消毒與滅菌效果監(jiān)測技術(shù)

1、,消毒與滅菌效果監(jiān)測技術(shù),四川感控中心,消毒滅菌效果監(jiān)測的重要意義 1 消毒滅菌設(shè)備存在質(zhì)量和故障等硬件問題； 2 消毒滅菌工藝存在人為操作不規(guī)范因素； 3 操作人員存在技術(shù)不熟練或責任心問題； 4 消毒藥品存在質(zhì)量問題； 5 消毒藥品多數(shù)不是純品或不穩(wěn)定性。,工藝監(jiān)測—壓力蒸汽滅菌質(zhì)量控制三查工藝檢查:檢查門框和墊圈有無損壞;門鎖扣有效;壓力表能否達零位;用水檢查排氣口有無堵塞;關(guān)門后檢查是否存在漏氣;檢查調(diào)節(jié)閥

2、零活度,壓力和溫度指示是否吻合;安全閥的有效性;輸送蒸汽壓力過高,加層溫度過高;預真空式進行B-D檢驗;把關(guān)檢查:滅菌包裝是否符合要求;滅菌包只小不能大;滅菌包擺放是否正確;裝載不過量;放常規(guī)監(jiān)測器材;滅菌后檢查:滅菌包有無損壞;有無濕包現(xiàn)象;有孔容器是否關(guān)閉;監(jiān)測指標是否合格;無菌物品存放,發(fā)放,有效期等;,壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測器材制作標準1.國際標準化組織關(guān)于《對化學指示劑標準》。2.美國藥典第二十一版：關(guān)于生物指示劑參數(shù)的

3、規(guī)定。3.中國標準化委員會制定并由國家技術(shù)監(jiān)督局頒布：國家標準（消毒效果評價方法與標準 即GB 15981—1995）。4.《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版對消毒滅菌監(jiān)測器材有專門條款規(guī)定。,壓力蒸汽滅菌效果生物監(jiān)測方法1 生物指示劑：標準抗力菌株為嗜熱脂肪桿菌（ATCC 7953或SSI K31)芽胞，制劑為商品芽孢菌片和自含式生物指示劑管。2 生物指示劑含芽孢數(shù)為5×105～ 5×106 cfu /片。3

4、生物指示劑抗力標準：在121℃飽和壓力蒸汽條件下，存活時間（ST）≥3.9min,殺滅時間（KT）≤19min,D121值1.3min～1.9min。4 抗力標定：在標準生物和化學指示劑檢測器內(nèi)進行檢測和標定。,2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》對化學指示劑規(guī)定指標 1 監(jiān)測條件規(guī)定：以標準抗力檢測器為標定儀器，以生物指示劑抗力為標準，對化學指示劑進行抗力監(jiān)測。 2 下排氣滅菌監(jiān)測121?指示卡與脈動真空滅菌監(jiān)測132 ?指示卡分別在各

5、自飽和蒸汽作用下，要求達到的符合率如下： 第1組：以121 ?飽和蒸汽作用20min，132 ?作用3min，指示色塊與標準色塊符合率為100％； 第2組：以121 ?飽和蒸汽作用10min，132 ?作用1min，指示色塊與標準色塊符合率＜20％ ；第3組：以117 ?飽和蒸汽作用20min，128 ?作用3min，指示色塊與標準色塊符合率＜20％ ；,,,,,,,,,有菌生長,,,ME-型壓力蒸汽滅菌 生物指示劑,,ME

6、-型壓力蒸汽滅菌 生物指示劑,北京四環(huán)衛(wèi)生藥械廠,,,,,,,,,,菌管結(jié)構(gòu),,,,透氣孔,管蓋外管,培養(yǎng)基管,菌片,,,,,,,自含式生物指示劑管使用方法 1 將生物指示劑管2支直接置于標準試驗包內(nèi)，放于滅菌器下層排氣口附近（規(guī)范指排氣口上方）。 2 按正常滅菌程序進行滅菌處理。 3 將試驗包取出，取出指示管， 于管尖部夾碎套管內(nèi)安瓿。 4 將其置于56℃培養(yǎng)48h。,,,,,在此部位夾碎,,嗜熱脂肪桿菌

