ubi-1啟動子驅(qū)動的花生芪合酶基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建及玉米遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文ubi-1啟動子驅(qū)動的花生芪合酶基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建及玉米遺傳轉(zhuǎn)化研究姓名：郭志鴻申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：王漢寧20040601載體p B I U A 。采用基因槍法分別對玉米優(yōu)良自交系綜3 1 和鄭2 2 的I I 型胚性愈傷組織進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化研究，初步得出基因槍法轉(zhuǎn)化玉米I I 型愈傷組織的優(yōu)化參數(shù)為：金粉用量為6 0 ug ／B ，轟擊次數(shù)為兩次，發(fā)射點(diǎn)與靶細(xì)胞的距離為9 c m 時

2、，轉(zhuǎn)化效率高而且經(jīng)濟(jì)。對玉米再生體系的研究得出：胚齡對胚性愈傷組織的誘導(dǎo)率影響較大，授粉后1 0 天左右的幼胚形成愈傷組織的能力最強(qiáng)，過大或過小都不利于胚性愈傷組織的誘導(dǎo)；培養(yǎng)基中2 , 4 ．D 的濃度對胚性愈傷組織的誘導(dǎo)影響極大，且不同的基因型，其最大胚性愈傷組織誘導(dǎo)率所需2 , 4 ．D 濃度也不一樣，其中有利于“綜3 1 ”形成愈傷的2 , 4 一D 最適使用濃度為1 ．5 m g ／L ，“鄭2 2 ”為2 ．0 m g ／L

3、 。此外，玉米I I 型胚性愈傷組織分化成苗時不同基因型所需的最適6 一B A 濃度也不同，“綜3 1 ”和“鄭2 2 ”愈傷組織分化成苗的最適6 一B A 濃度分別為1 ．0 m g ／L 和O ．5 m g ／L 。以優(yōu)化的基因槍轉(zhuǎn)化再生體系對這兩個自交系幼胚進(jìn)行了大批量轉(zhuǎn)化，最終獲得了6 株再生植株。資料檢索結(jié)果表明，到目前為止尚未有將芪合酶基因?qū)胗衩椎膱蟮?。關(guān)鍵詞： 花生芪合酶玉米泛素蛋白啟動子及5 ’U T R 基因槍轉(zhuǎn)化法