烯丙基硫苷提取檢測體系及油菜高烯丙基硫苷細胞系建立的研究.pdf

1、硫代葡萄糖苷（Glucosinolates，簡稱硫苷）是一類葡萄糖衍生物的總稱，是一類重要的親水性次生代謝產(chǎn)物，廣泛存在于15科植物中，其中最主要的是十字花科。烯丙基硫苷（Sinigrin）是硫苷的一種，是多種十字花科植物的風(fēng)味成分，具有一定的藥用價值。烯丙基硫苷的降解產(chǎn)物中烯丙基異硫氰酸酯具有抗癌抗腫瘤作用，并且還被廣泛用于食品添加劑和食品抗菌劑。 本研究在優(yōu)化烯丙基硫苷的提取和HPLC檢測條件的基礎(chǔ)上，檢測了20個油菜品種（

2、品系）種子中烯丙基硫苷含量，篩選出了烯丙基硫苷含量較高的品種，建立了愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)體系，研究了多種因素對愈傷組織硫苷含量的影響。本研究所得結(jié)論如下： 1.通過提取條件的單因子試驗，烯丙基硫苷的最佳提取條件為：提取劑：70%甲醇；提取溫度：70℃；提取時間：30min；提取次數(shù)：3次；料液比：30：1。 2.烯丙基硫苷HPLC分離檢測的最佳條件為：流動相：甲醇：水（0.005mol/LKCl）=9：91；流速：0.5m

3、l/min；柱溫：30℃；檢測波長：230nm。 3.油菜種子烯丙基硫苷含量檢測結(jié)果表明：推廣品種中隴油5號含量明顯高于其他品種，其值高達19.38mg/g；11個雜交品系油菜種子中的烯丙基硫苷含量普遍高于推廣品種。 4.經(jīng)篩選油菜愈傷組織誘導(dǎo)的最佳條件：黑暗條件：基本培養(yǎng)基MS；葉片：1.0mg/L2，4-D+2.0mg/L6-BA；莖段：0.2mg/L2，4-D+3.0mg/L6-BA；根：0.2mg/L2，4-D+

4、0.5mg/L6-BA；胚和胚乳：0.5mg/L2，4-D+2.5mg/L6-BA。 5.油菜愈傷組織誘導(dǎo)的最佳部位為根和胚，其烯丙基硫苷含量也較高。 6.油菜愈傷繼代最佳培養(yǎng)基為：MS+3.0mg/L6-BA+0.5mg/L2，4-D。 7.5種前體氨基酸添加對油菜愈傷組織的增殖無明顯促進作用。纈氨酸添加濃度2mmol/L和4mmol/L對愈傷組織中烯丙基硫苷含量有明顯促進作用；其他4種氨基酸對烯丙基硫苷含量沒