核輻射對(duì)實(shí)驗(yàn)紅鯽損傷的毒理學(xué)及AFLP分子標(biāo)記的研究.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)137Cs輻射在不同劑量、不同作用時(shí)間，實(shí)驗(yàn)紅鯽血液常規(guī)生化指標(biāo)變化、肝臟SOD與GSH-PX活性影響和擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（AFLP）標(biāo)記的研究，闡明核輻射對(duì)實(shí)驗(yàn)紅鯽的生化毒理效應(yīng)，探討實(shí)驗(yàn)紅鯽應(yīng)用于生態(tài)毒理學(xué)研究的可行性，建立實(shí)驗(yàn)紅鯽監(jiān)測(cè)核輻射污染的生物標(biāo)記。
　　方法：以實(shí)驗(yàn)紅鯽 C1HD系為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)，采用改進(jìn)寇氏法確定137Cs輻射對(duì)實(shí)驗(yàn)紅鯽的30d半數(shù)致死劑量（LD50）。設(shè)置1/16 LD50

2、、1/8 LD50、1/4 LD50、1/2 LD50四個(gè)不同輻射劑量，用輻照儀對(duì)實(shí)驗(yàn)紅鯽進(jìn)行輻射實(shí)驗(yàn)，采集輻射后實(shí)驗(yàn)紅鯽的血清，用血液生化分析儀作血液常規(guī)指標(biāo)生化分析；提取輻射后實(shí)驗(yàn)紅鯽的肝組織，用 SOD和GSH-PX試劑盒檢測(cè)肝臟 SOD活性和肝臟 GSH-PX活性；提取輻射后實(shí)驗(yàn)紅鯽血液 DNA，經(jīng) PCR擴(kuò)增，用6％聚丙烯酰胺凝膠電泳，檢測(cè)AFLP分子標(biāo)記，并進(jìn)行多態(tài)性信息含量(PIC)、基因雜合度(H)、香農(nóng)信息指數(shù)（I）分

3、析；用SPSS18.0、Quantity one、PopGene、Origin8.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：1.在急性毒性試驗(yàn)中，核輻射對(duì)實(shí)驗(yàn)紅鯽的半數(shù)致死劑量為：31.05 Gy。2.在不同輻射劑量和不同作用時(shí)間核輻射處理下，實(shí)驗(yàn)紅鯽血液常規(guī)生化指標(biāo)出現(xiàn)顯著的變化，呈現(xiàn)較好的劑量-時(shí)間效應(yīng)關(guān)系。3.隨著輻射劑量的增加，實(shí)驗(yàn)紅鯽肝臟 SOD和GSH-PX活性降低，時(shí)間延長(zhǎng)，活性增加，但仍低于正常值。4.實(shí)驗(yàn)紅鯽在

4、核輻射處理前的AFLP多態(tài)性信息含量(PIC)、基因雜合度(H)、香農(nóng)信息指數(shù)（I）為45.20%、0.19、0.28，經(jīng)核輻射處理后的分別為72.27%、0.28、0.41，遺傳學(xué)指數(shù)升高。
　　結(jié)論：1.核輻射對(duì)實(shí)驗(yàn)紅鯽具有毒性效應(yīng)；實(shí)驗(yàn)紅鯽核輻射的的半數(shù)致死劑量為31.05 Gy，95%可信區(qū)間為25.94~37.15 Gy。2.經(jīng)核輻射處理后，實(shí)驗(yàn)紅鯽的血液生化指標(biāo)、肝臟 SOD活性、肝臟GSH-PX活性等會(huì)發(fā)生改變，呈現(xiàn)