神經(jīng)氨酸酶

1、(2)神經(jīng)氨酸酶 (NA)是4聚體糖蛋白，呈蘑菇狀，頭部含有活性中心和四個(gè)抗原位點(diǎn)。 HA的抗原性也很不穩(wěn)定，易發(fā)生變異。 NA與HA一起是甲型流感病毒分亞型的主要依據(jù)。,NA的主要功能有： ①參與病毒釋放 NA可水解受染細(xì)胞表面糖蛋白末端的N-乙酰神經(jīng)氨酸，使成熟病毒體自細(xì)胞膜出芽釋放； ②促進(jìn)病毒擴(kuò)散 NA可以破壞細(xì)胞膜上病毒特異的受體，液化細(xì)胞表面的粘液，使病毒從細(xì)胞上解離，有利于病毒的擴(kuò)散,(二) 分型、命名與變

2、異 1 分型 根據(jù)NP和MP的不同，流感病毒分為甲 (A)、乙(B)、丙(C)3型。甲型流感病毒根據(jù)其表面HA和NA抗原性的不同，又分為若干亞型 2 命名 根據(jù)1980WHO公布的流感病毒的命名法命名，一個(gè)新分離的病毒株應(yīng)包括：型別/宿主/分離地點(diǎn)/病毒株/分離年代（HA、NA亞型號(hào)）,3 變異 流感病毒變異有抗原性轉(zhuǎn)變和抗原性漂移兩種變異 ① 抗原性轉(zhuǎn)變 變易幅度大,屬于質(zhì)變,即一種或兩種表面抗原結(jié)構(gòu)發(fā)生變異，形

3、成新亞型,常引起世界性的流感爆發(fā)流行 ② 抗原性漂移 變異幅度小或連續(xù)變異，屬于量變，即亞型內(nèi)變異。一般認(rèn)為這種變異是由病毒基因點(diǎn)突變和人群免疫力選擇所造成的，所引起的流行是局部中、小規(guī)模的流行,(三) 培養(yǎng)特性 流感病毒能在雞胚或培養(yǎng)細(xì)胞(人羊膜、猴腎、雞胚等細(xì)胞)中增殖，初次分離接種在羊膜腔，傳代適應(yīng)后接種在尿囊腔，但不引起明顯CPE而游離于羊水或尿囊液中，所以需用血凝試驗(yàn)確定是否存在病毒。流感病毒雖可在組織增殖，但因

4、無CPE，故可用紅細(xì)胞吸附(HAd)試驗(yàn)判定有無病毒增殖,(四) 抵抗力 流感病毒抵抗力較弱，不耐熱，56℃ 30min即可使病毒滅活。在室溫情況下傳染性很快喪失。但在0℃-4℃能存活數(shù)周，-70℃可長期保存 。病毒對干燥、日光、紫外線以及乙醚、甲醛等化學(xué)藥物也很敏感,二、致病性和免疫性 1 致病性 傳染源主要是患者，隱性感染者。主要傳播途徑是帶有流感病毒的飛沫，經(jīng)呼吸道進(jìn)入體內(nèi)。流感病毒一般只引起表面感染，不引起病毒血癥

5、。潛伏期一般為1-4d,癥狀 起病后患者有畏寒、頭痛、發(fā)熱、渾身酸痛、乏力、咳嗽等癥狀。在癥狀出現(xiàn)的1-2d內(nèi)，隨分泌物排出的病毒量較多，以后則迅速減少。無并發(fā)癥患者發(fā)病后第3-4d就開始恢復(fù)；嬰幼兒、老人和慢性病患者 (心血管疾病、慢性氣管炎和糖尿病等)易發(fā)生細(xì)菌性繼發(fā)感染 。特別是肺炎，?？梢鹚劳?2 免疫力 病后可產(chǎn)生針對HA、NA、NP、M1的特異性細(xì)胞免疫和體液免疫，但只有抗HA抗體為中和抗體。抵抗感染的發(fā)生與H

6、A抗體有關(guān)，而減輕病情和阻止病毒傳播則與抗NA抗體有關(guān)。血清抗體和局部分泌物中的sIgA具保護(hù)作用，局部sIgA 可能是防止感染的最重要因素?？贵w還能減輕病情及縮短病程，血清抗體可持續(xù)數(shù)月至數(shù)年，對同型病毒感染有牢固的免疫力,三、微生物學(xué)檢查法 流行期結(jié)合臨床癥狀診斷流感并不困難。確診則須進(jìn)行病毒學(xué)檢查或血清學(xué)反應(yīng) (一) 病毒的分離與鑒定采取發(fā)病3d內(nèi)患者的咽洗液或咽拭子接種于雞胚羊膜腔或尿囊腔中，于33-35℃孵育3-4d

