異亮氨酸對生長中期草魚肉質(zhì)和鰓屏障功能的影響.pdf

1、本試驗研究了異亮氨酸對生長中期草魚肉質(zhì)以及鰓屏障功能的影響，并確定了生長中期草魚對異亮氨酸的需要量。試驗選擇平均體重256.8±3.8 g（P＞0.05）的健康草魚540尾，平均分為6個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)30尾魚，飼喂不同水平的異亮氨酸飼糧(3.8，6.6，9.3，12.5，15.2和18.5 g/kg)8周，考察異亮氨酸對魚肌肉品質(zhì)和抗氧化能力的影響。生產(chǎn)試驗結(jié)束后，每個處理選取30尾魚，進行銅浸泡試驗，探索異亮氨酸對草

2、魚鰓屏障功能的保護作用。本試驗結(jié)果如下:
　　1.生產(chǎn)試驗
　　生產(chǎn)試驗結(jié)果表明，與對照組（3.8 g/kg飼糧）相比，添加異亮氨酸顯著提高了(P＜0.05)生長中期草魚:(1)增重百分比(PWG)、特異性生長率(SGR)、攝食量(FI)、飼料效率(FE)和蛋白沉積率(PER);(2)肌肉粗蛋白和粗脂肪含量;(3)肌肉剪切力、羥脯氨酸含量和pH值;(4)肌肉抗超氧陰離子能力(ASA)、抗羥自由基能力(a-HR)、谷胱甘肽(G

3、SH)含量、銅鋅超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性;(5)肌肉Cu/Zn-SOD、GPx和谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)的基因表達(dá);(6)肌肉抗氧化相關(guān)信號分子包括核因子相關(guān)因子2(Nrf2)、雷帕霉素靶蛋白(TOR)、核糖體蛋白激酶1(S6K1)和酪蛋白激酶2(CK2)的基因表達(dá)。與此相反，添加異亮氨酸可以顯著降低(P＜0.05)生長中期草魚:(1)血氨含量;(2)肌肉水分含量、失水率、組織蛋白酶B

4、和L活性和乳酸含量;(3)肌肉丙二醛(MDA)含量、蛋白羰基(PC)含量以及過氧化氫酶(CAT)活性;(4)肌肉CAT和Kelch樣ECH聯(lián)合蛋白1(Keap1)基因表達(dá)。結(jié)果說明:異亮氨酸可以提高生長中期草魚的生產(chǎn)性能和改善草魚肉質(zhì)，而肉質(zhì)的改善可能與肌肉抗氧化能力提高有關(guān)，進一步測定肌肉抗氧化相關(guān)基因的表達(dá)揭示了異亮氨酸提高魚肌肉抗氧化能力的部分機制。
　　2.銅浸泡浸泡試驗
　　4天0.7 mg Cu/L銅浸泡浸泡的試

5、驗結(jié)果表明，與陽性對照組相比，添加異亮氨酸可以顯著提高（P＜0.05）銅浸泡后生長中期草魚鰓:(1) GSH含量、ASA、a-HR、Cu/Zn-SOD、CAT、GPx、谷胱甘肽還原酶(GR)和谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)活性;(2) Cu/Zn-SOD、CAT、GPx、GR)和GST基因表達(dá);(3)緊密連接蛋白claudin-3、claudin-b、claudin-c、occludin，ZO-1、白介素10(IL-10)和轉(zhuǎn)化生長因子β(

6、TGF-β)基因表達(dá);(4)相關(guān)信號分子Nrf2、TOR、S6K1和核因子κB抑制蛋白(IκB)基因表達(dá)。相反地，添加異亮氨酸可以顯著降低(P＜0.05)生長中期草魚鰓:(1)PC和MDA含量;(2)白介素1(IL-1)、白介素8(Il8)、claudin-12、Keap1、腫瘤壞死因子α(TNF-α)和核因子κB(NF-κB)基因表達(dá)。異亮氨酸對claudin-15基因表達(dá)無顯著影響(P＞0.05)。結(jié)果表明:異亮氨酸可通過提高草魚鰓

7、抗氧化能力和調(diào)節(jié)緊密連接蛋白表達(dá)來改善鰓的屏障功能，而這種有利作用可能與異亮氨酸調(diào)節(jié)抗氧化和緊密連接相關(guān)分子基因表達(dá)有關(guān)。
　　綜上所述，異亮氨酸可以促進生長中期草魚的生產(chǎn)性能、改善肌肉品質(zhì)和提高肌肉抗氧化能力，而肉質(zhì)的改善可能與肌肉抗氧化能力的增強有關(guān);另一方面，異亮氨酸可能通過提高草魚鰓抗氧化能力和調(diào)節(jié)緊密連接蛋白來防御銅應(yīng)激引起的鰓屏障功能的破壞。在本試驗條件下，以PWG為標(biāo)示，用二次曲線回歸法確定的生長中期草魚(253.4