7、芽孢菌片使用方法 1 將裝有1片菌片的小紙袋2份放于標準試驗包中心包好。 2 將試驗包放于滅菌器下層排氣口附近。 3 按正常滅菌程序進行滅菌處理。 4 取出試驗包，在100級潔凈條件下，取出菌片直接接種于裝有5～10ml溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液試管內(nèi)，同時接種1片陽性對照菌片。 5 將接種管置于56℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，若無菌生長繼續(xù)培養(yǎng)至1周。,,,,,,,,,,,,,,,,菌片紙袋,滅菌后取出菌片,接種到培養(yǎng)基,于5

8、6℃培養(yǎng)48h,,,,,,,未培養(yǎng)前 使用后擠破 培養(yǎng)有菌生長,菌片,,,,,,,,,,,,,,,,,,,生物監(jiān)測結(jié)果判斷：符合以下條件：1 所有試驗管內(nèi)培養(yǎng)液均未變色并呈透明無沉淀物；2 陽性對照管內(nèi)培養(yǎng)液變成黃色并呈混濁，為滅菌合格。 附溴甲酚紫培養(yǎng)液處方及配制方法 處方：蛋白胨 10g，葡萄糖 5g，可溶性淀粉 1g，溴甲酚紫乙醇溶液10ml，加蒸餾水至1000ml。 調(diào)節(jié)pH值7.0~7.2,分裝試管,

9、每管5~10ml,于115℃壓力蒸汽滅菌30min ,保存?zhèn)溆? 溴甲酚紫為2%,直接溶解于乙醇內(nèi)即可.,關(guān)于快速生物指示劑問題 1 快速生物指示劑是近年來國外新推出的壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測器材，希望在56℃培養(yǎng)4 h內(nèi)出結(jié)果。 2 原理是利用細菌生長過程產(chǎn)生代謝酶，再以熒光顯色，以便肉眼觀察；嗜熱脂肪桿生長過程可產(chǎn)生α-D葡萄糖酶與培養(yǎng)基中熒光素結(jié)合顯色。 3 目前該產(chǎn)品質(zhì)量尚達不到標準要求，易受一些不穩(wěn)定因素影響。某醫(yī)院用其

10、監(jiān)測脈動真空滅菌器出現(xiàn)的假陽性率達11％～44％。,Rapid Indicator,環(huán)氧乙烷和干熱滅菌效果監(jiān)測 1 監(jiān)測所用生物指示菌為枯草桿菌黑色變種芽孢。 2 用標準株（ATCC 9372）制成芽孢菌片。 3 監(jiān)測環(huán)氧乙烷抗力標準：菌片含菌量5×105～ 5×106 cfu /片。在環(huán)氧乙烷用量為600mg/L+30mg/L,相對濕度60％＋10％，54℃條件下，存活時間（ST）≥7.8min,殺滅時間（K

11、T）≤58min,D10值2.6min～5.8min。 4 監(jiān)測干熱滅菌抗力標準：菌片含菌量與上述相同；在160 ℃干熱條件下，存活時間（ST）≥3.9min,殺滅時間（KT）≤19min,D121值1.3min～1.9min。 5 商品菌片每個紙袋1片，每包50片。,,,枯草桿菌黑色變種芽孢菌片使用方法 1 環(huán)氧乙烷滅菌效果監(jiān)測： （1）將菌片連同紙包放入環(huán)氧乙烷滅菌包內(nèi)，一式2份，放在滅菌器內(nèi)適當部位；（2）按環(huán)氧乙烷滅菌程序

