CRM1抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及抗腫瘤活性評(píng)價(jià).pdf

1、CRM1(Chromosome region maintenance1)，也叫XPO1（Exportin1），它是一種真核蛋白，調(diào)控核蛋白，rRNA，snRNA和mRNA等蛋白和RNA出入細(xì)胞核。CRM1能夠轉(zhuǎn)運(yùn)大部分腫瘤抑制蛋白和原癌蛋白，其表達(dá)異常與腫瘤的發(fā)生發(fā)展以及耐藥性等密切相關(guān)。因此，CRM1已經(jīng)成為了腫瘤藥物研究的靶點(diǎn)之一。
　　目前已經(jīng)報(bào)道的大多數(shù)CRM1抑制劑都具有α，β不飽和δ內(nèi)酯環(huán)，包括天然來源的哥納香甲素、L

2、eptomycinB等化合物。本課題對(duì)α，β不飽和δ內(nèi)酯環(huán)的初步研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)酯環(huán)不飽和雙鍵的取代會(huì)使目標(biāo)化合物的抗腫瘤活性消失，而不同的側(cè)鏈對(duì)活性影響較大。因此，在本課題組前期研究的基礎(chǔ)上，以發(fā)現(xiàn)的先導(dǎo)化合物對(duì)照2和哥納香甲素的基本結(jié)構(gòu)為骨架，開展先導(dǎo)化合物的結(jié)構(gòu)優(yōu)化和構(gòu)效關(guān)系研究，發(fā)現(xiàn)新型的CRM1抑制劑。具體研究工作如下:
　　一、6-氧/氮/硫甲基-5，6-二氫-吡喃-2-酮的合成及活性研究
　　以對(duì)照2為先導(dǎo)化合物，

3、保留不飽和內(nèi)酯環(huán)，對(duì)側(cè)鏈進(jìn)行修飾，在6位引入不同的雜原子（氧、氮、硫），通過取代、開環(huán)、酯化、氧化、關(guān)環(huán)等反應(yīng)合成14個(gè)氧甲基化合物，4個(gè)氮甲基化合物，1個(gè)硫甲基化合物，1個(gè)亞砜甲基化合物，并評(píng)價(jià)了它們的抗腫瘤活性，它們的IC50值都大于或等于2.31μM。苯環(huán)上存在吸電子基團(tuán)的氧甲基化合物、氮甲基化合物、硫甲基化合物抗腫瘤活性都減弱或者消失，而其它供電子基團(tuán)的氧甲基化合物、亞砜基化合物都有良好的抗腫瘤活性。說明苯環(huán)上的吸電子基團(tuán)和6-

4、雜原子對(duì)化合物的抗腫瘤活性影響很大。
　　二、6-氮乙基-5，6-二氫-吡喃-2-酮的合成及活性研究
　　基于有較好抗腫瘤活性的6-亞砜基化合物，通過對(duì)氨基進(jìn)行酰化，研究酰胺類化合物對(duì)生物活性的影響。利用?；?、成環(huán)、硫代等反應(yīng)得到17個(gè)6-氮乙基化合物，并評(píng)價(jià)其抗腫瘤活性，發(fā)現(xiàn)它們大部分化合物抗腫瘤活性消失，說明側(cè)鏈的酰胺鍵對(duì)抗腫瘤活性影響可能很大。
　　三、候選化合物對(duì)Hela細(xì)胞周期、凋亡和CRM1蛋白表達(dá)量的影響

5、
　　CRM1在Hela細(xì)胞中高表達(dá)，因此，基于前期研究結(jié)果，選擇活性最好的化合物I11，評(píng)價(jià)其對(duì)Hela細(xì)胞凋亡率和周期分布的影響。結(jié)果表明I11在20μM濃度時(shí)可以將Hela細(xì)胞阻滯在G1期，誘導(dǎo)22.7％細(xì)胞凋亡。并且通過免疫蛋白印跡技術(shù)，發(fā)現(xiàn)化合物I11能夠明顯的降低CRM1蛋白的表達(dá)量。
　　綜上，基于哥納香甲素的基本骨架，對(duì)前期發(fā)現(xiàn)潛在的CRM1抑制劑，進(jìn)行了結(jié)構(gòu)優(yōu)化和構(gòu)效關(guān)系研究，共合成目標(biāo)化合物37個(gè)，結(jié)構(gòu)經(jīng)