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文檔簡介
1、血細(xì)胞直方圖和散點(diǎn)圖的臨床意義,一、什么是直方圖?,直方圖是通過血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測量而提供的血細(xì)胞體積分布圖形,這些圖形可以表示出細(xì)胞群體分布情況。,,,檢測區(qū)域,,紅細(xì)胞,,紅細(xì)胞通過小孔,庫爾特原理,Oscilloscope,,,,,,,,示波鏡,,,,檢測區(qū)域,,白細(xì)胞,,白細(xì)胞通過小孔,庫爾特原理,,,,,,,,示波鏡,直方圖原理,,,,,淋巴細(xì)胞,大單個(gè)核細(xì) 胞群,粒細(xì)胞,,,,,,淋巴,嗜堿,單核,嗜酸,中性粒細(xì)胞,高頻度分析-
2、直方圖,直方圖-X軸:體積(fL)-Y軸:相對(duì)數(shù)量,通道劃分RBC直方圖:36-360fL,256個(gè)通道PLT直方圖:2-20fL,64個(gè)通道….WBC直方圖:35-450fL,256個(gè)通道,二、什么是散點(diǎn)圖?,散點(diǎn)圖是白細(xì)胞分類的平面圖。,正常散點(diǎn)圖,什么是VCS技術(shù)?,VCS技術(shù)是庫爾特五分類血球儀對(duì)白細(xì)胞分類的專利技術(shù),即分類時(shí)不需傳統(tǒng)的染色方法,僅用三個(gè)物理量,VOLUME(體積)、CONDUCTIVITY(傳導(dǎo)性)、
3、SCATTER(激光)將五種白細(xì)胞分開的技術(shù)。,Volume—電阻法—針對(duì)細(xì)胞體積的測量,體積(Volume)—運(yùn)用庫爾特原理檢測細(xì)胞體積,揭示VCS技術(shù)的威力所在,Conductivity—傳導(dǎo)性—針對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的測量方法,7-10?(復(fù)雜性),傳導(dǎo)性(Conductivity)—利用高頻電磁波對(duì)細(xì)胞傳導(dǎo)性的特點(diǎn),檢測:細(xì)胞核大小細(xì)胞核密度細(xì)胞核結(jié)構(gòu)核漿比—異淋和淋巴,揭示VCS技術(shù)的威力所在,激光散射(Scat
4、ter)全角度:10°-70°的全角度激光散射量與流式細(xì)胞儀相同的激光光源保證結(jié)果準(zhǔn)確保證成本低廉它是準(zhǔn)確區(qū)分嗜酸性細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的一個(gè)重要參數(shù)。,Laser Scatter—激光散射—針對(duì)細(xì)胞顆粒特性的測量方法,揭示VCS技術(shù)的威力所在,體積檢測(V),V 是以庫爾特原理檢測細(xì)胞的體積獲得的是完全的細(xì)胞體積,VCS - DC,細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)檢測(C),C 運(yùn)用高頻探針檢測細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)獲得細(xì)胞核復(fù)雜
5、程度的信息區(qū)分分葉核和非分葉核細(xì)胞,VCS - RF,VCS - Laser,S 是運(yùn)用一個(gè)寬角度的散射范圍(10? -70?)來測量細(xì)胞的顆粒特性更好地根據(jù)顆粒特性區(qū)分淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞,細(xì)胞顆粒特性檢測(S),VCS檢測,八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地在流式通道內(nèi)接受VCS三重檢測,得到各自的三維座標(biāo)值,V:檢測細(xì)胞體積C:檢測細(xì)胞內(nèi)部核結(jié)構(gòu)S:檢測細(xì)胞內(nèi)部顆粒特征,,,,VCS技術(shù)的強(qiáng)大威力,所有檢
