熱處理提高桃果實耐冷性的機理研究及相關(guān)磷脂酶D基因的電子克隆.pdf

1、桃是我國黃河與長江流域主要果品之一，屬于典型的呼吸躍變型果實，不易保鮮，不耐貯藏，且對低溫非常敏感，在貯運過程中極易發(fā)生冷害，造成極大的經(jīng)濟損失。磷脂酶D（phospholipase D，PLD，EC 3.1.4.4）是植物組織中普遍存在的一類磷脂水解酶，幾乎在植物所有的生命階段和對環(huán)境的應(yīng)答中都起著重要作用。本研究以久保桃（Prunus persica L.Cv.Jiubao）果實為試材，研究了熱處理誘導(dǎo)采后桃果實耐冷性與PLD之間的

2、關(guān)系，并克隆了桃果實PLD基因的全長序列。本研究有利于明確PLD作用的分子細胞學(xué)機理，能夠為控制桃果實冷害提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 ⑴38℃熱空氣處理2 d，能夠明顯抑制低溫貯藏過程中桃果實相對電導(dǎo)率和MDA含量的升高，減輕果實冷害。在熱處理初期桃果實PLD和SA被激活，Western分析證實熱處理對PLD的激活作用是通過增加其蛋白表達量來實現(xiàn)的。由此可見，PLD信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)和SA 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的激活是果實響應(yīng)溫度

3、變化的前期反應(yīng)。但對于PLD或其水解產(chǎn)物如何作為上游信號參與熱處理誘導(dǎo)桃果實耐冷性的產(chǎn)生，以及該過程中PLD信號途徑與SA 信號途徑的關(guān)系仍需要進一步實驗驗證。
　　 ⑵基于BLAST搜索，從桃基因組數(shù)據(jù)庫中篩選到一個新的磷脂酶D基因序列（PPA001528M），并進行了RT-PCR驗證。該基因具有完整的開放閱讀框（2424 bp），編碼807個氨基酸。多序列比對顯示，該基因編碼的氨基酸序列與番茄、草莓、葡萄等物種的磷脂酶D氨基