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1、本研究在前期實(shí)驗(yàn)室制備高 F值玉米寡肽的工藝基礎(chǔ)上做進(jìn)一步的優(yōu)化,并對(duì)制備過程中的主要副產(chǎn)物—芳香族氨基酸進(jìn)行回收研究。
實(shí)驗(yàn)利用α-淀粉酶、高壓蒸汽和超聲波三種預(yù)處理方法分別對(duì)玉米黃粉進(jìn)行預(yù)處理,并在最佳條件下進(jìn)行酶解,驗(yàn)證其預(yù)處理效果。通過實(shí)驗(yàn)獲得α-淀粉酶預(yù)處理的最佳條件:玉米黃粉經(jīng)高溫糊化,冷卻,玉米黃粉底物濃度0.13 g/mL、加酶量100 U/g、溫度65℃、pH7.00、酶解100 min。經(jīng)預(yù)處理的玉米黃粉在
2、最佳水解條件下獲得的水解度為48.14%,與未經(jīng)預(yù)處理的玉米黃粉水解度30.23%相比提高59.21%。測(cè)定經(jīng)吸附,除鹽,超濾后溶液中蛋白含量為28.70 mg/mL,高F值寡肽得率為20.13%。與原始未經(jīng)預(yù)處理的得率6.75%相比提高198.22%。
經(jīng)高壓蒸汽預(yù)處理獲得的最佳條件為:115℃、0.07 Mpa處理150 min,水解度為48.16%,與未經(jīng)預(yù)處理的玉米黃粉蛋白水解度相比提高58.12%。測(cè)定經(jīng)吸附,除鹽,
3、超濾后溶液中蛋白含量為24.20 mg/mL,高F值寡肽得率為16.97%。與原始未經(jīng)預(yù)處理的得率6.75%相比提高151.40%。
超聲預(yù)處理對(duì)玉米黃粉預(yù)處理最佳條件:玉米黃粉濃度112 g/mL、超聲功率600 W、超聲時(shí)間20 min,預(yù)處理后在最佳條件下獲得的水解度為40.12%,與水解原始玉米黃粉相比提高32.72%。測(cè)定經(jīng)吸附,除鹽,超濾后溶液中蛋白含量為24.50 mg/mL,高F值寡肽得率為17.18%。與原始
4、未經(jīng)預(yù)處理的得率6.75%相比提高154.12%。實(shí)驗(yàn)證實(shí),三種預(yù)處理方法可以有效地提高高 F值玉米寡肽的得率。且糖化預(yù)處理效果最顯著。
實(shí)驗(yàn)利用海藻酸鈉對(duì)酶解玉米黃粉的蛋白酶進(jìn)行固定化,利用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)獲得的最佳固定化條件為:氯化鈣濃度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))3.02%,海藻酸鈉(質(zhì)量分?jǐn)?shù))2.62%,pH10.01,固定時(shí)間2 h,加酶量80000 U/g,此時(shí)酶活回收率為64.37%,模型預(yù)期值為64.91%。利用固定化酶
5、對(duì)經(jīng)糖化預(yù)處理的玉米黃粉進(jìn)行循環(huán)酶解,酶解3次后玉米黃粉中殘余的蛋白質(zhì)含量為6.23%,玉米黃粉中的蛋白質(zhì)水解率達(dá)到89.91%。經(jīng)測(cè)定獲得的多肽 F值為28.40。實(shí)驗(yàn)證實(shí),利用固定化酶對(duì)玉米黃粉進(jìn)行循環(huán)酶解,可以有效地提高蛋白質(zhì)的利用率,并且成本較低,具有廣闊的發(fā)展空間。
實(shí)驗(yàn)對(duì)制備高 F值玉米寡肽過程中活性炭吸附的芳香族氨基酸進(jìn)行了解吸回收研究。通過單因素和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)獲得最佳的解吸條件:NaOH濃度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))5.42%
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