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文檔簡介
1、 楊樹(PopulusL)是世界上重要的栽培樹種,因其基因組較小,易于無性繁殖,現(xiàn)已成為林木基因工程育種的模式植物。楊樹遺傳轉(zhuǎn)化研究已經(jīng)取得了重大進(jìn)展,已獲得了抗除草劑、抗蟲、抗病以及抗干旱的轉(zhuǎn)基因楊樹,但其中大部分為單基因轉(zhuǎn)化植株,抗性比較單一。本研究以京2楊(Populus×euramericanacl‘J2’)和銀腺雜種楊(P.alba×P.glandulosa)為研究對象,利用基因槍法對其進(jìn)行vgb基因、BtCry3A+OC-
2、I基因、API+BtCry1Ac基因、JEF33#基因和NHX基因的共轉(zhuǎn)化,以期獲得具有多抗性的楊樹基因工程新品種。主要研究內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下: 1.確定了京2楊優(yōu)化組培條件。其最適基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.08mg/L+IBA0.08mg/L;生根培養(yǎng)基中加入活性碳不利于其生長;光周期對其生長沒有顯著影響,但光照強(qiáng)度和生根培養(yǎng)基pH值對其生長影響顯著,最適光照強(qiáng)度為25001ux,最適生根培養(yǎng)基
3、pH值為6.5?! ?.建立了京2楊葉片和葉柄的再生體系,并確定了卡那霉素選擇壓。最佳不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:葉片為MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,葉柄為MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L;葉片和葉柄不定芽分化的卡那霉素選擇壓分別為40mg/L和50mg/L,不定根誘導(dǎo)的卡那霉素選擇壓為30mg/L。 3.進(jìn)行了京2楊和銀腺雜種楊的多基因共轉(zhuǎn)化,獲得京2楊抗性植株39個(gè),銀腺雜種楊抗性植株56個(gè)。對銀腺雜種楊
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