Vgb基因轉(zhuǎn)化薰衣草愈傷組織及轉(zhuǎn)化體耐澇性研究.pdf

1、本研究以薰衣草葉片為外植體建立了英國(guó)薰衣草愈傷再生體系，并以愈傷組織為受體，通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行了Vgb(透明顫菌血紅蛋白基因)的遺傳轉(zhuǎn)化，獲得再生植株。對(duì)轉(zhuǎn)Vgb基因的薰衣草耐澇性進(jìn)行了鑒定。本研究取得的主要結(jié)果如下： 1.以MS+2，4-D0.10 mg/L+KT0.30 mg/L為誘導(dǎo)愈傷組織最佳培養(yǎng)基；將淡黃色愈傷組織放在MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.50 mg/L培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)2～3次，30 d后形成大量

2、的叢生芽。待小芽長(zhǎng)至1～2 cm后放入MS+6-BA1.0 mg/L擴(kuò)繁培養(yǎng)基中擴(kuò)繁1～2代。擴(kuò)繁后的小芽放入1/2MS+IAA1.0 mg/L培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，20 d后生根率達(dá)93.33％，得到完整再生植株。 2.農(nóng)桿菌介導(dǎo)薰衣草愈傷組織，獲得轉(zhuǎn)Vgb基因的轉(zhuǎn)基因植株。轉(zhuǎn)化條件為：愈傷組織無(wú)需經(jīng)過(guò)預(yù)處理，直接在OD值為0.4～0.8的菌液中浸泡15 min后暗培養(yǎng)24 h。處理完畢后，將愈傷組織轉(zhuǎn)入添加30 mg/L K