椎間孔注射臭氧治療神經(jīng)病理性痛及其對加巴噴丁的協(xié)同鎮(zhèn)痛作用.pdf

1、神經(jīng)病理性疼痛（neuropathic pain, NP）是人類最難攻克的疾病之一，屬于一種慢性疼痛，疼痛的臨床特征表現(xiàn)為自發(fā)性疼痛，痛覺過敏，異常疼痛和感覺異常。根據(jù)原發(fā)損傷和功能障礙發(fā)生的位置可以分為外周NP和中樞NP。流行病學(xué)顯示NP的患病率占人口的3.0％-8.0%，病因復(fù)雜，診斷和治療難度大，在臨床上涉及多學(xué)科的內(nèi)容，極其富有挑戰(zhàn)性。NP的治療主要包括藥物治療，介入治療和其它非藥物療法。目前，各種療法對NP的緩解有限，易耐受（

2、藥物和非藥物）、易復(fù)發(fā)，不少患者不得不再次或多次尋求治療，但收效甚微。19世紀(jì)初發(fā)現(xiàn)臭氧療法（ozone therapy）并沿用至今，但用于神經(jīng)病理性疼痛的治療很少，也缺乏基礎(chǔ)實驗資料。臭氧療法是用臭氧合成儀制造新鮮的氧氣-臭氧混合物（oxygen-ozone mixture），目前最主要用于治療椎間盤內(nèi)注射治療或預(yù)防突出和一些口腔疾病的治療，一些醫(yī)生也嘗試用于治療腰背痛，膝骨關(guān)節(jié)炎等。
　　近年，為了治療NP，廣州暨南大學(xué)附屬紅

3、十字醫(yī)院王家雙等探索臭氧療法在治療帶狀皰疹后神經(jīng)痛上的效果。臨床單中心五年的隨訪研究結(jié)果顯示在胸背受累節(jié)段椎間孔注射（Intervertebral foramen,I.V.F.）臭氧可以緩解疼痛強(qiáng)度和發(fā)作頻度，并顯著降低口服加巴噴丁（抗驚厥類藥物）的日服用量，同時顯著改善了患者的生活質(zhì)量（睡眠、日?；顒樱?。然而，由于目前缺乏相關(guān)的動物實驗研究資料，致使該治療方法無法開展多中心臨床試驗評估。根據(jù)臨床應(yīng)用的提示，為了搞清I.V.F.注射臭氧

4、是否能夠鎮(zhèn)痛，本課題首次嘗試在多種大鼠疼痛模型（神經(jīng)病理性疼痛、急慢炎癥性疼痛模型）評價I.V.F.注射臭氧的鎮(zhèn)痛療效。我們發(fā)現(xiàn)I.V.F.注射臭氧可以選擇性地緩解NP，但對正常痛閾和炎性疼痛無效。與其它四種選擇性分子靶向藥物對比，I.V.F.注射臭氧鎮(zhèn)痛時程長，藥效高，并對腹腔注射加巴噴丁有協(xié)同增效作用，提示該微創(chuàng)介入法對NP鎮(zhèn)痛效果特異、高效，可以擴(kuò)大臨床多中心評估。
　　主要研究結(jié)果如下：
　?。?）微創(chuàng) I.V.F.

5、定位注射臭氧對正常大鼠的機(jī)械和熱痛閾值無作用。在全麻下定位進(jìn)針分別抵達(dá) L4-L5椎間孔，進(jìn)入椎間孔時大鼠下肢有反射性屈曲，注射染料DiI(2.5%，5μl)，灌流取材，固定沉糖，背根神經(jīng)節(jié)（dorsal root ganglia, DRG）肉眼下被紅染，冰凍切片后鏡下觀察有廣泛性紅色熒光標(biāo)記細(xì)胞，視為定位準(zhǔn)確。然后再取SD大鼠隨機(jī)分為兩組，I.V.F.注射空氣組（n=8）和I.V.F.注射臭氧組（n=8），觀察14天正常大鼠的機(jī)械性刺

6、激縮足反應(yīng)閾值和熱刺激縮足反應(yīng)潛伏期均無顯著改變。
　　（2）微創(chuàng) I.V.F.注射臭氧與注射選擇性分子靶向藥物對神經(jīng)病理性疼痛有顯著鎮(zhèn)痛作用，但前者作用時程更長。制備坐骨神經(jīng)分支選擇損傷（spared nerve injury, SNI）模型，損傷同側(cè)機(jī)械性縮足反應(yīng)閾值下降至少6周以上，造模成功之后，實施一次I.V.F.注射臭氧（n=15）、AMD3100（基質(zhì)細(xì)胞衍化因子-1受體CXCR4的特異性拮抗劑，n=8）、A80346

7、7（選擇性 Nav1.8阻斷劑，n=8）、雷帕霉素（哺乳動物類雷帕霉素靶蛋白mTOR的抑制劑，n=8）、MGCD0103（選擇性I型組蛋白去乙?；敢种苿琻=8）。結(jié)果臭氧在注射1天之后起效，5天達(dá)到峰值，鎮(zhèn)痛效果持續(xù)10天以上，第14天恢復(fù)到對照組水平。相比較，后四種分子靶向藥物鎮(zhèn)痛時間短（最長不超過96小時）。
　?。?）微創(chuàng)I.V.F.注射臭氧對急慢性炎性疼痛均無鎮(zhèn)痛作用。分別制備蜜蜂毒（bee venom, BV,n=9

8、）模型和完全弗氏佐劑（complete Freund’s adjuvant,CFA, n=9）模型，結(jié)果顯示提前24 h給予I.V.F臭氧或造模成功后再給予I.V.F臭氧均無顯著作用。
　　（4）微創(chuàng)I.V.F.注射臭氧預(yù)處理可以增強(qiáng)腹腔注射加巴噴丁對NP的鎮(zhèn)痛療效、延長鎮(zhèn)痛時程，提示有協(xié)同作用。制備SNI模型，單獨腹腔注射加巴噴?。╪=8）在給藥后第1.5小時才有顯著的鎮(zhèn)痛效果，但在I.V.F.注射臭氧預(yù)處理第5天腹腔注射加巴噴

9、?。╪=8），第1小時鎮(zhèn)痛效果顯著，持續(xù)至第3小時，臭氧+加巴噴丁比單純加巴噴丁的鎮(zhèn)痛效果高3-4倍，支持有協(xié)同作用。
　　結(jié)論：（1）微創(chuàng) I.V.F.定向注射臭氧可以顯著緩解神經(jīng)病理性疼痛，但對炎性疼痛無效；（2）比較其它四種分子靶向藥物，微創(chuàng) I.V.F.定向注射臭氧對神經(jīng)病理性疼痛的鎮(zhèn)痛作用時程長，療效強(qiáng)；（3）微創(chuàng) I.V.F.定向注射臭氧可以協(xié)同增強(qiáng)系統(tǒng)給予加巴噴丁對神經(jīng)病理性疼痛的鎮(zhèn)痛療效，延長療效；（4）微創(chuàng) I.