山羊流產(chǎn)前后細(xì)胞因子和血凝狀態(tài)變化的研究.pdf

1、課題研究了山羊流產(chǎn)前后外周血液中Th1/Th2細(xì)胞因子及血凝狀態(tài)的變化，分析細(xì)胞因子及血凝指標(biāo)的變化規(guī)律，探討其生理學(xué)意義，為提高山羊繁殖效率及胚胎移植妊娠率提供理論依據(jù)，為臨床實(shí)踐提供新的思路。
　　 選擇25只臨床健康發(fā)情周期正常的經(jīng)產(chǎn)未孕白山羊母羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物，第三次自然發(fā)情后本交配種,20只妊娠。在妊娠第60d時(shí)分別頸部肌肉注射PG0.2mg/只，隔24h再注射0.1mg/只，結(jié)果，在第二次注射PG12～24h內(nèi),20只試

2、驗(yàn)羊全部發(fā)生流產(chǎn)，流產(chǎn)率100％。于注射PG前（妊娠第60d）和流產(chǎn)第1、3、8、10d采集外周血液，分離血清和血漿。應(yīng)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)血液中血小板（PLT）和白細(xì)胞（WBC）數(shù)量；應(yīng)用ELISA方法檢測血清中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素10（IL-10）和D-二聚體（D-D）含量；應(yīng)用凝固法測定血漿中凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶時(shí)間（TT）和纖維蛋白原含量（FIB）。并對流

3、產(chǎn)山羊的胎盤組織進(jìn)行Mallory磷鎢酸-蘇木素（PTAH）染色，光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行組織學(xué)觀察。
　　 結(jié)果表明：山羊流產(chǎn)后PLT低于流產(chǎn)前數(shù)量，差異顯著（P<0.05），流產(chǎn)后PLT數(shù)量先降低后升高，流產(chǎn)第3d時(shí)達(dá)最低值（385.63×109/L）；流產(chǎn)第1、3d時(shí)WBC明顯升高，差異極顯著（P<0.01），妊娠第8、10d時(shí)WBC有所下降，但仍顯著高于流產(chǎn)前的數(shù)量（P<0.05）。山羊血清中TNF-α含量在流產(chǎn)的第1、3、8、

4、10d均極顯著高于流產(chǎn)前含量（P<0.01），流產(chǎn)第1、3d逐漸升高，第8、10d逐漸降低，以流產(chǎn)第1d的水平最低（38.705±7.235pg/mL），第3d最高（59.074±14.239 pg/mL）；血清IL-10含量在流產(chǎn)后第1d時(shí)低于流產(chǎn)前含量，差異顯著（P<0.05），流產(chǎn)第3、8、10d時(shí)含量繼續(xù)降低，極顯著低于流產(chǎn)前和流產(chǎn)第1d時(shí)的含量（P<0.01）。PT在流產(chǎn)第1d時(shí)顯著短于流產(chǎn)前時(shí)間（P<0.05），流產(chǎn)第3、8

5、d時(shí)PT繼續(xù)縮短，極顯著短于流產(chǎn)前時(shí)間（P<0.01），流產(chǎn)第10d時(shí)PT有所延長，但仍極顯著短于流產(chǎn)前時(shí)間（P<0.01）；APTT在流產(chǎn)第1d時(shí)顯著短于流產(chǎn)前時(shí)間（P<0.05），流產(chǎn)第3d時(shí)APTT降到最低值（16.63±2.05s），極顯著短于流產(chǎn)前時(shí)間（P<0.01），流產(chǎn)第8d和第10d時(shí)APTT有所升高，但仍極顯著短于流產(chǎn)前時(shí)間（P<0.01）；TT在流產(chǎn)后先縮短后延長，在流產(chǎn)第3d時(shí)達(dá)到最低值(6.06±0.53s)；F

6、IB含量在山羊流產(chǎn)后先升高后降低，在流產(chǎn)第8d時(shí)達(dá)到最高值（325±7.74 mg/dL）；D-D含量在山羊流產(chǎn)后第1d時(shí)顯著高于流產(chǎn)前含量（P<0.05），流產(chǎn)第3d和第8d時(shí)D-D繼續(xù)升高，極顯著高于流產(chǎn)前含量（P<0.01），流產(chǎn)第10d時(shí)D-D有所降低，但仍極顯著高于流產(chǎn)前含量（P<0.01）。結(jié)論：（1）在山羊妊娠第60d時(shí)，先肌肉注射PG0.2mg，間隔24h再注射0.1mg，可成功建立山羊流產(chǎn)模型。（2）山羊流產(chǎn)前后PLT

7、和WBC呈現(xiàn)規(guī)律性的變化；流產(chǎn)后PLT明顯降低，WBC則顯著升高。（3）TNF-α和IL-10在流產(chǎn)前后呈現(xiàn)規(guī)律性的變化；TNF-α含量流產(chǎn)后較流產(chǎn)前升高，IL-10含量流產(chǎn)后較流產(chǎn)前降低；TNF-α與IL-10變化趨勢相反。（4）山羊流產(chǎn)前后血凝指標(biāo)發(fā)生了規(guī)律性變化，PT、APTT、TT在流產(chǎn)后較流產(chǎn)前都明顯降低，后又逐漸升高，變化趨勢相同；流產(chǎn)后FIB和D-D含量較流產(chǎn)前顯著升高，兩者之間變化趨勢相同，但和PT、APTT、TT變化趨