麻痹性貝毒的分離檢測及其對雙殼貝類排泄的影響.pdf

1、本論文主要研究麻痹性貝毒（PSP）的分離純化及檢測和對貝類排泄的影響。在PSP的分離純化實(shí)驗(yàn)中，對用0．05mol/L醋酸從塔瑪亞歷山大藻中提取的PSP通過凝膠色譜柱Bio-Ge1 P2進(jìn)行了初步純化。稱取80g Bio-Ge1 P2粉末填于2．6cmID×50cm層析柱中作為制備分離藻液的分離柱，流動相為0．05mol/L醋酸，收集得到的分液選用pH值檢測和熒光點(diǎn)檢驗(yàn)法檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，PSP至29管即420min時(shí)，從凝膠色譜柱中

2、洗脫出，至31管時(shí)完全洗脫出。實(shí)驗(yàn)表明通過凝膠色譜柱能夠分離純化得到一定純度的PSP，同時(shí)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)熒光點(diǎn)檢驗(yàn)法檢測法PSP作為一種簡便易行的方法具有特定的檢測現(xiàn)象，即含有PSP的溶液用2％堿性H2O2氧化時(shí)，表層會出現(xiàn)藍(lán)色漂浮物，且當(dāng)含有PSP的溶液加入2％堿性H2O2后如果未用0．05mol/L醋酸溶液停止反應(yīng)，溶液表層會變花。因此本作者認(rèn)為在PSP的常規(guī)檢測中可使用熒光點(diǎn)檢驗(yàn)法和小白鼠生物檢測法相結(jié)合的方法進(jìn)行，可為目前所面臨的小

3、白鼠福利問題提供建設(shè)性解決方案。 作者對小白鼠生物法（Mouse Bioassay，MBA）檢測PSP的含量進(jìn)行了補(bǔ)充修訂，探討了溫度對小白鼠生物法測定麻痹性貝毒（Paralytic Shellfish Poisoning，PSP）含量的影響。在29℃～30℃和32℃～33℃下，用MBA測定從塔瑪亞歷山大藻（Alecandrium tamarense）中提取的PSP含量，用測得的PSP濃度（Y）和實(shí)際PSP濃度（X）表示溫度對M

4、BA測定PSP含量的關(guān)系。結(jié)果顯示，溫度為29℃～30℃時(shí)，y=0．507x+0．151（R2=0．9377，P<0．01）；溫度為32℃～33℃時(shí)，y=1．0469x+0．0545（R2=0．9807，P<0．01），溫度變化與MBA測得的PSP含量呈正相關(guān)。溫度為29℃～30℃和32℃～33℃時(shí)，用MBA測定PSP含量與實(shí)際PSP含量存在差別。本文亦對MBA法中萃取劑選擇使用等問題進(jìn)行了探討，認(rèn)為0．1 mol/L鹽酸是最佳的萃取劑

5、。 PSP對貝類排泄的影響方面，在水溫20℃下，設(shè)置了0、100、500、1000、2000、4000 cell·ml-1六個(gè)藻類濃度組，以靜水方法研究了塔瑪亞歷山大藻對青蛤和菲律賓蛤仔排泄的影響，具體指標(biāo)包括排磷率，排氮率（氨氮、硝酸氮、亞硝酸氮）。亞硝態(tài)氮、硝酸氮、氨氮和活性磷的測定方法分別為磺胺-奈乙二胺法、鋅鎘還原法、Wattenberg比色法和抗壞血酸還原法。結(jié)果顯示，塔瑪亞歷山大藻對兩種貝排亞硝酸氮、排磷、排氨氮的