CaMBP-10單克隆抗體的篩選及CaMBP-10在豌豆不同組織中表達(dá)規(guī)律的研究.pdf

1、南開大學(xué)碩士學(xué)位論文CaMBP-10單克隆抗體的篩選及CaMBP-10在豌豆不同組織中表達(dá)規(guī)律的研究姓名：周鐵林申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)及分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：李翠鳳;牛瑞芳2002.5.1! ! ! 竺蘭! ! 苧塞墮墊竺塑墮鯊墨! ! ! 望生! ! 壟塑星至旦絲堡主重壟塑堡塑竺窒A B S T R A C TC a l m o d u l i n ( C a M ) r e g u l a t e sag r e a td

2、e a lo f p h y s i o l o g i c a lf u n c t i o n sb yt h ei n t e r a c t i o nw i t hp l e n t yo fC a M - b i n d i n gp r o t e i n s ( C a M B P s ) ．T h e r e f o r e ，t h es t u d yo fC a M B P s w i l lh e l pt o

3、e x p l a i nh o w C a ”／C a Mm e d i a t es i g n a lt r a n s d u c t i o np a t h w a y i no r g a n i cs y s t e m sS o f a rv e r yL i t t l ei sk n o w n a b o u t t h ei d e n t i f i c a t i o n ，f u n c t i o na

4、 n d e x p r e s s i o no f C a M B P si np l a n t s I t s e r i o u s l yi m p e d e s t ou n d e r s t a n dt h ep r e c i s e r e g u l a t i v em e c h a n i s m m e d i a t e db vC a ”／C a MC a M B P - ·1 0 i

5、s an o v e le n d o g e n o u sC a M ··b i n d i n g p r o t e i nf o u n d i n a n di s o l a t e d f r o mC h i n e s e c a b b a g eb y o u r r e s e a r c h g r o u p ，w h i c h c a n b i n dw i t h C a Mt

6、o i n h i b i t t h ea c t i v a t i o no f P D E - I S u r p r i s i n g l y , t h eb i n d i n gn o to n l yi s C a 2 + 一i n d e p e n d e n tb u ta l s oc a bb ee n h a n c e di nt h ep r e s e n c eo f E G T AA n d i

7、 t ’st h ef i r s tt i m et op r o v et h a tt h e r ei sa l s o C a 2 + - i n d e p e n d e n tb i n d i n gb e t w e e nC a M a n dC a M B P si np l a n t s ．T h e r e f o r e ，i ti su r g e n t t o f i n d o u t w h e

8、 t h e rC a M B P - 1 0 a c t s a s ‘‘C a p a c i t o r ' ’t o r e g u l a t e C a Mo n‘‘c o m p a r t m e n t a l i z a t i o n ' ’a n d “a v a i l a b i l i t y ”．S ow e a r eu r g e d t os e a r c ha b i o l o

9、 g i c a lp r o b ef o rC a M B P - 1 0 w i t hh i g hs p e c i f i c i t y , c o n v e n i e n c ea n d a v a i l a b i l i t y , w h i c hc a n b eu s e dt od e t e c tt h ed i s t r i b u t i o no f C a M B P - 1 0 ．B

10、 e y o n da l l q u e s t i o n ，m o n o c l o n a la n t i b o d yi st h eb e s tc h o i c e ．O nt h eb a s i so f p r e v i o u sw o r L b y m e a n s o f W e s t e r n b l o t t i n g ，w eo b t a i n e dm o n o c l o

11、n a l a n t i b o d y s a m p l e s w i t h h i g h p u r i t y , a f f i n i t y a n d s p e c i f i c i t y W i t h t h i sb i o l o g i c a l p r o b e ，w ef o u n d o u tt h e d i s t r i b u t e d d i s p a r i t y

12、o fC a M B P - 1 0i n d i f f e r e n tt i s s u e so f g a r d e np e a ．w h i c h i s av a l u a b l ee x p l o r a t i o n i n t h er e s e a r c h o fe x p r e s s i v er e g u l a t i o no f C a M B P - 1 0 i nd i f

13、 f e r e n td e v e l o p m e n t a lp h a s e sa n d t i s s u ec e l l s ．I th a sg r e a ts i g n i f i c a n c e t o s t u d y f u r t h e r t h e m e c h a n i s m s o f i n t e r a c t i o n b e t w e e n C a Ma n

14、dC a M B P - 1 0 ，a n d r e v e a lt h ep o t e n t i a lb i o l o g i c a le f f e c to f t h ea b n o r m a lb i n d i n gb e t w e e nt h e m． K e y w o r d s ：C a M ，C a M B P - 1 0 ，W e s t e r n b l o t t i n g ，M