三種RNA病毒雞卵黃抗體的檢測(cè)及制備.pdf_第1頁(yè)
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1、研究RV、HRV及IBDV三種傳染性RNA病毒雞卵黃抗體(IgY)的產(chǎn)生、分離制備及以ELISA為主的定性定量檢測(cè),為IgY替代哺乳動(dòng)物血清IgG作為免疫檢測(cè)診斷試劑奠定基礎(chǔ),同時(shí)IgY還可用于被動(dòng)免疫和疾病的防治.以三種病毒分別免疫120日齡健康母雞,RV及HRV用50μg抗原液/只雞添加等量CFA首免,IBDV疫苗5倍劑量飲水首免,以后每隔10天胸肌注射加強(qiáng)免疫,連續(xù)3次.三種抗原產(chǎn)生了ELISA效價(jià)分別為1:9600,1:3600

2、,1:4800的相應(yīng)IgY抗體.同時(shí)用建立的IBDV的免疫程序免疫1 80日齡雞,仍可產(chǎn)生高效價(jià)卵黃抗體.三種IgY的產(chǎn)生進(jìn)程曲線相似,即在二免后卵黃中IgY效價(jià)開(kāi)始上升,第四次免疫后,效價(jià)達(dá)到最高并維持三個(gè)月.每次加強(qiáng)免疫后第2、3天,由于抗原中和作用IgY效價(jià)持平或略有降低,而后增加.建立和優(yōu)化了IgY的間接ELISA檢測(cè)條件.選用水稀釋-微濾法去脂,優(yōu)化后的條件.應(yīng)用三種RNA病毒免疫健康母雞,建立了相應(yīng)IgY的間接ELISA檢測(cè)

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