麻蠅全蛋白提取及凝集素的純化鑒定.pdf

1、麻蠅是一種開發(fā)利用價值極高的昆蟲生物資源，它不僅是一種很有前途的廉價、優(yōu)質(zhì)動物蛋白源，而且經(jīng)深加后可獲得多種有效成分，具有較大的發(fā)展?jié)摿?，可開發(fā)成醫(yī)藥、保健品、生化制劑及化工產(chǎn)品，并應(yīng)用于癌癥、艾滋病等難治病的治療，是近年來研究的一個熱點和亮點。
　　 本論文對麻蠅全蛋白提取和凝集素純化鑒定進行了系統(tǒng)研究，得到較完整的全蛋白提取物及高純度凝集素單一蛋白；并對麻蠅全蛋白電泳圖譜、凝集素進行了初步分析。
　　 實驗目的：建立

2、麻蠅全蛋白質(zhì)的提取方法和合理的提取方案，獲得麻蠅全蛋白純品，為制作麻蠅全蛋白電泳圖譜創(chuàng)造條件，為麻蠅蛋白質(zhì)組學研究積累基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。進行麻蠅凝集素的純化與鑒定研究，獲得高純度麻蠅凝集素，為綜合開發(fā)和利用麻蠅資源打下基礎(chǔ)，為其它昆蟲蛋白資源的開發(fā)利用建立可資借鑒的方案。
　　 實驗方法：在預備試驗的基礎(chǔ)上，根據(jù)麻蠅蛋白的組成特點，分別用鹽溶、醇溶、堿提等方法從脫脂麻蠅粉中分離提取清蛋白、小分子肽、球蛋白、醇溶蛋白和堿溶性蛋白等幾類蛋白

3、，并測定蛋白質(zhì)含量，采用正交實驗等技術(shù)，優(yōu)化提取條件，設(shè)計麻蠅全蛋白提取方案，獲得純度較高的麻蠅全蛋白，用于制作麻蠅全蛋白電泳圖譜。采用親和層析法和戊二醛法純化凝集素，通過SDS--PAGE凝膠電泳鑒定與分析了凝集素的理化性質(zhì)與生物活性。
　　 實驗結(jié)果：脫脂麻蠅粉蛋白質(zhì)的主要成分是清蛋白、球蛋白和小分子肽；大部分蛋白質(zhì)的分子量分部在32-86.2KD之間；蛋白質(zhì)得率為44.94％，回收率為85.6％，Tris-飽和酚法獲得的麻