7、后，收集羊水或尿囊液進(jìn)行血凝試驗(yàn)。如血凝試驗(yàn)陽性，再進(jìn)行血凝抑制(HI)試驗(yàn)，鑒定型別。也可用組織培養(yǎng)細(xì)胞 (如人胚腎或猴腎)分離病毒，用紅細(xì)胞吸附(HAd)試驗(yàn)或熒光抗體方法判定病毒增殖,(二) 血清學(xué)診斷 采取患者急性期(發(fā)病3d內(nèi)) 和恢復(fù)期(病程2-4w)雙份血清，常用HI試驗(yàn)或CF試驗(yàn)檢測抗體。如果恢復(fù)期比急性期血清抗體效價(jià)升高4倍以上，可做出診斷,(三) 快速診斷對患者進(jìn)行快速診斷 主要是采用直接檢出病毒抗原的

8、方法。例如，取患者鼻甲粘膜印片或呼吸道脫落上皮細(xì)胞涂片，再用熒光素標(biāo)記的流感病毒免疫血清進(jìn)行免疫熒光染色檢查抗原；也可用ELISA檢查患者咽漱液中的抗原 （四）用核酸雜交、PCR、或序列分析測病毒核酸進(jìn)行分型,四、防 治 原 則 流感病毒傳染性強(qiáng)，傳播快，易造成大流行。預(yù)防流感除加強(qiáng)自身體育鍛煉增強(qiáng)體質(zhì)、保持居室衛(wèi)生、流行期間避免人群聚集、公共場所要進(jìn)行必要的空氣消毒之外，接種疫苗可明顯降低發(fā)病率和減輕癥狀 無特效藥治

9、療，鹽酸金剛烷氨及其衍生物甲基金剛烷氨可用于預(yù)防甲型流感。此外，干擾素、大青葉、板藍(lán)根等也有一定療效,第二節(jié) 副粘病毒 副粘病毒科 與正粘病毒的形態(tài)及血凝作用相似，但抗原性、免疫性及致病性不同。它包括副流感病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒及腮腺炎病毒等,一、麻疹病毒 麻疹病毒 是麻疹的病原體，麻疹是兒童常見的一種急性傳染病，其傳染性很強(qiáng)，以皮疹、發(fā)熱及呼吸道癥狀為特征。我國自60年代初應(yīng)用減毒活疫苗以來，兒童的麻疹發(fā)

10、病率顯著下降。但在發(fā)展中國家它仍是兒童死亡的一個(gè)主要原因。在天花滅絕以后，WHO已將麻疹列為下一個(gè)計(jì)劃消滅的傳染病之一,一 致病性與免疫性 麻疹是由麻疹病毒感染所致。人是麻疹病毒的唯一自然儲(chǔ)存宿主 急性期患者是傳染源，患者在出疹前6d至出疹后3d有傳染性。通過飛沫傳播，也可經(jīng)用具、玩具或密切接觸傳播。麻疹傳染性極強(qiáng)，易感者接觸后全部發(fā)病,發(fā)病經(jīng)過 麻疹的潛伏期為9-12d。 病毒于呼吸道上皮細(xì)胞增殖，繼之侵入淋巴結(jié)增

11、殖，然后入血 ，形成第1次病毒血癥。病毒到達(dá)全身淋巴組織大量增殖后再次入血，形成第2次病毒血癥。此時(shí)開始發(fā)熱，繼之由于病毒在結(jié)膜、鼻咽粘膜和呼吸道、消化道粘膜、小血管等處增殖而出現(xiàn)病變 。表現(xiàn)細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞，核內(nèi)和胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體等,臨床表現(xiàn) 高熱、畏光、還有鼻炎、結(jié)膜炎、咳嗽三個(gè)主要前驅(qū)癥狀，發(fā)病2d后，口腔兩頰內(nèi)側(cè)粘膜出現(xiàn)中心灰白、周圍紅色的Koplik斑。3d后出現(xiàn)特征性皮疹，皮疹形成的原因主要是局部產(chǎn)生超敏反應(yīng)的結(jié)