12、處理后，在潔凈度100級條件下，取出菌片將其接種到營養(yǎng)肉湯管內(nèi)；（3）于37℃培養(yǎng)48h。 2 干熱滅菌效果監(jiān)測： （1）將菌片連同紙包放于玻璃試管內(nèi)，分別置于上中下中央部位，在中層內(nèi)角和門把手附近各放1片；（2）按干熱滅菌要求，作用1個滅菌周期；（3）按上述方法接種和培養(yǎng)。 3 商品枯草桿菌黑色變種芽孢菌片只適合于滅菌效果監(jiān)測，不適合作定量殺菌試驗。,生物指示劑使用應注意的問題菌片包括嗜熱脂肪桿菌芽孢和枯草桿菌黑色變種芽孢（AT

13、CC 9372）。1.菌片使用及存在問題：制備培養(yǎng)基；專門技術(shù)人員負責；需要布樣、采樣、接種；技術(shù)復雜、受外界因素影響、易發(fā)生二次污染、總費用較高；計數(shù)問題，主要是不易洗下回收。2.生物指示劑管使用問題：使用方法簡單，不受外界因素影響，容易保證監(jiān)測質(zhì)量。3.培養(yǎng)溫度問題和培養(yǎng)基pH值影響問題。4 不要試圖對菌片作回收活菌計數(shù)，很困難。,營養(yǎng)瓊脂表面枯黑桿菌菌落形態(tài)及色素,營養(yǎng)瓊脂表面枯黑桿菌菌落形態(tài)及色素,,,,,,,,,,,,

14、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,枯草桿菌黑色變種繁殖體革蘭染色菌體,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,枯草桿菌黑色變種芽孢孔雀綠染色,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,枯草桿菌黑色變種芽孢孔雀綠染色,化學指示卡使用中的幾個問題 1.如何看待標準色：標準色是

15、最低合格線。 2.布放正確和足夠數(shù)量：包中心，雙標本。 3.指示卡性能測試：標準條件下標定，如在標準檢測器內(nèi)進行，達到升溫速度10秒、排氣速度5秒、溫度誤差0.5℃。 4.防潮：不直接接觸金屬和玻璃，對折放置 ，置于紗布塊中。,化學指示卡變色不達標原因分析 1.不達標準色，但均勻：可能是溫度不夠，時間不足，超熱蒸汽，其他工藝問題（參閱生物指示劑的分析結(jié)果）。 2.不達標準色，但變色不均勻：帶花白點，背面有濕印，

16、可能為指示卡提前受潮。 原因：器械的冷凝水；蒸汽含水量過高，如蒸汽源壓力低、輸送管道長、管道漏氣；預熱不夠，進蒸汽時冷凝水；送氣管道內(nèi)水未排除；干燥時間不足。,,,,,,,指示卡背面,,指示卡正面,,標準色塊,指示色塊,,指示色塊水濕印,,,,,,,,,,,,,,,,,,20(mg5010030050010001500,0.0020.0050.0100.0300.0500.1000.150,,,,,,,,

17、,,,,,,,,2：試紙偶爾有紙張厚薄不均造成有里外之分，浸上消毒液后顯出兩面顏色深淺不一，此時依顏色深的一面為準。另有時標準色印制出現(xiàn)誤差，造成讀值偏差，發(fā)現(xiàn)時請與生產(chǎn)廠聯(lián)系解決。,,,,,Mg/L,（％）,注意：1：該試紙不適用于二氧化氯、臭氧、過氧化氫和萬福金安消毒劑監(jiān)測。,G-1型消毒劑濃度試紙,戊二醛測試卡檢測范圍及顯色情況 卡標號 測試范圍 顯色情況

18、3983M1.5% 1.5%～2.0% 1.5%可不顯色或顯色不均勻 達到2.0%時方可正常顯色 3987M1.8% 1.8%～2.3% 1.8%可不顯色或顯色不均勻 達到2.3%時方可正常顯色 3989M1.

19、8% 2.1%～2.6% 2.1%可不顯色或顯色不均勻 達到2.6%時方可正常顯色,,,,戊二醛化學指示卡變色情況,,,,,Comply3987 M1.8%,正常未用指示卡,監(jiān)測變色不均勻,監(jiān)測變色均勻合格,,,Comply3987M1.8%,Comply3987M1.8%,,,化學測試卡使用時注意事項 1.化學指示卡只是