6、測在相同的試劑環(huán)境下進(jìn)行。,美國貝克曼庫爾特256X256X256 = 1677 萬個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn),日本希森美康256 X 256 = 6萬個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn),VCS檢測,八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地接受VCS三重檢測,得到各自的三維座標(biāo)值,VCS,,,,正常散點(diǎn)圖,正常散點(diǎn)圖,正常散點(diǎn)圖,三、散點(diǎn)圖的臨床意義,,,,,,,急性粒細(xì)胞白血病,WBC 4.7Neut % 1Blast % 72
7、PLT 8FlagsImmGrans/Bands 2Blasts,急性粒細(xì)胞性白血病結(jié)果特征,中性粒細(xì)胞區(qū)域上方出現(xiàn)大量細(xì)胞,可能為原始粒細(xì)胞血小板數(shù)量低,分布異常,曲線不擬合,出現(xiàn)R報(bào)警手工涂片分類結(jié)果為: 中性粒細(xì)胞 1% 淋巴細(xì)胞 27% 原始粒細(xì)胞 72%,M1 急性粒細(xì)胞性白血病,WBC74.6Neut %
8、 6Myelocyte % 1Blast % 86PLT 105FlagsImmGrans/Bands 2Blasts,M3 急性早幼粒細(xì)胞性白血病,WBC2.9Neut % 10Band % 1Promyelocyte % 53PLT 7FlagsImmGrans/Bands 2Blasts,M4 粒單細(xì)胞性白血病,WBC67.8Neut
9、 % 42Mono % 34Imm Grans % 7Blast % 4PLT 55FlagsImmGrans/Bands 2Blasts,M5 單核細(xì)胞性白血病,Mono %47ImmGran % 8Blast %34PLT50FlagsBlasts,慢性粒細(xì)胞性白血病,WBC54.6ImmGran % 1Blast
10、 % 75PLT 145FlagsImmGrans/Bands 2Blasts,慢性粒細(xì)胞性白血病結(jié)果特征,白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高,分類散點(diǎn)圖上細(xì)胞基本集中在粒細(xì)胞區(qū)域手工涂片分類結(jié)果: 中性粒細(xì)胞 16% 淋巴細(xì)胞 3% 嗜酸細(xì)胞 1% 嗜堿細(xì)胞 5% 中幼莉細(xì)胞 1% 原始粒細(xì)胞
11、 75%,慢性粒單細(xì)胞性白血病,WBC 6.6Neut % 32Mono % 30ImmGran % 5Blast % 3PLT343FlagsBlasts,嗜酸性細(xì)胞增多癥,WBC 4.5Eos %14.6PLT 171FlagsNone,嗜酸細(xì)胞增多癥結(jié)果特征,白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖上分類良好,各細(xì)胞亞群清晰嗜酸細(xì)胞亞群細(xì)胞增多,異形淋巴細(xì)胞
12、(DF1),WBC 22.0Lymph % 87.3Lymph # 19.2FlagsVariant Lymphs,傳染性單核細(xì)胞增多癥,WBC29.2Lymph %77.0Lymph #22.518% Atypical LymphsFlagsVariant Lymphs,慢性淋巴細(xì)胞性白血病,WBC263.4Lymph % 71.8Lymph #189.1
13、FlagsVariant LymphsBlasts,慢性淋巴細(xì)胞性白血病,WBC12.5Lymph %53.7Lymph # 6.7FlagsVariant LymphsBlasts,慢性淋巴細(xì)胞性白血病結(jié)果特征,白細(xì)胞數(shù)量高,超出儀器操作范圍,以旗標(biāo)+++++代替白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖上絕大多數(shù)細(xì)胞為淋巴細(xì)胞由于淋巴細(xì)胞數(shù)量巨大,影響紅細(xì)胞,導(dǎo)致其參數(shù)后出現(xiàn)R手工涂片分類結(jié)果: 中性粒細(xì)
14、胞 5% 淋巴細(xì)胞 91% 單核細(xì)胞 2% 嗜酸細(xì)胞 1% 嗜堿細(xì)胞 1%,四、紅細(xì)胞三個(gè)平均值的臨床意義,(一)平均紅細(xì)胞體積(MCV),1、計(jì)算方法: MCV=Hct/RBC×1015 fl 2、參考值: 血液分析儀法:
15、 80~100fl,3、意義:全血中每個(gè)紅細(xì)胞的平均體積。,(二)平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH),1、計(jì)算方法: MCH=Hb(g/L)× 1012pg/RBC(L) 2、參考值: 血液分析儀法:27~34pg,3、意義:全血中每個(gè)紅細(xì)胞平均血紅蛋 白含量。,(三)平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC),1、計(jì)算方法: MCHC=Hb(g/L)/Hct
16、2、參考值: 320~360g/L 3、意義:單位體積紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量。,診斷中的應(yīng)用,1、正細(xì)胞性貧血,(1)特點(diǎn):MCV、MCH、MCHC均正常。 (2)常見疾病: 急性失血性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血、白血病等。,2、大細(xì)胞性貧血,(1)特點(diǎn):MCV>正常、MCH >正常、MCHC正常。 (2)常見疾?。?巨幼細(xì)胞貧血。,3、單純小細(xì)胞性貧血,(1)特點(diǎn):MCV<正常、M
17、CH<正常、MCHC正常。 (2)常見疾?。?亞急性或慢性炎癥疾患、尿毒癥。,4、小細(xì)胞低色素性貧血,(1)特點(diǎn):MCV <正常、MCH <正常、MCHC <正常。 (2)常見疾?。?缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鉛中毒、慢性失血性貧血等。,(五)紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW),RDW是反映周圍血紅細(xì)胞間體積差異的參數(shù),通過變異系數(shù)定量地表示紅細(xì)胞體積分布的離散程度。,,,,1、正常參考值: 1
18、4-16%。,2、臨床意義,(1)小細(xì)胞均一性貧血,特點(diǎn):MCV<正常、RDW正常。常見疾?。狠p型珠蛋白生成障礙性貧血、慢性疾病。,(2)小細(xì)胞不均一性貧血,特點(diǎn):MCV<正常、RDW增高。常見疾?。喝辫F性貧血、血紅蛋白S病、 β-珠蛋白生成障礙性貧血、紅細(xì)胞破碎綜合癥等。,(3)正細(xì)胞均一性貧血,特點(diǎn):MCV、RDW均正常。常見疾?。涸僬?、白血病、化療后、急性失血性貧血等。,(4)正細(xì)胞不均一性貧血,特點(diǎn):MCV正常、RDW增高
19、。常見疾?。喝比~酸或維生素B12雙相性貧血、鐵粒幼細(xì)胞貧血、骨髓纖維化等。,(5)大細(xì)胞均一性貧血,特點(diǎn):MCV>正常、RDW正常。常見疾?。憾鄶?shù)再障、部分肝病性貧血、某些腎性貧血。,(6)大細(xì)胞不均一性貧血,特點(diǎn):MCV、RDW均增高。常見疾?。壕抻准?xì)胞貧血、免疫性溶血性貧血等。,HmX五分類血液分析儀旗標(biāo)和代碼,常見的旗標(biāo)和代碼,旗標(biāo)(數(shù)值后):R 結(jié)果需復(fù)核*R 計(jì)數(shù)受干擾H 結(jié)果高于參考范
20、 圍上限L 結(jié)果低于參考 范圍下限,代碼(替代數(shù)值):----- 三次計(jì)數(shù)比統(tǒng)一….. 不完全計(jì)算+++++ 結(jié)果超出操作范圍::::: 流式通道堵塞????? 數(shù)據(jù)無效,白細(xì)胞計(jì)數(shù)值后出現(xiàn) *R的臨床意義,說明白細(xì)胞在35fl處的檢測受到干擾.在白細(xì)胞計(jì)數(shù)孔有35fl大小的顆粒通過并被當(dāng)作白細(xì)胞計(jì)數(shù),且超過一定數(shù)量,觸發(fā)報(bào)警在白細(xì)胞直方圖上看,
21、曲線在35fl處上抬,導(dǎo)致 *R出現(xiàn)的可能原因,紅細(xì)胞未完全溶解樣本存在有核紅細(xì)胞由于存在大血小板、血小板聚集干擾到白細(xì)胞結(jié)果溶血?jiǎng)﹩栴},*R出現(xiàn)的處理方法,1.查看出現(xiàn)的概率,如概率高則先考慮溶血?jiǎng)┑馁|(zhì)和量有無問題,是否應(yīng)更換溶血?jiǎng)?.如只是局限的樣本出現(xiàn),考慮樣本原因,如需確認(rèn)結(jié)果,可采用手工鏡檢,*R出現(xiàn)的處理方法,1.查看出現(xiàn)的概率,如概率高則先考慮溶血?jiǎng)┑馁|(zhì)和量有無問題,是否應(yīng)更換溶血?jiǎng)?.如只是局限的樣本出現(xiàn),考慮