12、果。一般患兒皮疹出齊24h后，體溫開始下降，呼吸道癥狀1w左右消退，皮疹變暗，有色素沉著,并發(fā)癥 有些年幼體弱的患兒，易并發(fā)細(xì)菌性感染，尤其易患細(xì)菌性肺炎，這是麻疹病兒死亡的主要原因。大約有千分之一患者發(fā)生腦脊髓炎，它是一種遲發(fā)型超敏反應(yīng)性疾病，常于病愈1w后發(fā)生，常留永久性后遺癥，病死率為15%。約有百萬分之一麻疹患兒在其恢復(fù)后若干年(多在學(xué)齡期前)出現(xiàn)亞急性硬化性全腦炎 ( SSPE)。SSPE是一種急性感染的遲發(fā)并發(fā)癥，表現(xiàn)大腦

13、機(jī)能漸進(jìn)性衰退，1-2年內(nèi)死亡。,免疫性 麻疹病后可獲得終生免疫力。感染后產(chǎn)生的H抗體和F抗體均有中和病毒作用，H抗體還能阻止病毒在細(xì)胞間擴(kuò)散。細(xì)胞免疫也有保護(hù)作用。例如，免疫球蛋白缺陷的人患麻疹能夠痊愈，并且抵抗再感染；而細(xì)胞免疫缺陷的人感染麻疹，則后果極其嚴(yán)重。這表明，細(xì)胞免疫在機(jī)體恢復(fù)中起主導(dǎo)作用。6個(gè)月內(nèi)的嬰兒因從母體獲得IgG抗體，故不易感染。故麻疹多見于6個(gè)月至5歲的嬰幼兒。此外，麻疹感染可引起暫時(shí)免疫抑制,(三)

14、微生物學(xué)檢查法 根據(jù)臨床癥狀就可診斷典型麻疹病例。對不典型病例則需做微生物學(xué)檢查以求確診。 1.病毒分離 取患者發(fā)病早期的血液、咽洗液或咽拭子 接種于人胚腎、猴腎或人羊膜細(xì)胞中培養(yǎng)。也可采取呼吸道或尿沉渣用免疫熒光法檢查抗原、觀；多核巨細(xì)胞、胞內(nèi)和核內(nèi)有嗜酸性包涵體,2.血清學(xué)診斷 取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清，抗體滴度增高4倍以上即可輔助臨床診斷 3.快速診斷法 用熒光標(biāo)記抗體檢查患者卡他期咽頭洗液中的粘膜細(xì)胞有無麻

15、疹病毒抗原 可在數(shù)小時(shí)內(nèi)獲得結(jié)果。可用PCR技術(shù)檢測SSPE腦細(xì)胞中麻疹病毒核酸，可提供診斷參考,(四) 防治原則 預(yù)防麻疹的主要措施是隔離患者，進(jìn)行人工自動(dòng)免疫，提高機(jī)體的免疫力。目前國內(nèi)外普遍實(shí)行麻疹減毒活疫苗接種，已使麻疹發(fā)病率大幅度下降。這種疫苗皮下注射，陽轉(zhuǎn)率高，副作用小，免疫力可持續(xù)3-5年。對未注射過疫苗又與麻疹患兒接觸的易感兒童，可用 麻疹恢復(fù)期病人血清、丙種球蛋白或胎盤球蛋白進(jìn)行人工被動(dòng)免疫，可預(yù)防發(fā)病或減輕癥狀

16、,二 腮腺炎病毒 流行性腮腺炎 是由腮腺炎病毒引起的，以腮腺腫脹、疼痛為主要癥狀的兒童常見病。呈世界性流行，腮腺炎病毒只有1個(gè)血清型。腮腺炎病毒分類上屬于副粘病毒科副粘病毒屬,病毒主要通過飛沫或直接接觸，兒童易感。病毒最初是于鼻或呼吸道上皮細(xì)胞中增殖，隨后發(fā)生病毒血癥，擴(kuò)散至腮腺及其他器官，如 胰腺、睪丸或卵巢、腎臟或中樞神經(jīng)系統(tǒng)。疾病的潛伏期為2-3W發(fā)熱、軟弱無力及食欲減退等。前驅(qū)期過后，接著出現(xiàn)腮腺腫大，并伴有疼痛及低熱。整

