農(nóng)桿菌介導(dǎo)棉花遺傳轉(zhuǎn)化及純合株系的篩選.pdf

1、提高棉花自身利用土壤潛在磷的能力意義重大。本研究以4個(gè)優(yōu)良的陸地棉品種為受體，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法，將含有根特異表達(dá)啟動(dòng)子的PhyA基因轉(zhuǎn)入胚性愈傷組織和下胚軸，以期獲得轉(zhuǎn)植酸酶基因棉花材料，同時(shí)對(duì)課題組前期轉(zhuǎn)化獲得的轉(zhuǎn)PhyA基因T3 代3 230 株材料進(jìn)行PCR 檢測(cè)，篩選純合株系，并進(jìn)一步測(cè)定根系植酸酶活性。獲得主要結(jié)果如下：
　　 1.用農(nóng)桿菌侵染棉花胚性愈傷后，卡那霉素濃度、胚性愈傷組織生長(zhǎng)狀態(tài)、受體材料的基因型等因

2、素對(duì)目的基因的轉(zhuǎn)化效率影響較大。本研究表明：卡那霉素的篩選最佳濃度為75 mg/L，且黃色疏松，處于活躍分裂狀態(tài)的棉花胚性愈傷，有助于提高轉(zhuǎn)化效率，篩選出晉棉14、陜724是兩個(gè)優(yōu)良的轉(zhuǎn)基因受體材料。
　　 2.利用優(yōu)化的條件，以陸地棉品種晉棉14、陜724的胚性愈傷組織為受體，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法，從農(nóng)桿菌侵染后經(jīng)過(guò)6個(gè)月獲得了經(jīng)PCR 鑒定含PhyA基因的轉(zhuǎn)基因植株。以中棉所18的下胚軸為受體，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法獲得含PhyA