2015版藥典二部附錄

1、《中國藥典》,2015年版主要增修訂內(nèi)容匯編（四部）,本版藥典對各部藥典共性附錄進行整合，將原附錄更名為通則，包括制劑通則、檢定方法、標準物質(zhì)、試液試藥和指導(dǎo)原則。重新建立規(guī)范的編碼體系，并將藥典通則、藥用輔料單獨作為《中國藥典》四部。 本匯編提供《中國藥典》四部增修訂有關(guān)內(nèi)容包括制劑通則38個，檢定方法114個、藥用輔料修訂該品種97個、指導(dǎo)原則29個。,0502 薄層色譜法,定義：薄層色譜法系將供試品溶液點于薄層板上，

2、在展開容器內(nèi)用展開劑展開，使供試品所含成分分離，所得色譜圖與適宜的對照標準物質(zhì)按同法所得的色譜圖對比，亦可用薄層色譜掃描儀進行掃描，用于鑒別、檢查或含量測定。,將一部二部中對照物修訂為對照標準物質(zhì),,市售薄層板---補充分類信息 市售薄層板按固定相種類分為硅膠薄層板、聚酰胺薄層板、氧化鋁薄層板等；按固定相粒徑大小分為普通薄層板板（10~40um）和高效薄層板（5~10um）；按硅膠板是否含有熒光劑分為硅膠G板和硅膠GF254板。

3、基本同一部，刪除二部顯色劑部分。點樣------基本同一部，點樣點由直徑一般不大于4mm（原為3mm）。,0512高效液相色譜法,高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動相泵入裝有填充劑的色譜柱，對供試品進行分離測定的色譜方法。注入的物質(zhì)（原為供試品），由流動相帶入色譜柱（原為柱內(nèi)）中，組分在柱內(nèi)分離，并進入檢測器檢測，由積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和處理色譜信號。,對儀器的一般要求和色譜條件： 高效液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣器

4、、色譜柱、檢測器、積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。色譜柱內(nèi)徑一般為3.9~4.6nm，填充劑粒徑為3~10um。超高效液相色譜儀是適應(yīng)小內(nèi)經(jīng)（約2mm或更?。┥V柱與小粒徑（約2um）填充劑的耐超高壓、小進樣量、低死體積、高靈敏度檢測的高效液相色譜儀。,溫度會影響分離效果，品種正文中未指明色譜柱溫度時系指室溫，應(yīng)注意室溫變化的影響。為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的溫度，但還不宜超過60℃。品種正文項下規(guī)定的條件除填充劑類型、流動相組分、檢測

5、器類型不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑與長度、填充劑粒徑、流動相流速、流動相組分比例、柱溫、進樣量、檢測器靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以達到系統(tǒng)適用性的要求。,調(diào)整流動相組分比例時，當(dāng)小比例組分的百分比例X小于等于33%時，允許改變范圍為0.7X~1.3X; 當(dāng)X大于33%時，允許改變范圍為X-10~X+10。當(dāng)必須使用特定牌號的色譜柱方能滿足分離要求時，可在該品種正文項下注明。色譜系統(tǒng)的適用性試驗通常包括理論板數(shù)、分離度、靈敏度（新增）

6、、拖尾因子和重復(fù)性等五個參數(shù)。,0541 電泳法,電泳是指溶解或懸浮于電解液中的帶電荷的蛋白質(zhì)、膠體、大分子或其他粒子，在電流作用下向其自身所帶電荷相反的電極方向遷移。電泳法是指利用溶液中帶有不同量電荷的陽離子或陰離子，在外加電場中使供試品組分以不同的遷移速度向?qū)?yīng)的電極移動，實現(xiàn)分離并通過適宜的檢測方法記錄或計算，達到測定目的的分析方法。電泳法一般可分為兩大類：一類為自由溶液電泳或移動界面電泳，另一類為區(qū)帶電泳。,第一法：紙電泳法

