2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體

1、2.2.2 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體,植物體細(xì)胞雜交,融合的原生質(zhì)體AB,,再生出細(xì)胞壁,雜種細(xì)胞AB,人工誘導(dǎo),動物細(xì)胞融合,動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。,融合后形成的具有兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。,2.過程：,滅活的病毒（喪失感染性、保留抗原結(jié)構(gòu)）,原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重

2、新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。,3、動物細(xì)胞融合基本原理：,細(xì)胞膜的流動性,4、誘導(dǎo)方式,,物理法：,化學(xué)法：,生物法：,滅活的病毒,電激、振動、離心,聚乙二醇（PEG）,例如：仙臺病毒,5、實現(xiàn)動物細(xì)胞融合有什么意義呢？,打破生殖隔離，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能；重要用途：制備單克隆抗體。,6、植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較,克服遠(yuǎn)源雜交不親和，獲得雜交植株,細(xì)胞膜的流動性,細(xì)胞膜的流動性,去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,使細(xì)胞分散

3、后誘導(dǎo)細(xì)胞融合,物理（離心、振蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）,物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒,,,單克隆抗體,傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么？,1．動物在免疫反應(yīng)過程中，體內(nèi)產(chǎn)生特異性抗體種類可達(dá)百萬種以上，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用?！?．但每一個Ｂ淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體?！　?、在體外，一個Ｂ淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的。,產(chǎn)量低、純度低；而且制備抗體特異性差。,信息：,那么，如何大量獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異

4、性強(qiáng)的抗體？,一個B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞,,雜種細(xì)胞,,動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),1、設(shè)計方案：,動物細(xì)胞融合,創(chuàng)始人：米爾斯坦,單克隆抗體,（既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖）,,2、單克隆抗體（概念）,由單個B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克隆），形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。,,動物細(xì)胞融合技術(shù),B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤,只有雜種細(xì)胞才能活,動物細(xì)胞培養(yǎng),3.單克隆

5、抗體制備過程,獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞,4、單克隆抗體的特點和應(yīng)用,與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體純度高，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。,特點：,5 應(yīng)用：,單克隆抗體技術(shù)在生物工程中占有重要的地位，至今，全球已經(jīng)報道的單克隆抗體達(dá)十萬多種，用于診斷治療的達(dá)五百多種。主要的應(yīng)用有：,１ 可用于作為診斷試劑：有準(zhǔn)確，高效，快速的優(yōu)點?？捎糜诩膊≈委?就目前的臨床實驗來看，單克隆抗體主要用于癌癥治療，也有少量的用于其他疾病的

6、治療。3 可用于運(yùn)載藥物（作為運(yùn)載對應(yīng)疾病的藥物的 “生物導(dǎo)彈“。）　　　“生物導(dǎo)彈”＝單克隆抗體＋藥物（放射性同位素，化學(xué)藥物，細(xì)胞毒素）,1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓疤細(xì)胞融合的是（ ） 　A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B.沒經(jīng)過免疫的

7、T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細(xì)胞,A,,2.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成雜種細(xì)胞,D,3. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合 B.由小鼠一個B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成