17、個(gè)病程大約7-12d。 30% 感染后無癥狀，青春期感染者，男性易合并睪丸炎 、女性易合并卵巢炎，病毒性腦炎也常見,病后免疫力持久；被動(dòng)免疫可由母體獲得，因此6個(gè)月內(nèi)嬰兒患腮腺炎者罕見。對典型病例很容易做出診斷，但不典型病例需做病毒分離或血清學(xué)診斷。預(yù)防腮腺炎應(yīng)隔離患者，減少傳播機(jī)會(huì) 可用減毒活疫苗預(yù)防，可產(chǎn)生長期免疫效果。美國已將腮腺炎病毒、麻疹病毒和風(fēng)疹病毒制成三聯(lián)疫苗。我國三聯(lián)疫苗正在研制中。無有效藥物治療。,三 副流感病毒

18、 副流感病毒 在分類上屬副粘病毒科副粘病毒屬。引起輕型流感樣癥狀的呼吸道病毒但在嬰幼兒可引起嚴(yán)重的下呼吸道感染。4個(gè)學(xué)清型1型和2型常引起哮喘，3型引起下呼吸道感染，4型一般不引起嚴(yán)重感染，1型和3型也是醫(yī)院內(nèi)感染的病原體,四 呼吸道合胞病毒 呼吸道合胞病毒 (RSV) 簡稱合胞病毒，分類上屬于副粘病毒科， 是6個(gè)月以下嬰兒患細(xì)支氣管炎和肺炎等的主要病原微生物，對較大兒童和成人可引起鼻炎、感冒等上呼吸道感染,RSV感染流行于冬季

19、和早春，傳染性較強(qiáng)，也是醫(yī)院內(nèi)交叉感染主要病原之一。RSV經(jīng)飛沫傳播，也能經(jīng)污染的手和物體表面播散。 病毒開始于鼻咽上皮細(xì)胞中增殖，不引起病毒血癥，病毒在呼吸道上皮細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞融合。嬰兒能引起嚴(yán)重的細(xì)支氣管炎和肺炎，造成死亡 病后免疫力不強(qiáng)，上未有安全有效的疫苗,病毒通過直接接觸或飛沫傳播，初次感染多發(fā)生在5歲以下，在呼吸道上皮細(xì)胞中增殖，引起病毒血癥。約有25%的病例可擴(kuò)散到下呼吸道，引起細(xì)支氣管炎和肺炎

20、。2-3%可引起嚴(yán)重的哮喘。所有嬰兒可自母體被動(dòng)獲得抗副流感病毒抗體，然而沒有保護(hù)作用；自然感染產(chǎn)生的sIgA對再感染有保護(hù)作用，但幾個(gè)月內(nèi)即消失。因此易再感染,第三節(jié)其他呼吸道病毒 一腺病毒 1953年Rowe等用手術(shù)切除的小兒扁桃體做細(xì)胞培養(yǎng)以分離出的 人腺病毒的41個(gè)血清型分為A-F 6個(gè)組。在基因治療的實(shí)驗(yàn)研究中常用腺病毒作為基因載體,（一）生物學(xué)性狀腺病毒呈球形，無包膜，含雙鏈DNA。衣殼為20

21、面體立體對稱，由252個(gè)顆粒組成，其中240個(gè)為6鄰體，12個(gè)頂角的殼粒稱為5鄰體，每個(gè)5鄰體的基底伸出一根纖維狀刺突，末端膨大成小球狀。纖突對哺乳類動(dòng)物的細(xì)胞有毒性作用。腺病毒具有血凝性，能凝集大白鼠或恒河猴的紅細(xì)胞,（二）致病性和免疫性 腺病毒經(jīng)呼吸道、消化道或眼結(jié)膜侵入人體，在扁桃體、增殖腺、腸系膜淋巴結(jié)等局部淋巴組織中增殖，不形成病毒血癥。腺病毒 主要引起3歲以下小兒急性咽炎熱和較大兒童咽結(jié)膜熱多見于爆發(fā)流行；急性呼吸道感

22、染和病毒性肺炎；濾泡性結(jié)膜炎和流行性角膜結(jié)膜炎；胃腸炎與腹瀉。其中腺病毒肺炎是我國北方兒童的一種常見病，1958年曾有過大流行。40、41、42型引起嬰兒腹瀉，又稱腸道腺病毒,A組腺病毒在體外具有轉(zhuǎn)化細(xì)胞的性質(zhì)，并能對新生地鼠致癌。但迄今尚未見在人體致癌的報(bào)告 腺病毒感染后，產(chǎn)生特異性抗體，對同型病毒的感染有保護(hù)作用，免疫力持久,（三）診斷與防治　 1 病毒分離 采取患者咽喉、眼結(jié)膜分泌物種于敏感細(xì)胞，37℃孵育后觀察CPE

