黑豆與黃豆大豆甙元的 hplc 測定方法研究

1、黑豆與黃豆大豆甙元的HPLC測定方法研究摘要：采用高效液相色譜法（HPLC），能夠快速、有效建立檢測黑豆、黃豆的大豆甙元成分的檢測方法。結(jié)果：HPLC法可以有效的分理出黑豆以及黃豆的大豆甙元，在色譜條件等不變的情況下，甲醇：水：乙酸=42：57：1的流動對于分離兩者的效果都較好，獲得的圖譜十分清晰，測定的成分峰形以及保留時間較為滿意。HPLC法能夠同時檢測出黃豆和黑豆提取物異黃酮中的大豆甙元含量，方法簡單、快速，精密度高且重現(xiàn)性能好。關(guān)

2、鍵詞：大豆甙元HPLC黑豆與黃豆大豆甙元又名大豆素；黃豆苷元；大豆黃酮；4，7二羥基異黃酮大豆甙元隸屬于黃酮類化合物，是異黃酮的一種，也是植物雌激素的一種。它可以從植物中提取，具有雌激素功能，是非甾類化合物[1]。研究表明大豆甙元不溶于水，呈固態(tài)，應(yīng)用高效的檢測方法是研發(fā)大豆甙元的技術(shù)基礎(chǔ)，高效液相色譜法（HPLC）作為一種先進的檢測技術(shù)，就能夠十分有效的檢測出大豆甙元。1、材料與方法1.1黑豆、黃豆樣品選取小黑豆，吉林32、吉林35；

3、吉黃豆1號，吉黃豆2號，平安8、吉林47、GR8836，隨機挑選60粒種子均勻粉碎，40日后稱取100mg的粉樣，加入4ml80%甲醇，常溫下靜置2.5h，80℃水浴14小時，對12000g的物質(zhì)離心15min，對預(yù)處理液用濾膜進行過濾，1.5.2大豆甙元活性成分檢測精密稱取大豆及黑豆乙醇提取物1.5g，加30ml80%的乙醇，離心20min，微孔濾膜過濾，制備供測樣品液。以標準樣品溶液的分離測定方法進行研究分析，計算樣品中大豆甙元的含

4、量。2、結(jié)果2.1流動相選擇結(jié)果分別選取A甲醇：0.4%磷酸=55：45；B含5%乙酸和25%甲醇水溶液；C甲醇：水：乙酸=42：57：1；D0.05%磷酸和乙睛梯度洗脫。4種流動相進行分離檢測出的黃豆、黑豆醇提取物中的大豆大豆甙元，詳細結(jié)果見表1。結(jié)果表明在色譜條件等不變的情況下，甲醇：水：乙酸=42：57：1的流動對于分離兩者的效果都較好，各個組分的分離度都不錯，所以確定甲醇：水：乙酸=42：57：1為流動相進行的樣品分析。2.2標

5、準曲線的線性關(guān)系分析色譜條件同樣不便，精密吸取10ul不同濃度的標準對照品液，測定大豆甙元的吸收峰面積，測定結(jié)果見表2.將吸收峰面積作為Y軸和組分濃度作為X軸進行線性回歸分析，得到的黃豆大豆甙元和黑豆大豆甙元回歸方程分別為：Y=2.49107X6.8105r=0.894039765；Y=2.55107X7.5105r=0.995034708.線性范圍分別是，黃豆大豆甙元0ugmL～350ugmL、0ugmL～270ugmL.3、討論本組