22、樣本原因,如需確認(rèn)結(jié)果,可采用手工鏡檢,PLT結(jié)果后出現(xiàn) R旗標(biāo)的臨床意義,儀器進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)時(shí),計(jì)數(shù) 2fl~ 20fl的血小板數(shù)量,再擬合出一條 0fl~ 70fl的曲線,目的是為了排除計(jì)數(shù)干擾.但條件不滿足時(shí)儀器不能給出擬合曲線,這時(shí)候血小板數(shù)值后出現(xiàn) R .血小板曲線不擬合的條件:血小板計(jì)數(shù)?20,000;血小板曲線不呈正態(tài)分布;大多數(shù)血小板分布在?3fl或?15fl區(qū)域內(nèi);PDW ?20%.,,導(dǎo)致血小板后出現(xiàn) R 的原
23、因,樣本血小板異常:出現(xiàn)異常形態(tài)的血小板、血小板發(fā)生聚集;存在細(xì)胞碎片,如紅細(xì)胞碎片;血小板大小不一(輸血后);電磁波或噪音干擾小孔計(jì)數(shù).,處理方法,請(qǐng)手工鏡檢,+++++ 出現(xiàn)的臨床意義,+++++ (代碼) :結(jié)果超出儀器的操作范圍 對(duì)白細(xì)胞而言計(jì)數(shù)值大于 99.9×109/L; 對(duì)紅細(xì)胞而言計(jì)數(shù)值大于7.00×1012/L ; 對(duì)血小板而言計(jì)數(shù)值大于 999×109/L.處理
24、方法:用ISOTON III液稀釋標(biāo)本至線性范圍內(nèi)再測 注: 1.先做一空白循環(huán)以防止攜帶污染 2.不能報(bào)告白細(xì)胞分類結(jié)果檢查儀器稀釋液和溶血?jiǎng)┹斔拖到y(tǒng)有無故障,代碼 ----- 出現(xiàn)的臨床意義,----- 出現(xiàn)代表三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一可能導(dǎo)致的原因:小孔部分堵塞;標(biāo)本有凝塊;出現(xiàn)細(xì)胞凝集;出現(xiàn)血小板凝集;標(biāo)本稀釋后未充分混勻.,,….. 主要表示吸樣錯(cuò)誤,….. 出現(xiàn)主要表示吸樣錯(cuò)誤,當(dāng)發(fā)生吸樣錯(cuò)誤時(shí),所有參
25、數(shù)的結(jié)果后都會(huì)帶有 ….. ,同時(shí)報(bào)警PART ASP導(dǎo)致的可能原因有:樣本有凝塊,堵塞吸樣針系統(tǒng),影響血樣探測器;樣本量不夠;樣本的血紅蛋白濃度過低(嚴(yán)重貧血),血樣探測器檢測失敗;,發(fā)生吸樣錯(cuò)誤的處理方法,1.查看樣本有無凝塊,如果有重取標(biāo)本,沒有則重新檢測,再出現(xiàn)如上問題則涂片鏡檢有無凝塊或細(xì)胞聚集;2.檢測標(biāo)本量是否夠;3.對(duì)于嚴(yán)重貧血病人樣本采用手動(dòng)進(jìn)樣方式.4.檢測儀器吸樣系統(tǒng),如發(fā)生堵塞則清洗.,代碼 :::
26、:: 出現(xiàn)的臨床意義,在白細(xì)胞五項(xiàng)分類及網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)中,當(dāng)流式通道堵塞產(chǎn)生 ::::: 代碼.在散點(diǎn)分布圖上可有三種堵塞報(bào)警:- FC ,流式通道完全堵塞(無檢測);- PC1 ,流式通道檢測時(shí)間延長;- PC2 ,流式通道檢測時(shí)間縮短.,,,,導(dǎo)致 PC / ::::: 的原因,- FC :完全堵塞;- PC1 :流式通道或標(biāo)本通道部分堵塞導(dǎo)致分類時(shí)間延長;- PC2 :紅細(xì)胞未完全溶解導(dǎo)致分類時(shí)間縮短,或鞘液系統(tǒng)問題
