藏靈菇乳中乳酸菌的分離和選育.pdf

1、乳酸菌是發(fā)酵乳生產(chǎn)中對產(chǎn)品品質(zhì)影響最直接、最重要的因素，它決定著發(fā)酵乳的營養(yǎng)成分和感官指標。藏靈菇是西藏林芝地區(qū)的特色傳統(tǒng)發(fā)酵乳，與知名的Kefir結(jié)構(gòu)成分相近，但起源不同。藏靈菇乳具有獨特的風(fēng)味和地域特色，從中尋找具益生潛力且可以作為發(fā)酵劑菌株十分可行且具有現(xiàn)實意義。
　　本研究從藏靈菇乳中分離得到了79株乳酸菌。其中M14、M16和G60三株乳酸菌在酪蛋白平板上產(chǎn)生透明圈，說明其能產(chǎn)蛋白酶；通過形態(tài)特征和生理生化特征鑒定三株菌

2、為干酪乳桿菌、植物乳桿菌和戊糖乳桿菌。三株菌的最大菌濃度可達到1010 cfu/mL，可以在pH1.5的環(huán)境下生長，可以耐受1.2%的膽鹽。三株菌中M16酶活力相對更強，pH7.2時酶活力為17.163μg/(mLmin)。通過試驗得到M16原生質(zhì)體制備與再生的最優(yōu)條件是：溶菌酶濃度0.5μg/mL，處理溫度35℃，處理時間30 min。在這個條件下，原生質(zhì)體的制備率低，為55.6%，但再生率較高，為42.2%。探究了紫外線誘變的致死劑

3、量，確定90%致死劑量為：15 w紫外燈下距離30 cm照射280 s。添加氯化鋰會增大正突變率，確定添加量為0.5%。以M16為出發(fā)菌株，對原生質(zhì)體進行紫外線-氯化鋰復(fù)合誘變育種。以酪蛋白再生平板初篩，選取透明圈大于出發(fā)菌株M16的菌落。共篩選出24株正向突變株，編號為M1601-M1624。其中，M1624、M1611和M1608三株菌培養(yǎng)液OD600值較高，生長旺盛，與出發(fā)菌株M16相比有顯著性提高；M1619和M1624產(chǎn)酸與出