中樞AMPK在應(yīng)激肉雞食欲調(diào)控中的作用研究.pdf

1、本課題圍繞著“應(yīng)激-AMPK-食欲”研究主題展開了以下研究，主要是探討AMPK在應(yīng)激肉雞的食欲調(diào)控中的作用。
　　應(yīng)激對肉仔雞下丘腦食欲及AMPK信號通路的影響。試驗選取1日齡體重相近AA肉仔雞144只，隨機(jī)分為3個處理（6個重復(fù)/8只雞）。試驗分為對照組、應(yīng)激組、應(yīng)激抑制組。7日齡進(jìn)行試驗處理，處理時間持續(xù)7天。試驗結(jié)果顯示：日糧中添加皮質(zhì)酮顯著降低了14日齡肉仔雞體增重；皮質(zhì)酮處理顯著降低心臟指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)，相反，

2、顯著提高了肝臟指數(shù)和腹脂率；皮質(zhì)酮組血漿中皮質(zhì)酮、葡萄糖、甘油三酯、肝糖原和胸肌糖原的含量與對照組相比顯著升高；與對照組相比，日糧中添加皮質(zhì)酮顯著上調(diào)14日齡肉仔雞下丘腦中mTOR、GR、AMPKα2、NPY、LKB1、AMPKα1、FAS基因表達(dá)量，ACC蛋白的磷酸化水平在飼喂皮質(zhì)酮時顯著提高，同時AMPK總蛋白及磷酸化水平也顯著提高。由此可見，應(yīng)激導(dǎo)致肉雞體重降低，糖元異生過程加強(qiáng)；應(yīng)激反應(yīng)通過提高促食神經(jīng)肽NPY基因表達(dá)促進(jìn)食欲，

3、同時激活了中樞LKB1-AMPK-ACC信號通路。
　　中樞注射Compound C對應(yīng)激肉雞食欲和能量代謝的影響。試驗選取體重相近的AA肉仔雞48只，7日齡進(jìn)行腦室埋管，隨機(jī)分為4個試驗組（6個重復(fù)/2只雞）：DEX+Compound C組、DEX組、Compound C組、對照組。8日齡早上8:00 DEX處理組皮下注射地塞米松，對照組注射等劑量的生理鹽水，連續(xù)注射3天。10日齡注射后空腹3小時，Compound C組注射Co

4、mpound C、對照組注射等劑量的DMSO，每隔30分鐘統(tǒng)計一次采食量，連續(xù)統(tǒng)計120分鐘。根據(jù)采食量數(shù)據(jù)，重復(fù)上述試驗，腦室注射Compound C后繼續(xù)空腹1小時，采集樣品。試驗結(jié)果顯示：DEX顯著降低了肉仔雞8日齡和9日齡日增重；與對照組相比，地塞米松處理顯著上調(diào)了肉雞下丘腦AMPKα2、LKB1、NPY以及mTOR基因表達(dá)，但后期中樞注射Compound C明顯降低肉仔雞下丘腦mTOR基因表達(dá)；與對照組相比，腦室注射Compo

5、und C顯著降低了應(yīng)激狀態(tài)下肉雞下丘腦AMPK總蛋白及磷酸化水平水平；與對照組相比，地塞米松處理顯著降低了mTOR蛋白的磷酸化水平，后期中樞注射Compound C同樣明顯降低mTOR蛋白的磷酸化水平。由此可知，應(yīng)激狀態(tài)下中樞注射Compound C明顯的降低采食量持續(xù)到1小時；應(yīng)激激活下丘腦AMPK，但后期中樞注射Compound C明顯抑制AMPK活性，并且通過AMPK-mTOR信號通路調(diào)控機(jī)體能量代謝。
　　日糧不同能量水

6、平對肉雞食欲及中樞AMPK的影響。選取1日齡的雄性AA肉仔雞216只，隨機(jī)分為3個處理組（6個重復(fù)/12只雞）：低能日糧組（2900 kcal/kg）、正常日糧組（3200 kcal/kg）、高能日糧組（3500 kcal/kg）；飼喂至21日齡各個重復(fù)取2只采集血漿及下丘腦樣品。試驗結(jié)果顯示：低能日糧組平均日采食量明顯高于其他兩組，高能日糧組平均日增重明顯高于其他兩組；與對照組相比，高能日糧組和低能日糧組血漿中UREA的含量明顯升高，

7、其中低能日糧組含量最高；與高能日糧組相比，低能日糧處理顯著升高了肉仔雞血漿中TG含量；此外，高能日糧和低能日糧均顯著降低了21日齡肉仔雞脾臟指數(shù)；高能日糧處理顯著下調(diào)肉仔雞下丘腦LKB1、NPY、CCK、GR基因表達(dá)；與對照組相比，低能日糧顯著上調(diào)肉仔雞下丘腦AMPKα2基因表達(dá)；與高能日糧組相比時，低能日糧處理顯著上調(diào)21日齡肉仔雞下丘腦AMPKα1基因表達(dá)。綜上所述，飼喂高能日糧時，肉雞中樞AMPK信號通路被抑制，NPY表達(dá)量下降；

8、飼喂低能日糧時，激活中樞AMPK，通過AMPK信號通路調(diào)控機(jī)體能量平衡。
　　日糧不同能量水平對應(yīng)激肉雞食欲及AMPK信號通路的影響。選取體重相近1日齡雄性AA肉仔雞216只，隨機(jī)分為6個處理組（3個重復(fù)/12只）：低能日糧*DEX組，正常日糧*DEX組，高能日糧*DEX組；低能日糧*Con組，正常日糧*Con組，高能日糧*Con組。14日齡與28日齡早上8:00 DEX組皮下注射地塞米松，對照組注射等劑量的生理鹽水，連續(xù)注射3天

9、。試驗結(jié)果顯示：在相對生長高峰期，無論飼喂何種日糧，糖皮質(zhì)激素處理均顯著提高肉雞下丘腦LKB1、AMPKα1和GR基因表達(dá)量。在絕對生長高峰期，糖皮質(zhì)激素使正常日糧組和高能日糧組肉雞下丘腦LKB1、NPY基因表達(dá)量顯著升高；同時，DEX處理顯著降低能日糧組肉雞下丘腦ACC總蛋白及磷酸化水平，顯著提高正常日糧組肉雞下丘腦AMPK磷酸化蛋白水平。綜上所述，相對生長高峰期，DEX對LKB1-AMPK信號通路的影響不受日糧類型的影響，促食神經(jīng)肽