鏈酶親和素

1、鏈霉親和素商品化應(yīng)用簡介鏈霉親和素商品化應(yīng)用簡介一、鏈霉親和素性質(zhì)鏈霉親和素（streptavidin，SA）是由鏈霉菌streptomycesavidinii分泌的一種蛋白質(zhì)，分子量為65kD。鏈霉親和素分子由4條相同的肽鏈組成，其氨基酸組成中，甘氨酸和丙氨酸的含量較大，而且結(jié)合生物素的活性基團也是肽鏈中的色氨酸殘基；鏈霉親和素是一種稍偏酸性（pH6.0）的蛋白質(zhì)，并且不帶任何糖基。鏈霉親和素分子中每條肽鏈都能結(jié)合一個生物素，因此與親

2、和素一樣，一個鏈霉親和素分子也能結(jié)合4個生物素分子，二者親和常數(shù)（K）亦為1015L／mol。在蛋白水解酶作用下，鏈霉親和素可在N端10～12和Ｃ端1921間斷裂，形成的核心鏈霉親和素仍然保持完整的結(jié)合生物素的能力。鏈霉親和素的活性單位也是以結(jié)合1μg生物素所需的量來表示，１mg鏈霉親和素的最高活性可達18U。二、親和素和鏈霉親和素的比較相同點1、生物素結(jié)合能力：AV：13~15U，SA：14~18U2、活性中心依賴于色氨酸懶氨酸：親和

3、素在氨基酸序列的7070和110111兩個位點有色氨酸懶氨酸，鏈霉親和素在氨基酸序列的7980和120121兩個位點含有色氨酸懶氨酸。不同點：1、分子量：AV=66KDSA=54KD2、等電點：AV=10.5SA=6.0AV帶正電較多，非特異性結(jié)合較強。3、位阻效應(yīng)：SA的生物素結(jié)合位點較AV深，位阻效應(yīng)較強，長臂生物素更適合。4、生物素的結(jié)合：AV隨機結(jié)合，SA協(xié)同結(jié)合。5、氨基酸序列：AV含二硫鍵和10%糖，SA含甘氨酸丙氨酸較多，

4、無糖和二硫鍵。三、鏈霉親和素在ELISA中的應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzymelinkedimmunosbentassay，ELISA）可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體，②酶標(biāo)記的抗原或抗體，③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。生物素－鏈霉親和素系統(tǒng)在ELISA中的應(yīng)用有多種形式，1、用于間接包被：可以在固相上先預(yù)包被鏈霉親

5、和素，原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合，通過鏈霉親和素－生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗原間接包被。這種包被法主要有以下優(yōu)點：①增加吸附的抗體或抗原量，而且使其結(jié)合點充分暴露。3.用于臨床自身免疫病的多種自身抗體熒光檢查，如：抗核抗體，抗心肌酶抗體.4.白細(xì)胞分型抗原的免疫熒光染色。5.用于細(xì)菌、病毒、梅毒螺旋體、鉤端螺旋體等微生物的抗原及抗體檢測。主要性能：0.3ml或根據(jù)試驗需求的各種包裝，并提供濃縮液或凍干粉，含有0.0

6、1%NaN3防腐劑。鏈霉親和素含量在1mg1ml左右.FITC為Sigma異構(gòu)體I約在7080ugml495nm為最大吸收峰，激發(fā)波長525nm.工作濃度：用0.01mollpH7.4PBS作1：20–1：50稀釋使用。保存：20℃可保存一年，避免反復(fù)凍融。②辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素產(chǎn)品類別詳細(xì)說明產(chǎn)品編號英文名稱StreptavidinHRP中文名稱辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素生產(chǎn)產(chǎn)地產(chǎn)品類別二抗（標(biāo)記化合物）克隆號產(chǎn)品價格產(chǎn)品標(biāo)