模擬空間環(huán)境誘變溫莪術(shù)內(nèi)生真菌及代謝產(chǎn)物生物活性研究.pdf

1、目的:
　　 模擬空間微重力、高磁場(chǎng)環(huán)境對(duì)溫莪術(shù)內(nèi)生真菌EZG0807進(jìn)行誘變,篩選出抗生活性更高的正突變株。研究比較突變株與出發(fā)菌株EZG0807的菌體形態(tài)、細(xì)胞生長及其代謝產(chǎn)物的抗生活性。
　　 方法:
　　 采用稀釋涂布平板法對(duì)誘變得到的菌株進(jìn)行分離純化;通過濾紙片擴(kuò)散法和MTT法分別研究誘變株代謝產(chǎn)物對(duì)大腸桿菌、普通變形桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌的抗菌活性和抗乳腺癌細(xì)胞MCF-7的活性,篩選出正突

2、變株;將得到的正突變株與出發(fā)菌株EZG0807通過肉眼和顯微觀察法比較兩者的菌落、菌絲及孢子形態(tài);十字交叉法測(cè)量菌落直徑和干重法測(cè)定生長曲線比較兩者的生長速度;通過濾紙片擴(kuò)散法抑菌實(shí)驗(yàn)和MTT抗腫瘤實(shí)驗(yàn)比較其抑菌及抗腫瘤細(xì)胞活性。
　　 結(jié)果:
　　 1.溫莪術(shù)內(nèi)生真菌EZG0807經(jīng)模擬空間環(huán)境誘變后共分離得到129株菌,其中24h,0g條件下得到15株菌;24h,1g14株;24h,2g16株;48h,0g17株;4

3、8h,1g6株;48h,2g22株;72h,0g13株;72h,1g14株;72h,2g12株;
　　 2.濾紙片擴(kuò)散法初篩結(jié)果顯示,129株菌中17株菌的代謝產(chǎn)物對(duì)金黃色葡萄球菌、普通變形桿菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌有較好的抑制作用;
　　 3.MTT法復(fù)篩結(jié)果表明:初篩的17株菌中誘變菌722-6的代謝產(chǎn)物對(duì)MCF.7細(xì)胞的抑制率比出發(fā)菌株EZG0807高58.08％;
　　 4.菌落形態(tài)上,正突變株722-

4、6的菌絲較出發(fā)菌株EZG0807纖長,膨松,且菌絲呈直立狀,基內(nèi)顏色偏暗;兩株菌的菌絲及孢子形態(tài)相似,第4天時(shí)出發(fā)菌株EZG0807在光學(xué)顯微鏡下觀察到孢子囊,而正突變株菌722-6沒有;
　　 5.通過比較菌落直徑大小和生長曲線發(fā)現(xiàn):正突變株722-6在PDA培養(yǎng)基上的菌落生長速度比出發(fā)菌株EZG0807慢,在查氏液體培養(yǎng)基中的生長速度也較慢,但進(jìn)入穩(wěn)定期后,兩株菌的菌體干重基本相同;
　　 6.在生物活性方面,正突變