7、,濾紙：取色譜紙置1mol/l甲酸溶液中浸泡不少于12小時（原為浸泡過夜），取出，用水漂洗至洗液的PH值不低于4，置60℃烘箱烘干，備用。第二法：醋酸纖維素薄膜電泳法第三法：瓊脂糖凝膠電泳法（適用于檢測DNA,PCR反應(yīng)中的電泳檢測）,第四法：聚丙烯酰胺凝膠電泳法,定義：聚丙烯酰胺凝膠電泳法以聚丙烯酰胺凝膠為支持介質(zhì)。聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺單體和少量的交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺，在催化劑作用下聚合交聯(lián)而成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠。單體的濃

8、度或單體與交聯(lián)劑比例的不同，其凝膠孔徑就不同。,使用聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)進行電泳，生物大分子保持天然狀態(tài)，其遷移速率不僅取決于電荷密度，還取決于分子大小和形狀，可以用來研究生物大分子的特性，如電荷、分子量、等電點等。根據(jù)儀器裝置的不同分為水平平板電泳、垂直平板電泳和盤狀電泳，根據(jù)制膠方式的不同又分為連續(xù)電泳和不連續(xù)電泳。,第五法：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法,電泳： 垂直電泳：恒壓電泳，初始電壓為80v，進入分離膠時調(diào)至150~2

9、00v，當(dāng)溴酚藍遷移至膠底處，停止電泳?；蚝懔麟娪荆院懔?0mA條件下開始電泳，至供試品溶液進入分離膠后將電流調(diào)至20mA，直至電泳結(jié)束。圓盤電泳：調(diào)節(jié)電流使每管8mA。,第六法：等電聚焦電泳法,方法1-----垂直板電泳 供試品溶液制備：將供試品對水透析（或用其他方法）脫鹽后，與供試品緩沖液按3:1體積比混勻。供試品溶液最終濃度應(yīng)不低于0.5mg/ml或按照品種項下的方法制備。方法2-----水平板電泳 供試品

10、溶液的制備：將供試品對水透析（或用其他方法）脫鹽，并使蛋白質(zhì)或多肽含量調(diào)節(jié)在每0.5~5mg/ml范圍或按照各品種項下的方法制備。,0612熔點測定法,第一法 測定易粉碎的固體藥品（在原有基上新增一個方法） B.電熱塊空氣加熱法 ：本法是采用自動熔點儀的熔點測定法。自動熔點儀有兩種測光方式：透射光方式和反射光方式。大部分自動熔點儀可置多根毛細管同時測定。分取經(jīng)干燥處理（同第一法）的供試品適量，置熔點測定用毛細管中（同第一

11、法）；將自動熔點儀加熱塊加熱至較規(guī)定的熔點低限約10℃時，將裝有供試品的毛細管插入加熱塊中，繼續(xù)加熱，調(diào)節(jié)升溫速率為每分鐘上升1.0~1.5 ℃，重復(fù)測定3次，取其平均值，即得。,,測定熔融同時分解的供試品時，方法如上述，但調(diào)節(jié)升溫速率使每分鐘上升2.5~3.0 ℃。遇有色粉末、熔融同時分解、固相消失不明顯且生成分解物導(dǎo)致體積膨脹、或含結(jié)晶水（或結(jié)晶溶劑）的供試品時，可適當(dāng)調(diào)整儀器參數(shù)，提高判斷熔點變化的準確性。當(dāng)透射和反射測光方式受干

12、擾明顯時，可允許目視觀察熔點變化；通過攝像系統(tǒng)記錄熔化過程并進行追溯評估，必要時，測定結(jié)果的準確性需經(jīng)第一法驗證。若對本法持有異議，應(yīng)以第一法測定結(jié)果為準。,0731 蛋白質(zhì)含量測定,二部為底稿，結(jié)合三部內(nèi)容整合修訂。對照品溶液制備：除另有規(guī)定外，取血清白蛋白（牛）對照品或蛋白含量測定國家標準品，加水溶解并制成每1ml中含0.2mg的溶液。（2015版藥典內(nèi)容與2010版藥典二部中相同，2010版藥典三部中標準蛋白質(zhì)溶液的制備中標準

13、蛋白質(zhì)溶液的濃度為每1ml含100ug）,測定法：精密量取對照品溶液0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml（對照品溶液取用量可在本法測定范圍內(nèi)進行適當(dāng)調(diào)整），分別置具塞試管中，各加水至1.0ml，在分別加入堿性銅試液1.0ml，搖勻，室溫放置10min，個各加入福林酚試液【取福林試液中的貯備液（2mol/L酸濃度）1 → 16】4.0ml，立即混勻，室溫放置30min，照紫外—可見分光光度法（通則0401

