14990.125icry1ab的組織分布及代謝動力學(xué)研究

1、碩士學(xué)位論文論文題目125ICry1Ab的組織分布及代謝動力學(xué)研究Tissuedistributionkiicsof125ICry1Ab研究生姓名李海龍指導(dǎo)教師姓名許玉杰專業(yè)名稱放射醫(yī)學(xué)研究方向轉(zhuǎn)基因食品安全研究論文提交日期2013年4月125ICry1Ab的組織分布及代謝動力學(xué)研究中文摘要I中文摘要研究背景：轉(zhuǎn)基因食品（GeicallyModifiedFoods，GMF）是利用現(xiàn)代分子生物技術(shù)將某些生物的基因轉(zhuǎn)移到其他物種中去，改造生

2、物的遺傳物質(zhì)，使其在外觀形態(tài)、營養(yǎng)價值、消費品質(zhì)等方面向人們所需要的目標(biāo)轉(zhuǎn)變，以轉(zhuǎn)基因生物為直接食品或為原料加工生產(chǎn)的食品就是―轉(zhuǎn)基因食品‖。傳統(tǒng)觀點認為轉(zhuǎn)基因食品不會比普通食品給人類健康帶來更多的威脅。然而，近年來越來越多的負面現(xiàn)象發(fā)生在食用轉(zhuǎn)基因食品的人和動物身上，比如轉(zhuǎn)基因食品很可能引起易感人群的過敏現(xiàn)象；又如與使用非轉(zhuǎn)基因土豆飼養(yǎng)的小鼠小腸相比，使用轉(zhuǎn)基因土豆飼養(yǎng)的小鼠小腸上皮發(fā)生了明顯的改變；再如使用轉(zhuǎn)基因大豆飼養(yǎng)的倉鼠生殖能

3、力的下降等等，所有這些現(xiàn)象都促使我們不得不仔細考慮和重新評估轉(zhuǎn)基因食品的安全性問題。在所有轉(zhuǎn)基因作物中，轉(zhuǎn)Bt基因作物占了絕大部分，其表達產(chǎn)物之一轉(zhuǎn)基因蛋白Cry1Ab是使用最多分布最廣的轉(zhuǎn)基因蛋白之一，并且相對穩(wěn)定，本實驗中選擇它作為轉(zhuǎn)基因蛋白的代表，觀察和研究其在實驗中的作用。目的：探明Cry1Ab的生物組織分布情況并計算出其在血漿中的相關(guān)代謝動力學(xué)參數(shù)，明確其是否可以通過胃腸道吸收，是否有特異性的器官分布，并初步探查其相應(yīng)機理，為

4、轉(zhuǎn)基因食品的安全性評估提供實驗依據(jù)。方法：（1）采用同位素125I標(biāo)記Cry1Ab并對標(biāo)記結(jié)果進行質(zhì)量控制，標(biāo)記方法采用Iodogen法。（2）通過灌胃和尾靜脈注射兩種方式給予正常BALBc小鼠125ICry1Ab，并于隨后既定的時間點進行采血、采集圖像和各器官組織中125ICry1Ab的測量。（3）進行Cry1Ab與生物組織芯片和IEC6細胞的結(jié)合實驗，并用Westernblot技術(shù)對組織或器官裂解液中的Cry1Ab進行鑒定，最后用L

5、igBlot方法尋找小鼠組織或器官裂解液中可能存在的Cry1Ab受體。結(jié)果：（1）標(biāo)記產(chǎn)物125ICry1Ab即刻放射性化學(xué)純度達95.7%。在體外及模擬體內(nèi)環(huán)境條件下均具有較好的穩(wěn)定性，可以滿足下一步示蹤實驗的要求。（2）無論灌胃還是尾靜脈注射給藥，125ICry1Ab在肝、肺、脾、胃、腸道、性腺和腎臟都有較高的分布。但在大腦中分布極低。灌胃給藥時，125ICry1Ab在血漿中約5h達到峰濃度，隨后開始下降，至27h時基本清除。尾靜脈