結(jié)合態(tài)微囊藻毒素的毒理學(xué)研究.pdf

1、微囊藻毒素(Microcystins，MC)是一類主要由Microcystins aeruginosa產(chǎn)生的單環(huán)七肽毒素。近年來，水體富營養(yǎng)化日趨嚴(yán)重，有毒藍(lán)藻水華大量發(fā)生(如滇池、太湖、巢湖等)，水產(chǎn)品(魚、蝦、蟹、螺、蚌)中頻繁地檢測出較高濃度的MC，而淡水水產(chǎn)品又是我國國民動物蛋白的重要來源，因此，水產(chǎn)品的MC污染對人類健康的潛在影響不容忽視。本文通過腹腔注射和灌胃染毒小鼠的方法，對谷胱甘肽結(jié)合態(tài)MCLR和魚肉結(jié)合態(tài)MCLR進(jìn)行了

2、毒理學(xué)研究，以便揭示受MC污染水產(chǎn)品的食用安全性。主要內(nèi)容如下： 1．魚肉樣品預(yù)處理方法的優(yōu)化含有MCLR的魚肉提取液，通過固相萃取柱富集、雜質(zhì)淋洗、洗脫后，采用HPLC法檢測魚肉中MCLR的含量。本研究通過調(diào)節(jié)雜質(zhì)淋洗液中甲醇濃度，考察了淋洗液中甲醇的濃度對魚肉提取液中雜質(zhì)的去除效果以及對MCLR回收率的影響。結(jié)果表明，濃度低于10％的甲醇溶液雜質(zhì)去除效果并不理想，濃度高于20％的甲醇溶液則有可能會導(dǎo)致MCLR的流失，而濃度為

3、10％的甲醇水溶液雜質(zhì)淋洗效果較好。 2．谷胱甘肽結(jié)合態(tài)MCLR(GSH-LR)的急性毒性研究通過腹腔注射染毒，研究了不同劑量的GSH-LR(4μg/kg BW、22μg/kgBW)和MCLR(45μg/kg BW)對小鼠的毒性，并考察了GSH(4mg/kg BW)預(yù)保護(hù)對MCLR(45μg/kg BW)毒性的影響。結(jié)果表明：高劑量的GSH-LR(22μg/kg BW)、MCLR(45μg/kg BW)，以及GSH(4mg/kg

4、 BW)預(yù)保護(hù)后再給予MCLR(45μg/kg BW)均可不同程度的引起小鼠肝臟腫大(p<0.01)，肝臟組織病理發(fā)生改變，ALT、AST、ALP活性顯著增強(qiáng)(p<0.01)。其中以MCLR(45μg/kg BW)對小鼠的影響最為顯著。而低劑量的GSH-LR(45μg/kg BW)對小鼠各項指標(biāo)影響并不明顯，僅在染毒后第2h和4h小鼠肝臟系數(shù)、ALT和AST有顯著增加(p<0.05)。這說明，GSH-LR的毒性要低于MCLR，然而高劑量

5、的GSH-LR(225μg/kg BW)對小鼠仍會產(chǎn)生不利影響，但是這種影響仍小于純MCLR(45μg/kg BW)。 3．魚肉結(jié)合態(tài)MCLR的亞慢性毒性研究以雄性Balb/C小鼠為模式生物，通過為期13周的灌胃染毒實驗，研究了魚肉結(jié)合態(tài)MCLR對小鼠的亞慢性毒性作用，并與水溶態(tài)MCLR的毒性進(jìn)行對比。結(jié)果表明，68.75μg/kg BW劑量魚肉結(jié)合態(tài)MCLR對小鼠各項指標(biāo)的影響并不明顯，實驗第1周小鼠肝臟系數(shù)(p<0.05)、

6、ALT(p<0.01)有顯著增加，到實驗結(jié)束，小鼠肝臟器系數(shù)及其血清酶學(xué)指標(biāo)均處于正常水平，肝臟器組織病理改變僅觀察到肝竇內(nèi)皮細(xì)胞輕微腫脹，中央靜脈略有充血。在整個實驗過程中，該組小鼠腎臟酶學(xué)指標(biāo)及腎臟組織病理學(xué)觀察也均未發(fā)現(xiàn)有明顯異常；與之相比，同劑量水溶態(tài)MCLR可引起小鼠肝臟系數(shù)顯著增加(p<0.05)，ALT、AST活性顯著增強(qiáng)(p<0.01)，肝細(xì)胞出現(xiàn)有空泡狀病變；到實驗結(jié)束，小鼠肝臟系數(shù)與對照組仍有明顯差異(p<0.05)