14、），在650nm的波長處測定吸光度；同時以0號管作為空白。,以對照品溶液濃度與其相對應(yīng)的吸光度計算線性回歸方程。另精密量取供試品溶液適量，同法測定。從線性回歸方程計算供試品溶液中的蛋白質(zhì)濃度，并乘以稀釋倍數(shù)，即得。,0901溶液顏色檢查法,第一法（規(guī)范描述）除另有規(guī)定外，取各品種項下規(guī)定量的供試品，加水溶解，置于25ml的納氏比色管中，加水稀釋至10ml。另取規(guī)定色調(diào)和色號的標準比色液10ml，置于另一25ml納氏比色管中，兩管同置白色

15、背景上，自上向下透視，或同置白色背景前，平視觀察，供試品管呈現(xiàn)的顏色與對照管比較，不得更深。如供試品管呈現(xiàn)的顏色與對照管的顏色深淺非常接近或色調(diào)不完全一致，使目視觀察無法辨別兩者的深淺時，應(yīng)改用第三法（色差計法）測定，并將其測定結(jié)果作為判定依據(jù)。,各種色調(diào)色號標準比色液的制備-新增0.5號色調(diào)標準比色液,品種項下規(guī)定的“無色”：系指供試品溶液與水或所用溶劑的顏色相同；“幾乎無色”：系指供試品溶液的顏色不深于相應(yīng)色調(diào)0.5號標準比色液

16、?！驹x為淺于用水稀釋1倍后的相應(yīng)色調(diào)1號標準比色液】,0902 澄清度檢查法,第一法：目視法 除另有規(guī)定外，按各品種項下規(guī)定的濃度要求，在室溫條件下將用水稀釋至一定濃度的供試品溶液與等量的濁度標準液分別置于配對的比濁用玻璃管（內(nèi)徑15~16mm，平底，具塞，以無色、透明、中性硬質(zhì)玻璃制成）中，在濁度標準液制備5min后，在暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下，照度為1000lx，從水平方向觀察、比較，除另有規(guī)定外，供試品溶解后應(yīng)立即檢視

17、。 第一法無法準確判定兩者的澄清度差異時，改用第二法進行測定并以其測定結(jié)果進行判斷。,第二法：濁度儀法【新增】本法采用散射光式濁度儀，適用于低、中濁度無色供試品溶液的濁度測定（濁度值為100NTU以下的供試品）。因為高濁度的供試品會造成多次散射現(xiàn)象，使散射光強度迅速下降，導(dǎo)致散射光強度不能正確反映供試品的濁度值。0.5號至4號濁度標準液的濁度值范圍約為0~40NTU。,采用散射光式濁度儀測定時，入射光和測定的散射光呈90度夾角

18、，入射光強度和散射光強度關(guān)系式為Ⅰ =K’ T Ⅰ0；式中Ⅰ為散射光強度，單位為cd； Ⅰ0為入射光強度，單位為cd；K’為散射系數(shù)；T為供試品溶液的濁度值，單位為NTU.,系統(tǒng)的適用性試驗：儀器應(yīng)定期（一般每月一次）對濁度標準液的線性和重復(fù)性進行考察，采用0.5號至4號濁度標準液進行濁度值測定，濁度標準液的測定結(jié)果（單位NTU）與濃度間應(yīng)呈線性關(guān)系，線性方程的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.999；取0.5號至4號濁度標準液，重復(fù)測定5次

19、，0.5號和1號濁度標準液測量濁度值的相對標準偏差應(yīng)不大于5%，2~4號濁度標準液測量濁度值的相對標準偏差不大于2%。,測定法：按儀器說明書要求采用規(guī)定的濁度液進行儀器校正。溶液劑直接取樣測定；原料藥或其他劑型按照個論項下標準規(guī)定制備標準供試品溶液，臨用時制備。分別取供試品溶液和相應(yīng)濁度標準液進行測定，測定前應(yīng)搖勻，避免產(chǎn)生氣泡，讀取濁度值。供試品溶液濁度值不得大于相應(yīng)濁度標準液的濁度值。,0904可見異物檢查法,一二三部整合結(jié)果判定

