紅景天苷對(duì)雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞及心肌細(xì)胞中HIF-1α表達(dá)的影響.pdf

1、肉雞腹水綜合征(Ascites Syndrome，AS)，被稱為是威脅肉雞養(yǎng)殖業(yè)的主要三大營(yíng)養(yǎng)代謝疾病之一，21世紀(jì)初，全球每年因肉雞腹水綜合征所造成的經(jīng)濟(jì)損失大約在10億美元左右，其中因該病死亡而造成的直接經(jīng)濟(jì)損失已達(dá)到大約5億美元。巨額的經(jīng)濟(jì)損失加大了各地學(xué)者們對(duì)肉雞腹水綜合征的研究力度，目前，對(duì)于肉雞腹水綜合征的研究主要還是停留在飼養(yǎng)管理的階段，臨床上存在一些諸如氯化鈣、利尿劑（如雙氫克尿噻）、健脾利水的中草藥（如木通、商陸根、蒼

2、術(shù)、豬苓、谷子、燈心草）、維生素C等主要功效為利尿、抗高壓的藥物，但治療效果并不理想。
　　研究表明，肉雞腹水綜合征發(fā)病原因是機(jī)體系統(tǒng)性缺氧，而機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間代償性缺氧構(gòu)成了肺動(dòng)脈重構(gòu)，肺動(dòng)脈重構(gòu)又加劇了肺動(dòng)脈高壓(Pulmonary Hypertension，PH)的形成，如此循環(huán)最終導(dǎo)致了AS，因此，該病又被學(xué)者們稱為肺動(dòng)脈高壓綜合征(Pulmonary Hypertension Syndrome，PHS)。缺氧誘導(dǎo)因子-1(HI

3、F-1)是機(jī)體通過(guò)感受缺氧信號(hào)，從而傳導(dǎo)機(jī)體中缺氧信號(hào)的一個(gè)關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子。缺氧誘導(dǎo)因子-1，是由HIF-1α與HIF-1β兩個(gè)亞基組成，在機(jī)體中，它作為上游控制缺氧的調(diào)節(jié)蛋白，研究表明，哺乳動(dòng)物體內(nèi)的缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)的表達(dá)水平會(huì)隨著細(xì)胞氧濃度下降而升高，導(dǎo)致其下游的調(diào)控蛋白大量表達(dá)（如內(nèi)皮素1、促紅細(xì)胞生成素、內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等），從而產(chǎn)生一系列的生理病理變化。研究表明，紅景天苷(salidroside，sal)作為傳統(tǒng)

4、中藥紅景天的有效成分之一，具有抗缺氧、抗疲勞、抗輻射、抗衰老等多種藥理作用。通過(guò)哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床觀察證實(shí)，它的抗缺氧作用十分明顯，也同時(shí)具有保護(hù)哺乳動(dòng)物心肺血管的作用?；诖罅坎溉閯?dòng)物的研究基礎(chǔ)上，我們通過(guò)建立誘導(dǎo)雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞(Pulmonary vascular Endothelial Cells，PVECs)、肺血管平滑肌細(xì)胞(Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells，PASMCs)及心肌細(xì)胞

5、(Cardiocytes)缺氧的模型，以HIF-1α基因表達(dá)水平作為衡量機(jī)體缺氧的標(biāo)準(zhǔn)，觀察紅景天苷對(duì)HIF-1α基因在雞胚PVECs、PASMCs及Cardiocytes中的表達(dá)水平，探索紅景天苷對(duì)缺氧誘導(dǎo)的肉雞雞胚中的心血管細(xì)胞是否具有良好的保護(hù)作用，為紅景天苷用于防治肉雞腹水綜合征的治療奠定良好的理論基礎(chǔ)。
　　將原代培養(yǎng)的雞胚PVECs、PASMCs及Cardiocytes各自分為五組:正常對(duì)照組、缺氧+不同劑量紅景天苷(

6、sal)處理組(40，80，120μg/ml)、缺氧組（0μg/ml），通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)HIF-1αmRNA的表達(dá)量。應(yīng)用試劑盒對(duì)雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)液進(jìn)行MDA含量的測(cè)定。
　　結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，缺氧可顯著提高雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞及心肌細(xì)胞內(nèi)HIF-1α mRNA的表達(dá)量(p＜0.05)，且缺氧的雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)液中的MDA的含量均上調(diào)(p＜0.05);

7、與缺氧組比較，紅景天苷能夠使雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞及心肌細(xì)胞內(nèi)HIF-1α mRNA的表達(dá)量明顯下降(p＜0.05)，且不同濃度的紅景天苷能夠使雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)液中的MDA含量下調(diào)(p＜0.05)。
　　結(jié)論:第一，紅景天苷能抑制雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞及心肌細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1α mRNA的表達(dá)水平;第二，紅景天苷能降低雞胚肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺血管平滑肌細(xì)胞缺氧組的培養(yǎng)液中