29376.高表達pga的枯草芽孢桿菌蛋白質組學研究_第1頁
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文檔簡介

1、浙江理工大學碩士學位論文高表達PGA的枯草芽孢桿菌蛋白質組學研究姓名：張虹申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：趙輔昆20091222浙江理T大學碩七學位論文ProteomicsAnalysisofBS168OverproducingPGAAbstractBacillussubtilis(Bsubtilis)expressionsystemhasobviousadvantagesoverEcoliexpressionsy

2、stemAcomprehensiveunderstandingofproteomicchangesinBsubtilisoverexpressionexogenousproteinandknowledgeofitsmechanismhelpsguidethereconstructofBsubtilisexpressionsystem，servingtheindustrybettenTodate，thestudyofitsmechanis

3、mtosecretorystressismainlystillontheRNAlevelratherthantheproteinpAcc岬UBll0isaEcoliBSubtilisshuttlevectorconstructedbythislabItincludespgafollowingPamyencodingPenicillinGAcylase(PGA)，whichmakingBS168Cansecretorylargequant

4、itiesofPGAinthelogarithmicgrowthphasewiththeinductionofstarchunderthislaboratoryconditions，thequalityofthisrecombinantPGAcanreach16嘰，and10U／mL，increasingbY10foldsthanhuang，and2foldsthanyang，whichprovidingagoodexperimenta

5、lmaterialforthestudyingofsecretorystressresponseInorderteducethelossofintracellularproteins，thispaperusesrelativelysimplesamplepreparationmethod：resuspendingthecollectedbacteriainlysate(whichreferedtoAberdeenandmadesomei

6、mprovement)thenassisted謝t11sonicationBymeasuringthegrowthCUlVesandactivitychiveofcontrol(BS168／pUBl10)andhi曲expressionofPGAbacterial(BS168／pAccpUBll0)，thispaperdecidedprepareingatthetimepointof24也andbyproteinconcentratio

7、ndetermination，thispaperdecided150Din500此lysatetoprepare2DEsampleThe2DEpicturesshowsagoodrepeatabilitybysoftwareanalysisTheresultshowsgreatdifferenceindifferentiallyexpressedproteinswithuseofdifferentstripofpH310NLandpH4

8、7Thereale55upregulateproteinsand12downregulateproteinwiththeformerstrip，while18upregulatproteinsand3downregulatewiththelatterWithMALDI—TOF—TOFmassspectrometryanalysis，weidentify6proteins。Fourofthemalecausedbecauseofgrowt

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