轉(zhuǎn)基因后代豬pGH基因差異表達的研究.pdf

1、為探討生長激素在轉(zhuǎn)基因豬后代體內(nèi)的表達量及其與生長性能的相關(guān)性，同時為節(jié)糧型高瘦肉率轉(zhuǎn)基因豬品種的培育奠定科學基礎(chǔ)，本研究針對用精子介導納米基因裁體法制備的F0代母豬與非轉(zhuǎn)基因公豬配種所產(chǎn)的16頭F1代仔豬，經(jīng)PCR擴增、克隆測序后確定轉(zhuǎn)基因陽性率。分別提取耳組織和血液中總RNA，RT-PCR，進行實時熒光定量PCR。根據(jù)RT-PCR中確定的試驗所需內(nèi)參基因，結(jié)合30日齡、90日齡、150日齡樣品和內(nèi)參樣品所得的擴增曲線和熔解曲線圖譜，

2、分析16個樣品不同生長階段的總熒光強度，峰值特異性及組織差異性，確定豬生長激素基因在轉(zhuǎn)基因豬和非轉(zhuǎn)基因豬體內(nèi)的表達量差異。測量統(tǒng)計16頭后代豬的30日齡、90日齡、150日齡體重，通過獨立樣本T檢驗和個體日增重的分析，經(jīng)校正后與第一階段所得pGH基因在豬體內(nèi)的不同表達水平進行關(guān)聯(lián)。結(jié)論如下:
　　 1.F1代仔豬中有7頭為轉(zhuǎn)基因豬，9頭為非轉(zhuǎn)基因豬。
　　 2.同期耳組織中的pGH表達量低于血液中pGH表達量.
　

3、　 3.F1代豬的pGH基因平均表達量在兩組待測豬群中呈現(xiàn)明顯不同。30日齡時轉(zhuǎn)基因組pGH表達量低于非轉(zhuǎn)基因組;90日齡時，雖然轉(zhuǎn)基因組高于非轉(zhuǎn)基因組pGH表達量，但差異不明顯;150日齡時，轉(zhuǎn)基因組pGH表達量明顯高于非轉(zhuǎn)基因組。
　　 4.F1代轉(zhuǎn)基因豬的平均日增重在30日齡之內(nèi)低于非轉(zhuǎn)基因豬17.8372g，90日齡時，已超過非轉(zhuǎn)基因豬，90日齡到150日齡之間，持續(xù)優(yōu)勢生長速度.
　　 5.熒光定量PCR所得