2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、雞的腫瘤性疾病包括馬立克氏病(Marek's disease,MD)、禽白血病(Avain leukosis,AL)和網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病(Reticuloendotheliosis,RE),分別是由馬立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)、禽白血病病毒(Axian leukosis virus,ALV)和網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)引起。腫瘤病的發(fā)生

2、一方面可以引起雞的腫瘤而死亡;另一方面可以引起雞的免疫功能受到損害,導(dǎo)致免疫抑制,使雞的抵抗力下降,從而并發(fā)或繼發(fā)其他感染,使生產(chǎn)性能下降甚至死亡。當前,這三種病在我國養(yǎng)雞場中都有不同程度的存在,并具有相似的臨床癥狀,臨床上易于混淆。疾病鑒別診斷是疾病控制的前提。本研究主要用原位雜交對三種腫瘤病進行鑒別診斷,并對其相關(guān)基因的序列進行測序和分析,主要內(nèi)容及結(jié)果報告如下: 1.根據(jù)GeneBank中MDV、ALV-J和REV基因序列

3、,設(shè)計并合成三對引物,對保存的陽性病料進行擴增,并經(jīng)測序確定其特異性。然后將PCR產(chǎn)物亞克隆到pSPT18,經(jīng)DIG標記得到針對三種腫瘤病的特異cRNA探針。 2.將收集的病料制成石蠟切片,和以前保存的切片一起,加入特異性探針進行原位雜交,結(jié)果在切片上可以看到清楚的陽性信號。對32份疑似腫瘤病料進行檢測,結(jié)合切片HE染色,發(fā)現(xiàn)MDV陽性率為25.00%(8/32),ALV-J陽性率為18.75%(6/32),REV陽性率為3.1

4、3%(1/32)。 3.根據(jù)GeneBank中MDV、ALV-J和REV基因序列,設(shè)計出MDV meq基因的特異引物和ALV、REV env基因的引物,將擴增出的基因克隆入pMD18-T載體篩選陽性克隆進行測序,并將測序結(jié)果和國內(nèi)外發(fā)表毒株進行序列比對分析。結(jié)果表明,所測MDVmeq 1020個堿基,編碼340個氨基酸;其核苷酸與參考毒株間同源性在98.6%~99.8%之間,氨基酸同源性在96.5%~99.4%之間。本研究序列親

5、緣關(guān)系很近,同源性在99.5%~99.6%之間。與0095親緣關(guān)系較近,與GA、648和N親緣關(guān)系較遠。 所測ALV-J gp85有921個堿基,編碼307個氨基酸,其核苷酸與參考毒株同源性在86.8%~97.5%之間;gp37有591個堿基,編碼197個氨基酸,其核苷酸與參考毒株同源性在93.7%~98.3%之間。gp85推導(dǎo)氨基酸同源性在84.0%~95.4%之間,gp37推導(dǎo)氨基酸同源性在89.8%~98.0%之間。本研究

6、序列親緣關(guān)系較近,同源性在94.4%~98.7之間。與GD06SL1和GD06SL2親緣關(guān)系較近,與ADOL-7501親緣關(guān)系較遠。 所測的REV部分env序列有477個堿基,編碼159個氨基酸,此部分env同源性在94.3%~100%之間,其推導(dǎo)氨基酸同源性在87.3%~100%之間。本研究毒株和APC-566親緣關(guān)系較近,與SNV親緣關(guān)系較遠。 本研究建立了原位雜交技術(shù)檢測雞三種腫瘤性疾病的方法,并進行了初步應(yīng)用,對

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