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1、寧夏大學(xué)碩士學(xué)位論文梭梭HaCMO和HaBADH基因的克隆及植物表達(dá)載體構(gòu)建姓名：石磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：宋玉霞20100301AbstractSoilsalinizafionaffectplantgrowthanddevelopmentseverelyandseriouslyhinderedthedevelopmentoftodaysagriculturalproductionBetaineisone
2、ofthebestosmoticadjustmentsolutethathavebeenfoundSynthesisofbetaineinplantsfromcholineviatwosteps，cholinetobetainealdehydebetainealdehydetobetaineTwostepofreactionsarccatalyzedbycholinemonooxygenaseandbetainealdehydedehy
3、drogenaseInthisslIldMthroughRTPCR(reversetranscriptionpolymerasechainreaction)andRACE(rapidamplificationofeDNAends)，a1503itfragmentcontainingentirebetainealdehydedehydrogenase(BAD／／)codingregionof500aminoacids(神hasbeenob
4、tained(asnamedHaBADH)anda1344bpfragmentcontainingentireCholinemonooxygenase(CMO)codingregionof447aminoacids(齟)hasbeenobtained(asnamedHaCMO)fromextremexerophyteandsalttolerantplantHaloxylonammodendronThededucedaminoacidse
5、quencesofHaBADHcontaintheconserveddecapaptidemELGGKSP)inaldehydedehydrogenase(ALDHs)during257—266andcysteineresidue(C)at294NucleotidesequenceofHaCMOWassimilartothecorrespondingfragmentofCMOeDNAofseveralotherplants，suchas
6、SpinaciaoleraceaAtriplexhortensiaSuaedaliaotungensisSalicorniaeuropaeaBetaru枷mwithasimilarityofmorethan745％EncodedproteinbYHaCMOandCMOproteinfromabovementionedplantsalsosharedmorethan735％identityattheaminoacidlevelTheres
7、ultshowedCMOgenewasconservedinChenopodiaceaeNucleotidesequenceofHaBADHwassimilartothecorrespondingfiagmentof丑4D日cD_NAofseveralotherplants，such鴿Kalidiumfoliatum，Atriplexcentralasiaaca，Atriplextriangularis，Spinaciaoleracea
8、，dtriplexhortensia，BetaⅥ伽，婦，wimasimilarityofmorethan85％EncodedproteinbyHaBADHandBADHproteinfromabovementionedplantsalsosharedmorethan87％identityattheaminoacidlevelTheresultshowedBADHgeneWaSconservedespeciallyinChenopodia
9、ceaeConstructPlantExpressionVectorspCAMBL心300HaCMOandpCAMBIA2300HaBADHwithobtainedfragmentcompleteopenreadingframeofHhCMoandHaBADHTransferthevectorsinticecallusThroughAgrobacteriummediatedmethodsuccessfullyandhaveobtaine
10、dtransgenicplantsThestudyprovidedmaterialforfurtherexploringdroughtresistantandsalttolerantmechanismsofHaloxyionammodendroninmolecularlevelandlayafoundationforfindingandexploitationofresistantgenesfromstresstolerantplant
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