27、.臨床上高膽固醇和高甘油三酯血癥、血紅蛋白病、藥物治療后、進(jìn)行性肝病等都可導(dǎo)致 PC2.,HmX懷疑性旗標(biāo),白細(xì)胞懷疑性旗標(biāo),1. Blasts (原始細(xì)胞)2. Imm Grans/Bands (未成熟桿狀細(xì)胞)3. Variant Lymphs(異型淋巴細(xì)胞)4. Review Slide(涂片復(fù)檢),白細(xì)胞限定性旗標(biāo)(I),1. Leukopenia (白細(xì)胞減少) :白細(xì)胞計(jì)數(shù)低于設(shè)定的下限 2. Leukocytosi
28、s (白細(xì)胞增多) :白細(xì)胞計(jì)數(shù)高于設(shè)定的上限 3. Neutropenia (中性粒細(xì)胞減少):中性粒細(xì)胞的數(shù)值或百分比低于設(shè)定的下限 4. Neutrophilia (中性粒細(xì)胞增多):中性粒細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限,白細(xì)胞限定性旗標(biāo)(II),5. Lymphopenia (淋巴細(xì)胞減少):淋巴細(xì)胞的數(shù)值或百分比低于設(shè)定的下限6. Lymphocytosis (淋巴細(xì)胞增多):淋巴細(xì)胞的數(shù)值后百分比高于設(shè)定的上限 7
29、. Monocytosis(單核細(xì)胞增多):單核細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限 8. Eosinophilia(嗜酸細(xì)胞增多):嗜酸細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限9. Basophilia(嗜堿細(xì)胞增多):嗜堿細(xì)胞的數(shù)值或百分比高于設(shè)定的上限,紅細(xì)胞懷疑性旗標(biāo),1. NRBCs (有核紅細(xì)胞)2. Dimorphic RBC Pop (紅細(xì)胞雙峰)3. Micro RBCs/RBC Fragments (小紅細(xì)胞/紅細(xì)胞碎片
30、)4. RBC Agglutination (紅細(xì)胞聚集),紅細(xì)胞限定性旗標(biāo)(I),1. Anemia(貧血):紅細(xì)胞數(shù)值或血紅蛋白量低于設(shè)定的下限2. 1+ Anisocytosis(紅細(xì)胞大小不一):RDW高于設(shè)定的上限 2+ Anisocytosis(紅細(xì)胞大小不一):程度高于1+ 3+ Anisocytosis(紅細(xì)胞大小不一):程度高于2+3. 1+ Microcytosis(小紅細(xì)胞癥):MCV低于
31、設(shè)定的下限 2+ Microcytosis(小紅細(xì)胞癥):程度高于1+ 3+ Microcytosis(小紅細(xì)胞癥):程度高于2+,紅細(xì)胞限定性旗標(biāo)(II),4. 1+ Macrocytosis(大紅細(xì)胞癥):MCV高于設(shè)定的上限 2+ Macrocytosis(大紅細(xì)胞癥):程度高于1+ 3+ Macrocytosis(大紅細(xì)胞癥):程度高于2+5. 1+ Hypochromia(血紅蛋白含量降
32、低):MCH低于設(shè)定的下限 2+ Hypochromia(血紅蛋白含量降低):程度高于1+ 3+ Hypochromia(血紅蛋白含量降低):程度高于2+,紅細(xì)胞限定性旗標(biāo)(III),6. 1+ Poikilocytosis(紅細(xì)胞畸形):RDW高于上限而MCH低于下限 2+ Poikilocytosis(紅細(xì)胞畸形):程度高于1+ 3+ Poikilocytosis(紅細(xì)胞畸形):程度高于2+7.
33、 Erythrocytosis(紅細(xì)胞增多癥):紅細(xì)胞數(shù)值高于設(shè)定的上限8. Pancytopenia(全血細(xì)胞下降):白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板數(shù)值都下降,血小板懷疑性旗標(biāo),1. Platelet Clumps (血小板聚集) 2. Giant Platelets (巨大血小板),血小板限定性旗標(biāo),1. Thrombocytopenia(血小板減少癥):血小板數(shù)值低于下限2. Thrombocytosis(血小板增多癥):血小板數(shù)值
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