麝香百合葉片再生和SOD基因遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立.pdf

1、　　百合花姿雅致，青翠娟秀，花莖挺拔，是點(diǎn)綴庭園、盆栽與切花的名貴花卉。百合鱗莖具有豐富營養(yǎng)成分，是重要的食品和藥用植物?！　≈参锟偸翘幱诃h(huán)境脅迫之中，它們嚴(yán)重影響著觀賞植物的生長發(fā)育。研究表明，提高植物體內(nèi)Mn-SOD活性是增強(qiáng)植物抗逆性的有效途徑之一。本試驗(yàn)通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)將Mn-SOD基因?qū)膑晗惆俸系摹畐hiteelegance’品種中，獲得轉(zhuǎn)化完整植株，選育具有高抗逆性的百合新品種。　　以麝香百合優(yōu)良品種‘whiteel

2、egance’組培苗為試材，以MS為基本培養(yǎng)基、6-BA和NAA為試驗(yàn)因子，篩選出麝香百合‘whiteelegance’離體葉片再生的理想培養(yǎng)基，即MS+6-BA1.0－2.0mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L。同時(shí)，研究了葉片的不同部位、葉片切斷大小因素等對(duì)葉片再生的影響，進(jìn)一步優(yōu)化了百合葉片再生體系，從而建立了穩(wěn)定高效的百合葉片再生體系。另外，以葉片再生不定芽為試材，進(jìn)行了不同激素組合對(duì)百合增殖和生根的研究。　　在建立

3、麝香百合葉片再生體系的基礎(chǔ)上，研究了Mn-SOD基因轉(zhuǎn)化中影響葉片轉(zhuǎn)化效率的多種因素，包括Kan濃度、抑菌素濃度、浸染菌液等，從而確立了麝香百合‘whiteelegance’的遺傳轉(zhuǎn)化體系。選取生長健壯5～8mm長的百合葉片基部用于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化，用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌EHA105浸染10min，置于分化培養(yǎng)基上黑暗條件下共培養(yǎng)3d,沖洗干凈后，轉(zhuǎn)接到選擇分化培養(yǎng)基中。培養(yǎng)6～7周后，分化出抗性不定芽，繼而伸長并在基部形成小鱗莖(小子球)