是一個重要的表觀遺傳學標記物,能夠調控在神經發(fā)育和神經系統(tǒng)疾病的形成。TET蛋白在胚胎發(fā)育,免疫調節(jié)以及癌癥發(fā)生等方面均具有重要作用,同時也能夠調控早期神經元分化,神經再生和記憶形成,然而其在神經分化中的作用并不十分清楚。本研究以Neuro2a細胞作為研究模型,一方面探索了TET蛋白在神經分化過

4、程中所發(fā)揮的作用,另一方面也為成神經母細胞瘤的分化治療尋找可能的方案。首先,利用免疫熒光染色,qRTPCR,Dotblot等方法檢測到,在Neuro2a細胞中,有較高的TET蛋白存在,但是TET蛋白的催化產物5hmC水平卻維持在了一個相對較低的水平。TET蛋白和5hmC含量的不匹配提示,在Neuro2a細胞中TET蛋白催化活性可能受到了抑制。其次,利用RNA干擾,瞬時轉染等方法,敲減了細胞中TET蛋白的表達,發(fā)現(xiàn)Neuro2a的細胞分化

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