20、：供試品中不得檢出金屬屑、玻璃屑、長度超過2mm的纖維、最大粒徑超過2mm的塊狀物以及靜置一定時間后輕輕旋轉(zhuǎn)時肉眼可見的煙霧狀微粒沉積物、無法計數(shù)的微粒群或搖不散的沉淀，以及在規(guī)定時間內(nèi)較難計數(shù)的蛋白質(zhì)絮狀物等明顯可見異物。,0921 崩解時限檢查法-整合,檢查法：將吊籃通過上端的不銹鋼軸懸掛于金屬支架上，浸入1000ml燒杯中，并調(diào)節(jié)吊籃位置使其下降至低點時篩網(wǎng)距燒杯底部25mm，燒杯內(nèi)盛有溫度為37℃±1 ℃的水，調(diào)節(jié)水位

21、高度使吊籃上升至高點使篩網(wǎng)在水面下15mm處，吊籃頂部不可浸沒于溶液中。,0931溶出度與釋放度測定法,將二部中溶出度測定法和釋放度測定法整合為一個方法，增加部分裝置圖。定義：溶出度系指活性藥物從片劑、膠囊劑或顆粒劑等普通制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度，在緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等制劑中也稱釋放度。,0941含量均勻度檢查法,除另有規(guī)定外，片劑、硬膠囊劑、顆粒劑或散劑等，每一個單劑標示量小于25mg或主藥含量小于每一個

22、單劑重量25%者；藥物間或藥物與輔料間采用混粉工藝制成的注射用無菌粉末；內(nèi)充非均相溶液的軟膠囊；單劑量包裝的口服混懸劑、透皮貼劑和栓劑等制劑通則項下規(guī)定含量均勻度應(yīng)符合要求的制劑，均應(yīng)檢查含量均勻度。,復(fù)方制劑僅檢查符合上述條件的組分，多種維生素或微量元素一般不檢查含量均勻度。凡檢查含量均勻度的制劑，一般不再檢查重（裝）量差異；當(dāng)全部主成分均進行含量均勻度檢查時，復(fù)方制劑一般亦不再檢查重（裝）量差異。,除另有規(guī)定外，取供試品10個，照

23、各品種項下規(guī)定的方法，分別測定每一個單劑以標示量為100的相對含量Xi，求其均值 和標準差以及標示量與均值之差的絕對值A(chǔ)(A=|100- |)若A+2.2S≤L,(原為A+1.80S)則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若A+S>L,則不符合規(guī)定；若A+2.2S>L,且A+SL ≤L,則應(yīng)另取供試品20個復(fù)試。,根據(jù)初復(fù)試結(jié)果，計算30個單劑的均值X、標準差S和標示量與均值之差的絕對值A(chǔ)，再按下述公式計算并判定。當(dāng)

24、A ≤0.25L時，若A2+S2 ≤0.25L2，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若A2+S2 >0.25L2則不符合規(guī)定。若A>0.25L時，若A+1.7S ≤L,則符合規(guī)定； 若A+1.7S >L，則不符合規(guī)定。,上述公式中L為規(guī)定值。除另有規(guī)定外，L=15.0;單劑量包裝的口服混懸劑、內(nèi)充非均相溶液的軟膠囊、膠囊型或粉霧劑、單劑量包裝的眼用、耳用、鼻用混懸劑、固體或半固體制劑L=20.0;透皮貼劑、栓劑L=

25、25.0。,當(dāng)各品種項下規(guī)定的含量均勻度的限度為±20%或其他數(shù)值時，L=20.0或其他相應(yīng)的數(shù)值。當(dāng)各品種項下含量限度規(guī)定的上下限的平均值（T）大于100.0（%）時，若XT,則A= -T.同上法計算，判定結(jié)果，即得。當(dāng)T<100.0(%)時，應(yīng)在各品種正文中規(guī)定A的計算方法。,1143 細菌內(nèi)毒素檢查法,前言（規(guī)范表述）：當(dāng)測定結(jié)果有爭議時，除另有規(guī)定外，以凝膠限度試驗結(jié)果為準。本試驗操作過程應(yīng)防止內(nèi)毒素