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文檔簡介
1、黑豆與黃豆大豆甙元的HPLC測定方法研究摘要:采用高效液相色譜法(HPLC),能夠快速、有效建立檢測黑豆、黃豆的大豆甙元成分的檢測方法。結(jié)果:HPLC法可以有效的分理出黑豆以及黃豆的大豆甙元,在色譜條件等不變的情況下,甲醇:水:乙酸=42:57:1的流動對于分離兩者的效果都較好,獲得的圖譜十分清晰,測定的成分峰形以及保留時間較為滿意。HPLC法能夠同時檢測出黃豆和黑豆提取物異黃酮中的大豆甙元含量,方法簡單、快速,精密度高且重現(xiàn)性能好。關(guān)
2、鍵詞:大豆甙元HPLC黑豆與黃豆大豆甙元又名大豆素;黃豆苷元;大豆黃酮;4,7二羥基異黃酮大豆甙元隸屬于黃酮類化合物,是異黃酮的一種,也是植物雌激素的一種。它可以從植物中提取,具有雌激素功能,是非甾類化合物[1]。研究表明大豆甙元不溶于水,呈固態(tài),應(yīng)用高效的檢測方法是研發(fā)大豆甙元的技術(shù)基礎(chǔ),高效液相色譜法(HPLC)作為一種先進的檢測技術(shù),就能夠十分有效的檢測出大豆甙元。1、材料與方法1.1黑豆、黃豆樣品選取小黑豆,吉林32、吉林35;
3、吉黃豆1號,吉黃豆2號,平安8、吉林47、GR8836,隨機挑選60粒種子均勻粉碎,40日后稱取100mg的粉樣,加入4ml80%甲醇,常溫下靜置2.5h,80℃水浴14小時,對12000g的物質(zhì)離心15min,對預(yù)處理液用濾膜進行過濾,1.5.2大豆甙元活性成分檢測精密稱取大豆及黑豆乙醇提取物1.5g,加30ml80%的乙醇,離心20min,微孔濾膜過濾,制備供測樣品液。以標準樣品溶液的分離測定方法進行研究分析,計算樣品中大豆甙元的含
4、量。2、結(jié)果2.1流動相選擇結(jié)果分別選取A甲醇:0.4%磷酸=55:45;B含5%乙酸和25%甲醇水溶液;C甲醇:水:乙酸=42:57:1;D0.05%磷酸和乙睛梯度洗脫。4種流動相進行分離檢測出的黃豆、黑豆醇提取物中的大豆大豆甙元,詳細結(jié)果見表1。結(jié)果表明在色譜條件等不變的情況下,甲醇:水:乙酸=42:57:1的流動對于分離兩者的效果都較好,各個組分的分離度都不錯,所以確定甲醇:水:乙酸=42:57:1為流動相進行的樣品分析。2.2標
5、準曲線的線性關(guān)系分析色譜條件同樣不便,精密吸取10ul不同濃度的標準對照品液,測定大豆甙元的吸收峰面積,測定結(jié)果見表2.將吸收峰面積作為Y軸和組分濃度作為X軸進行線性回歸分析,得到的黃豆大豆甙元和黑豆大豆甙元回歸方程分別為:Y=2.49107X6.8105r=0.894039765;Y=2.55107X7.5105r=0.995034708.線性范圍分別是,黃豆大豆甙元0ugmL~350ugmL、0ugmL~270ugmL.3、討論本組
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