23、，然后進(jìn)行鑒定 2 血清學(xué)診斷 采取患者早期和恢復(fù)期雙份血清做CF試驗(yàn)。恢復(fù)期血清抗體滴度比早期增長4倍以上有診斷意義 3 防治 目前無理想的疫苗和特效的治療方法,二 風(fēng)疹病毒 風(fēng)疹病毒在分類上屬于披膜病毒科 是風(fēng)疹的病原體，病毒為球形，核心為單股正鏈RNA，有包膜，包膜上有HA，HA能凝集鴿、鵝、雞和人O型紅細(xì)胞。風(fēng)疹病毒只有一個(gè)血清型。人是病毒的唯一宿主,病毒經(jīng)飛沫傳播，潛伏期10-21d。病毒于呼吸道和頸部淋巴結(jié)中

24、增殖后進(jìn)入血流引起病毒血癥。風(fēng)疹臨床表現(xiàn)類似麻疹，但癥狀一般較輕，先有上感癥狀及耳后和枕下淋巴結(jié)腫大，隨之出現(xiàn)淺紅色斑丘疹。皮疹先出現(xiàn)于面部后迅速波及全身。人群對風(fēng)疹普遍易感，但隱性感染較多。成仁感染癥狀較嚴(yán)重，除出疹外，還有關(guān)節(jié)痛血小板減少，出疹后腦炎等,孕婦在妊娠頭4個(gè)月內(nèi)感染風(fēng)疹病毒易發(fā)生垂直感染，導(dǎo)致胎兒畸形或先天性風(fēng)疹綜合征（CRS）。嬰兒出生后表現(xiàn)心臟畸形、白內(nèi)障及耳聾三大主征，還可表現(xiàn)出發(fā)育遲緩、肝脾腫大、血小板減少性紫癜

25、、貧血及黃疸等。CRS出現(xiàn)頻率在妊娠第1個(gè)月感染為58%、第2個(gè)月為35%、第3個(gè)月為15%、第4個(gè)月為7%,風(fēng)疹病毒自然感染后可獲得持久免疫力。孕婦血清中的抗體有保護(hù)胎兒免受風(fēng)疹病毒感染的作用。 1969年開始用減毒活疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防。常與麻疹、腮腺炎組合成三聯(lián)疫苗（MMR）使用，接種對象為育齡婦女和適齡兒童，但孕婦禁用。 目前正在研制病毒的蛋白亞單位疫苗,三 鼻病毒、冠狀病毒和呼腸病毒 1鼻病毒 分類

26、上屬小RNA病毒科，球形，為單股正鏈RNA病毒。至少有100個(gè)血清型。是引起普通感冒的病原體，50%以上的上呼吸道感染是由本病毒引起，本病具有自限性。在兒童和有慢性呼吸道疾患者，而且還引起支氣管炎和肺炎。手是最主要的傳播媒介，其次為飛末傳播。病毒經(jīng)口、鼻、眼進(jìn)入機(jī)體內(nèi)，主要在鼻煙腔中復(fù)制。早秋和晚春為發(fā)病季節(jié)。,潛伏期24-48h，引起普通感冒，臨床癥狀有流涕、鼻塞、噴嚏、頭痛、咽部疼痛和咳嗽，體溫可略有增高。一般1w左右治愈。感染后可

27、產(chǎn)生sIgA，對同型病毒有免疫力，但持續(xù)時(shí)間短。鼻病毒型別多，可反復(fù)再感染。微生物學(xué)檢查對臨床診斷意義不大,2 冠狀病毒 冠狀病毒 屬于冠狀病毒科。因病毒包膜上有向四周伸出的突起，形如花冠而得名。病毒呈多形性，核酸為單正鏈RNA，。該病毒主要感染成人或較大兒童，引起普通感冒和咽喉炎。某些冠狀病毒株可引起成人腹瀉流行。疾病的潛伏期平均3d，病程6-7d，病后免疫力不強(qiáng)， 目前尚無疫苗預(yù)防，也無特效藥物治療,3呼腸病毒 歸屬